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  • 恶性疟原虫HT1基因荧光真核表达载体的构建及细胞内表达

    作者:徐劲;余新炳;叶苓;陆家海

    目的体外扩增恶性疟原虫海南分离株的已糖转运体基因(pfHT1),构建恶性疟原虫HT1基因真核融合表达载体并检测其表达情况,为用于DNA免疫作准备.方法特定PCR引物的设计,扩增,基因组DNA提取,连接,鉴定,细胞培养,脂质体转染,荧光显微镜观察.结果从恶性疟原虫海南分离株基因组DNA中扩增特异的编码pfHT1的基因序列,片断大小为1516bp,经酶切鉴定证实成功构建pEGFP-HT1融合表达质粒,将其转染体外培养的细胞后,可见融合蛋白表达产生的明亮的绿色荧光.结论成功构建pEGFP-HT1融合表达质粒,并实现在细胞内的表达.为进行动物体内的DNA免疫打下了基础.

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