首页 > 文献资料
-
ELISA法快速检测食品、饲料中AFB1
黄曲毒素B1〈AFB1〉具有强烈毒性和致癌性.食品、饮料中AFB1的测定已有报道[1,2].薄层层析法操作繁杂,干扰严重,甚至可能得出错误结果,且是半定量方法.为此需建立一个灵敏可靠的检测方法.酶联免疫吸附法(ALISA)特异性极强,灵敏度高.采用直接竞争酶联免疫吸附法检测AFB1进行探讨,取得良好效果.1 实验部分1.1 仪器与试剂1.1.1 仪器酶标仪(内置450nm滤光片)或AFB1测定仪;恒温培养箱(0℃-50℃);微量振荡器;天平;50μl微量进样器及配套吸头.
-
顺铂、米托蒽琨及阿糖胞苷对兔晶体上皮细胞的作用
目的:白内障囊外摘除术后晶体后囊的混浊(后发性白内障)是影响视功能的主要并发症之一.业已证明残留的晶体上皮细胞增殖是形成后囊的混浊的主要原因.对预防后囊混浊,目前尚无能应用于临床的有效抑制晶体上皮细胞增殖的方法.本文研究顺铂(cis-Platin,PDD),米托蒽琨(Mitoxantrone, Mit)和阿糖胞苷(Cytosine Arabinoside, Ara-C)对兔晶体上皮细胞(rabbit lens epithelial cells, RLEC)增殖的抑制作用.方法:分离晶体囊膜行组织细胞培养,在37℃饱和湿度含7%CO2培养箱中培养24 h后取出,加入不同浓度的PDD、Mit和Ara-C,其终浓度PDD为2.5、5、10、20及40μg/mL,Mit为0.5、1、2、4及8μg/mL和Ara-C为25、50、100、200及400μg/mL,再分别培养24 h和72 h后,加入20μL 5 mg/mL MTT(methyl thiazolyl tetrazolium)试剂,培养4 h,加入200μL二甲基亚砜溶液,室温下微量振荡器振荡5 min,自动酶标读数仪比色(波长600 nm).电镜观察细胞超微结构的变化,流式细胞仪观察细胞周期的变化.结果:PDD和Mit作用于传代培养RLEC 24 h IC50分别为38.92μg/ml、8.92μg/mL;72 h的IC50分别为6.71μg/mL、2.04μg/mL.正常细胞电镜照片显示,细胞表面有微绒毛,细胞器丰富,核形态不很规则,常染色质多,异染色质少,细胞生长活跃.药物作用后可见明显的细胞凋亡.流式细胞仪检查可见明显的细胞周期的变化,G0-G1期由正常的57.78%升至73.26%(Mit)和77.53%(PDD),S期由正常的30.44%降至14.68%(Mit)和10.41%(PDD),细胞活跃程度明显降低.而Ara-C对兔晶体上皮细胞无明显抑制作用.结论:顺铂、米托蒽醌均为剂量依赖型和时间依赖型药物,可有效抑制兔晶体上皮细胞的生长,而阿糖胞苷对兔晶体上皮细胞增殖无明显抑制作用.
-
包被管的固定振荡
目前在临床检验中用包被管作免疫测试已经是很普遍了。试剂盒中带有成套的包被管和支架，用着十分方便，使以往自己预包被的劳动也取消了，深受广大基层医院的欢迎。我们在使用中发现，试剂盒中的包被管支架通常是4.6 cm宽，而微量振荡器上的铁托架是8.8 cm宽，放在上面不能固定，振荡的效果不理想。我们针对这一问题作了以下改制，将铁托架上的一侧边两端打两个孔，在孔中加上螺栓，螺栓长为4.5 cm左右，调整螺栓就能将窄的包被管支架固定在振荡器的铁托架上，收到了满意的振荡效果。 如果不想如此复杂的改制，就用预包被板锯成3.8 cm宽的一个板条，振荡时与4.6 cm宽的包被管支架一起放在振荡器的铁托架上也能起到固定的目的，遇有其他宽度的包被管支架，再做一个就可以了，这样也很方便。 经过我科的应用效果满意，这点实验中的小方法，希望能给同行们一点帮助。
