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鸡朊蛋白序列分析及结构特征探究
目的 分析罗曼鸡朊蛋白高级结构,探讨朊蛋白病种间屏障形成机制和朊蛋白构象转变机理.方法 根据GenBank提供的鸡朊蛋白基因序列设计特异性引物,扩增出8只罗曼鸡朊蛋白基因的完整开放阅读框(ORF).结果 序列分析表明8只罗曼鸡朊蛋白基因ORF有两处发生碱基置换(243C→T,296A→G),其中243位点为同义码替换.应用生物信息学工具分析罗曼鸡和已知的68个物种的朊蛋白基因,获得基于PrP氨基酸序列的遗传进化信息,进一步依据同源建模法构建人和鸡朊蛋白三维结构模型.结论 不同物种朊蛋白构象同源性在很大程度上决定了朊蛋白病种间屏障的形成,多种因素共同作用导致正常朊蛋白转变为致病型构象.
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抗幽门螺杆菌粘附素HpaA卵黄抗体的制备
目的研制高效价特异性的抗幽门螺杆菌黏附素鸡卵黄抗体免疫球蛋白抗体.方法用纯化重组幽门螺杆菌黏附素(Helicobacterpylori adhesin A,rHpaA)抗原免疫22周龄罗曼鸡,母鸡免疫应答后,在卵黄中产生抗幽门螺杆菌黏附素抗体;经硫酸铵法初步纯化浓缩后;以间接ELISA鉴定抗体效价及免疫学活性;采用Bradford法测定蛋白含量;并用SDS-PAGE法测定分子量及鉴定抗体纯度.结果母鸡初次免疫第10d即有抗体产生,初次免疫后75d左右抗体效价超过1:10 000;高可达为1:12 800.卵黄抗体经硫酸铵法纯化后,用SDS-PAGE分析,出现两条蛋白带,纯度达95%以上.其含量为10.56mg/ml蛋黄.结论本研究首次研制并鉴定抗黏附素卵黄抗体,开拓了我国预防幽门螺杆菌感染的新领域,分析了抗体在产蛋期卵黄液中表达的进度,为今后该抗体的持续、高质量诱导奠定基础.有望获得高效价、高产量的抗黏附素的IgY抗体(IgY-HpaA),为制备口服制剂开辟了广阔前景.
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罗曼鸡不同参数听性脑干反应的实验观察
由于鸡耳蜗毛细胞在受损伤后具有一定的自我恢复能力[1],以鸡为对象研究毛细胞再生的实验越来越多.为了观察不同刺激及其它设置 参数所引出的听性脑干反应(auditory brainsten response, ABR)之间的差异,应用不同刺激率的短声对罗曼鸡(Romann chicken)进行ABR测试,比较潜伏期的差异,观察滤波对 ABR 波形的影响,并按短声(click)的频率特征[2],用4 000 Hz 短音(tone pip)作对比,报告如下:
