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鱼藤酮诱导制备SD大鼠帕金森病模型的可行性
目的：采用长期低剂量皮下注射鱼藤酮的方法制备SD大鼠帕金森病模型。方法将36只SD大鼠随机分为实验组24只和对照组12只，实验组给予l．5 mg／（ kg? d）鱼藤酮皮下注射，对照组注射等体积葵花油，连续30 d，每周停药1 d。给药结束后进行行为学测试，并断头取脑，采用免疫组化SP法检测中脑黑质多巴胺能神经元数目。结果对照组行为学改变不明显，其黑质多巴胺能神经元数目较多；实验组出现明显的行为学改变，其黑质多巴胺能神经元数目减少，符合PD的诊断标准。结论颈背部皮下注射鱼藤酮可成功制备SD大鼠帕金森病模型。
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成年小鼠颈动脉体细胞的培养方法及低氧对其特性的影响
目的:建立体外分离培养小鼠颈动脉体细胞的方法.方法:摘取小鼠双侧颈总动脉分叉,采用机械剪切和混合酶消化颈动脉体(CB),培养24h后固定细胞,通过免疫荧光染色鉴定细胞类型,并在低氧培养3d后,观察TH阳性细胞数量的变化.结果:原代培养的CB细胞绝大部分为单细胞,有少数呈簇状生长的细胞群.所分离的原代CB细胞中,主要有TH+、GFAP+和Nestin+三种类型的细胞组成；低氧培养3d后TH+细胞数量较常氧组明显增加.结论:从分离步骤和消化方式等方面优化小鼠CB细胞的原代培养方法,而低氧可以增加CB细胞中TH+细胞的数量,可能与促进CB细胞中神经干细胞样细胞的增殖有关.
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不同时程吗啡依赖对大鼠中脑腹侧被盖区多巴胺能神经元的影响
目的:观察不同时程吗啡依赖对大鼠中脑腹侧被盖区(ventral tegmental area,VTA)多巴胺能神经元的影响.方法:建立吗啡慢性依赖大鼠模型,石蜡包埋组织连续切片,免疫组织化学染色观察多巴胺能神经元特异性标记物酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)的表达变化.结果:TH免疫组化结果显示随着吗啡依赖时间的延长VTA区内TH阳性细胞逐渐减少,吗啡依赖6周组阳性细胞减少明显.结论:较长时程吗啡依赖大鼠VTA多巴胺能神经元损伤明显.
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不同时程吗啡依赖对大鼠中脑黑质多巴胺神经细胞的影响
目的 观察不同时程吗啡依赖对大鼠中脑黑质(Substantia nigra,SN)多巴胺能神经细胞的影响.方法 按逐日递增原则背部皮下注射盐酸吗啡,建立吗啡依赖大鼠模型,取脑组织经10％福尔马林液固定后石蜡包埋,组织连续切片,免疫组织化学和免疫荧光染色,观察多巴胺能神经细胞特异性标记物酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)蛋白表达变化;Fluoro-Jade B染色观察吗啡依赖不同时程黑质多巴胺能神经细胞变性坏死情况.结果 TH免疫组化结果显示随着吗啡依赖时间的延长黑质阳性细胞逐渐减少,吗啡依赖6周组阳性细胞减少明显.Fluoro-Jade B染色结果证实多巴胺能神经细胞发生了变性坏死.结论 较长时程吗啡依赖大鼠黑质多巴胺能神经细胞损伤明显.
关键词： 法医毒理学 吗啡依赖 黑质 TH阳性细胞 Fluoro-Jade B
