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球松素对C3H10T1/2细胞成脂分化的抑制作用研究
目的探讨山核桃叶提取物球松素对小鼠胚胎间充质干细胞C3H10T1 /2 成脂分化的影响.方法MTS 法检测不同浓度球松素处理的细胞成活率以界定适宜的浓度范围;油红O 染色法结合异丙醇萃取法定性和定量分析球松素对细胞成脂分化的影响;GPO-PAP 酶法检测球松素处理后细胞中甘油三酯含量的变化;荧光定量PCR 和Western blot 分别检测成脂分化中C/EBPα、PPARγ、FABP4 mRNA 和相关蛋白的表达水平.结果30 μmol /L、50 μmol /L 球松素对细胞成脂分化有明显的抑制作用,且能显著减少甘油三酯堆积;10 μmol /L、30 μmol /L、50 μmol /L 球松素能明显抑制PPARγ、C/EBPα mRNA 表达;5 μmol /L、10 μmol /L、30 μmol /L、50 μmol /L 球松素能明显降低FABP4 mRNA 表达;50 μmol /L球松素能明显降低PPARγ、C/EBPα 和FABP4 蛋白表达.结论山核桃叶提取物球松素对C3H10T1 /2 细胞成脂分化具有抑制作用,可能与调控PPAR 信号通路和相关基因表达有关.
关键词: 球松素 小鼠胚胎间充质干细胞 成脂分化 -
山核桃叶总黄酮抑制C3H10T1/2细胞成脂分化的作用研究
目的:研究山核桃叶总黄酮对小鼠胚胎间充质干细胞C3H10T1/2成脂分化的影响.方法:建立C3H10T1/2细胞成脂分化模型,油红O染色法分析山核桃叶总黄酮对C3H10T1/2细胞成脂分化的影响;GAP-PAP酶法测定C3H10T1/2细胞成脂分化过程中甘油三酯含量变化;采用荧光定量PCR和Western Blot检测过氧化物酶体增殖物激活受体γ (PPARγ)、CCAAT增强子结合蛋白α(C/EBPα)以及脂肪型脂肪酸结合蛋白4(FABP4)的mRNA和蛋白表达水平.结果:山核桃叶总黄酮能抑制C3H10T1/2细胞成脂分化,20 μg/mL山核桃叶总黄酮能显著减少甘油三酯的堆积,降低PPARγ、C/EBPα、FABP4的mRNA和蛋白表达水平.结论:山核桃叶总黄酮对C3H10T1/2细胞成脂分化具有抑制作用,其机制可能与抑制PPARγ、C/EBPα、FABP4的表达有关.
关键词: 山核桃叶总黄酮 小鼠胚胎间充质干细胞 成脂分化 -
小檗碱对C3H10t1/2细胞增殖与成脂分化的影响
目的:探讨小檗碱对小鼠胚胎间充质干细胞C3H10t1/2细胞增殖和成脂分化的影响.方法:采用MTS法对细胞增殖情况进行检测,同时通过油红O染色,异丙醇溶解法检测细胞成脂分化情况,GPO-PAP酶法检测细胞中甘油三酯(TG)含量,RT-PCR检测成脂分化关键转录因子CCAAT增强子结合蛋白α(C/EBPα)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)和分化标志物脂肪型脂肪酸结合蛋白(fatty acid binding protein,FABP4) mRNA的表达.结果:小檗碱浓度在50 μmol/L以下,可促进C3H10t1/2细胞的增殖;当小檗碱浓度达到10 μmoL/L时可显著抑制C3H10t1/2细胞成脂分化及甘油三酯的堆积,并呈一定的剂量依赖性;10 μmol/L小檗碱处理组C3H10t1/2细胞PPARγ mRNA表达在诱导分化第4、7、10天显著降低(P<0.05或P<0.01),C/EBPα mRNA的表达在分化第1、7、10天显著降低(P<0.05或P<0.01),FABP4 mRNA的表达在分化第10天显著降低(P<0.05).结论:小檗碱能够促进C3H10t1/2细胞增殖,并能够抑制其成脂分化.
关键词: 小檗碱 小鼠胚胎间充质干细胞 增殖 成脂分化