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漳州市家畜家禽携带O157大肠杆菌的调查
[目的] 了解漳州市家畜家禽携带O157大肠杆菌的情况,为防制工作提供依据. [方法] 采集家畜家禽的新鲜粪便或肛拭标本,EC肉汤增菌,O157大肠杆菌病原体快检金卡筛选,SMAC选择性培养基分离培养,对可疑菌落进行血清学、生化试验鉴定,及PCR检测rfbO157、fliCH7基因. [结果] 从1 122份猪、鸭、鹅、鸡粪便或肛拭标本中检出19株O157大肠杆菌,其中猪源17株、鸭1株、鹅1株.根据血清学及动力试验,11株O157:H7;3株O157:H?;5株O157:NM. [结论] 漳州市部分家畜家禽中存在3种类型的O157大肠杆菌,在防制工作中应引起重视.
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O157血清群大肠杆菌分子亚型的研究
[目的] 了解山东和福建两省不同来源的O157血清群大肠杆菌分子亚型和菌株间的相关性. [方法] 对1993-1996年间分离到菌株进行脉冲场电泳(PFGE),图象经计算机处理后进行聚类分析. [结果] O157大肠杆菌染色体DNA用XbaI酶切后,经PFGE可生15～20条带,以90%的同源性作为界值,可将11株菌分成9个PFGE亚型,其中山东分离到的6株菌分成4个亚型,福建的5株菌分属5个亚型. [结论] 山东、福建的O157血清群大肠杆菌均存在多个克隆系.
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污水等环境中O157大肠杆菌的研究
[目的] 了解生活及养殖污水等环境中是否存在O157大肠杆菌.[方法] 选市区、郊区饲养场、屠宰场、农贸市场、医院和居民生活污水等作为调查对象,按季节定时定点采集污水、禽畜粪便和市场砧板等标本进行O157大肠杆菌分离培养、鉴定.[结果] 从养猪场、屠宰场、市场污水和生活污水以及猪粪、鸡粪、猪肉砧板中检出2类O157大肠杆菌(O157∶H7和O157∶NM).并发现夏秋季污水等环境中O157大肠杆菌检出率(2.7%)高于冬春季检出率(0.8%,P<0.05).[结论] 外环境中广泛存在O157大肠杆菌,并有其季节性,对人类存在潜在危害.
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能与大肠杆菌O157(H7)抗血清交叉凝集的5种细菌的分离和鉴定
[目的] 了解人兽及食品中能与大肠杆菌O157发生交叉凝集的细菌,为防止误诊提供参考.[方法] 开展调查,用大肠杆菌O157及H7抗血清、O157单克隆抗体进行玻片凝集、生化试验等检测.[结果] 从肉类及猪粪中检出5种(8株)肠道杆菌能与O157抗血清发生交叉反应,其中4种为国内外首次报道,2株检出菌且能与H7抗血清凝集,4株能产生LT肠毒素.[结论] 畜禽中某些种属的肠道细菌可携带与大肠杆菌O157及O157∶H7相同或相关抗原,故在鉴定O157∶H7大肠杆菌时除依血清学外,还应加用生化试验甚至致病因子检测作出后判定.
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龙岩市O157大肠杆菌的调查研究
[目的]为探索O157大肠杆菌在龙岩市人兽及食物中的存在情况,为防制提供依据.[方法]1999年5～10月在龙岩城区采集腹泻病人、家畜禽等肛拭标本以及市售猪肉、牛肉等食品标本,用SMAC选择性培养基、血清学试验、PCR和Vitek自动生化检测系统进行O157大肠杆菌分离鉴定,并对检出菌株进行致病性实验.[结果]在市售牛肉及某养猪场猪肛拭标本中检出了2种不同类型的O157大肠杆菌,其中O157:H7 3株,O157:NM 2株.检出菌株经PCR技术检测Slt、Hly基因阴性,但可使小鼠肠道发生病变.[结论]我市部分家畜中存在O157大肠杆菌,在防治工作中应引起重视.
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陕西省O157出血性大肠杆菌分布研究
目的了解陕西省家禽家畜O157大肠杆菌带菌和致病力情况以及市售食品的污染状况,分析对人群可能造成的威胁.方法根据我省不同地域选择监测点,采集监测点内养殖场或个体养殖户养殖的动物粪便1657份;集贸市场和超市销售的7类食品样品877份进行O157大肠杆菌监测,应用PCR技术对分离菌株进行毒力基因检测和流行病学分析.结果从动物粪便中分离出64株O157大肠杆菌,总带菌率3.86%,其中奶牛带菌率高,达10.89%.从食品样品中分离出6株,总污染率0.68%.70株分离菌通过PCR检测发现,大多数O157大肠杆菌不携带H7鞭毛素fliCH7基因以及stx1、stx2、eaeA、hlyA 4种毒力基因,含有fliCH7基因的9株菌则全部携带有stx2、eaeA、hlyA毒力基因,表现为fliCH7基因与已知毒力基因的相关性及分离菌株毒力基因图谱的一致性.结论陕西省猪、牛、鸡动物存在有O157大肠杆菌,并且食品已受到污染,所显示的毒力基因图谱单一,提示陕西省存在有O157大肠杆菌感染的威胁,有造成O157大肠杆菌流行或局部暴发流行的可能.
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鲁西南地区O157大肠杆菌动物宿主带菌情况调查
[目的]了解山东省鲁西南地区动物宿主携带肠出血性大肠杆菌O157的情况.[方法]将动物粪便直接接种EC肉汤增菌液,应用免疫磁珠富集分离于山梨醇麦康凯、麦康凯琼脂平板,点种Chromagar O157显色琼脂平板,纯化菌进行生化反应、血清学以及毒素因子检测等.[结果]2000年在鲁西南地区检测各类动物粪便1 055份,87份检出O157大肠杆菌,阳性率为8.25%.其中猪、鸡、羊粪便的阳性率分别为11.17%、8.36%、7.85%;金乡县阳性率为11.99%,枣庄市台儿庄区为6.70%,郯城县阳性率为5.09%.检出的94株菌株对丁胺卡那霉素、头孢唑啉、头孢三嗪、庆大霉素、妥布霉素敏感.94株O157大肠杆菌VT毒素阳性23株,阳性率24.47%,其中有动力的为42.86%,无动力的为13.56%,差异有统计学意义(P＜0.01).[结论]3个县(区)均在不同动物粪便中检出O157大肠杆菌,O157大肠杆菌VT毒素阳性率有动力菌株高于无动力菌株.
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西双版纳州肠出血性大肠杆菌O157:H7动物宿主带菌情况调查
目的:了解西双版纳州肠出血性大肠杆菌O157:H7动物宿主带菌情况,为制订防制策略提供依据.方法:采用免疫磁珠富集法,对282份入户采集的猪、牛、鸡、鸭、鹅、羊、鸽新鲜粪便标本进行肠出血性大肠杆菌O157:H7检测.结果:共检出肠出血性大肠杆菌O157:H7阳性标本27份,动物宿主的带菌率为9.57%.其中,牛带菌率高为15.05%,鸭带菌率为13.64%,猪带菌率为9.41%,鸡带菌率为3.45%,鹅、羊、鸽动物宿主未检出肠出血性大肠杆菌O157:H7.结论:西双版纳州动物宿主中存在肠出血性大肠杆菌O157:H7感染,具有潜在的流行性威胁.
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郯城县2000～2001年0157大肠杆菌动物宿主带菌情况调查
目的:了解郯城县O157大肠杆菌动物宿主带菌情况.方法:标本直接接种mEC肉汤增菌液,先用免疫金标法筛选,后用免疫磁珠富集分离山梨醇麦康凯、麦康凯琼脂平板,点种CHROMagar O157显色琼脂平板,纯化菌进行生化反应、血清学等检测.结果:入户采集牛、驴、羊、猪、鸡等新鲜粪便,2000年共采集275份,检出4株O157:H7,6株O157:H-,2株O157:H38,1株O157:H19,1株O157:H45,共计14株(5.09%);2001年共采集629份,检出4株O157:H7,1株O157:H-,1株O157:H8,共计6株(0.95%).结论:2000～2001年调查的动物宿主带菌率为2.21%.2001年调查的动物粪便带菌率比2000年明显下降(x2=13.29,P＜0.01).
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西安市O157出血性大肠杆菌监测研究
目的 为了解西安市O157大肠杆菌在腹泻病人中的感染、家禽家畜带菌以及食品污染情况,分析对人群可能造成的威胁.方法 在某市选择7家监测医院、6个区县和多个集贸市场,采集腹泻病人、动物粪便和食品标本,进行O157大肠杆菌监测,应用PCR技术对分离菌株进行毒力基因检测分析.结果 O157大肠杆菌在腹泻病人粪便中分离出1株,阳性检出率为0.16％；从动物粪便中分离出8株,阳性检出率0.80％,其中奶牛带菌率高,达4.29％；食品标本中未分离出阳性菌.全部检出菌均含有O157外膜蛋白O157 rfbe基因,阳性率100％.1株阳性菌4种毒力基因均为阴性,一株携带stx2毒力基因,其余7株均携带有stx2、eaeA、hlyA毒力基因.结论 西安市腹泻病人及宿主动物中存在O157大肠杆菌感染,有造成O157流行或局部暴发流行的潜在威胁,应进一步加强O157监测工作.
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郯城县O157大肠杆菌动物宿主带菌情况调查
[目的]了解郯城县O157大肠杆菌动物宿主带菌情况. [方法]标本直接接种mEC肉汤增菌液,先用免疫金标法筛选,后用免疫磁珠富集分离山梨醇麦康凯、麦康凯琼脂平板,点种CHROMagar O157显色琼脂平板,纯化菌进行生化反应、血清学等检测.[结果]入户采集牛、驴、羊、猪、鸡等新鲜粪便275份,共检出4株O157:H7,6株O157:H-,2株O157:H38,1株O157:H19,1株O157:H45,共计14株.[结论] 2000年调查的动物粪便带菌率为5.09%.
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双重实时荧光PCR快速检测O157大肠杆菌的初步研究
[目的]建立双重实时PCR体系,实现对O157大肠杆菌rfbE和stx2基因的同步检测.[方法]根据GenBank公布的O157大肠杆菌rfbE和stx2基因序列,应用分子生物学软件设计两对引物和TaqMan探针,并对荧光定量PCR反应条件进行优化,建立实时荧光定量PCR检测O157大肠杆菌的反应体系,并对该法的特异性、敏感性和重复性进行了评价.[结果]所有O157大肠杆菌菌株的检测结果均为阳性,而所有其他菌株检测结果均为阴性;该方法对O157大肠杆菌纯培养的检测范围为100～106 cfu/μl,重复性检测的变异系数均小于5%.对模拟污染牛奶样本的检测范围为102～106 cfu/μl.从细菌核酸提取至完成检测约需3 h.[结论]基于Taqman探针技术的实时PCR检测体系可同步检测O157大肠杆菌rfbE和stx2基因,具有快速、灵敏度高、特异性强等优点,可用于O157大肠杆菌食物中毒的快速诊断和食品微生物检测.
