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口腔扁平苔藓患者血清差异蛋白表达检测及意义
目的：探讨口腔扁平苔藓（ OLP）患者血清差异蛋白表达及意义。方法选择6例OLP患者（观察组）和6例健康志愿者（对照组），抽取空腹静脉血后采用苯酚抽提法提取血清蛋白，Bradford法测定蛋白含量，双向荧光差异凝胶电泳法分离检测差异蛋白点，液相色谱-质谱联用技术鉴定差异蛋白。选择其中研究较少的蛋白，采用Western blotting法检测两组蛋白相对表达量。结果两组血清差异蛋白点（583±183）个，其中重复性好的蛋白差异点20个，质谱分析蛋白序列鉴定出12种蛋白质。12种蛋白质中，7种（补体C3、激肽原、α-2-巨球蛋白、人抗凝血酶Ⅲ、分泌型IgA、补体C9、β-1-金属结合球蛋白）在观察组血清中表达降低，5种（结合珠蛋白、铜蓝蛋白、载脂蛋白AⅠ、维生素D、人类因子B）表达升高。观察组血清补体C3和人抗凝血酶Ⅲ蛋白相对表达量均低于对照组，载脂蛋白AⅠ高于对照组（P均＜0．01）。结论 OLP患者血清中存在12种差异蛋白质，血清补体C3和人抗凝血酶Ⅲ蛋白表达均降低，载脂蛋白AⅠ表达升高，其发病可能与免疫功能降低及感染有关。
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气相色谱内标法测定人抗凝血酶Ⅲ磷酸三丁酯残留量
人抗凝血酶Ⅲ（antithrombin Ⅲ，AT－Ⅲ）是血液中重要的抗凝血因子，可抑制血液中75％的凝血酶活力，使激活的FⅨ、FⅩ、FⅪ和FⅫ失去活性。 AT－Ⅲ水平降低时，血浆抗凝血活性降低，易形成血栓。自1974年AT－Ⅲ试用于临床以来，其疗效及适应证也日益增多［1－3］。冻干AT－Ⅲ为人血液制品，其病毒灭活工艺采用S／D法，此工艺中加入的磷酸三丁醋（tri（n－butyl）phosphate，TBP）对包膜病毒有显著的灭活效果，但是对小鼠的LD50为602 mg／kg，对人体有害［4－6］，2010年版药典规定TBP的残留量应不高于10μg／ml［7］。本文利用气相色谱内标法对冻干AT－Ⅲ制品中TBP的残留量进行测定，方法准确可靠，灵敏度高，为该制品质量控制的方法建立提供实验依据。
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人抗凝血酶Ⅲ纳米膜过滤工艺优化
目的 考察Asahi Kasei(旭化成)公司纳米膜过滤人抗凝血酶Ⅲ(Human AntithrombinⅢ,ATⅢ)的回收率,优化纳米膜过滤工艺.方法 选取旭化成公司3种不同规格型号的纳米膜Planova@15N,Planova@20N和Planova@BioEX进行ATⅢ过滤回收率考察,通过留取生产工艺中不同阶段不同蛋白浓度的制品,优化过滤蛋白总量,确定纳滤米过滤工艺位置.结果 蛋白浓度16 mg/mL的ATⅢ通过Planova@20N过滤获得蛋白总量高,ATⅢ蛋白及效价回收率也较高,为佳纳滤蛋白浓度.结论 通过本研究筛选出Planova@20N,佳纳滤蛋白浓度为16 mg/mL,经去除病毒验证其对细小病毒的去除率LRV ＞4.0,终确定纳滤工艺在人抗凝血酶Ⅲ工艺中超滤浓缩后,既符合生产工艺要求并可获得高回收率.
