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抗TGF-β2抗体对滤过泡瘢痕成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白表达的影响
目的 观察抗转化生长因子-β2(TGF-β2)抗体对体外培养的滤过泡成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白表达的影响.方法 利用手术修复人眼小梁切除术后失败滤过泡修复时切除下来的瘢痕组织进行组织块培养,获得成纤维细胞(FB).将0、0.01、0.1、1μg/mL抗TGF-β2抗体作用于FB 24h以及0.14μg/mL(半数抑制率质量浓度,IC50)抗体作用0、24、48、72h,通过生物化学显色法、RT-PCR法检测抗TGF-β2抗体对成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的表达量. 结果在FB中加入0、0.01、0.1、1μg/mL抗TGF-β2抗体作用24h及IC50质量浓度处理0、24、48、72h,结果显示随着抗TGF-β2抗体质量浓度增加及作用时间延长,Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达依次减少,羟脯氨酸(HPr)及胶原含量逐渐降低(P＜0.05).结论 抗TGF-β2抗体能减少Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的表达及合成.
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抗TGF-β2抗体对青光眼滤过泡瘢痕成纤维细胞周期的影响
目的 观察抗转化生长因子-β2抗体(抗TGF-β2抗体)对体外培养的滤过泡成纤维细胞(FB)周期的影响.方法 利用手术修复青光眼小梁切除术后失败滤过泡时切除下来的瘢痕组织进行原代细胞培养,获得FB.将浓度为0、0.01、0.1、1mg/L的抗TGF-β2抗体作用于FB 24h以及用半数抑制率(IC50)0.14mg/L作用0、24、48、72h,通过流式细胞仪(FCM)检测抗TGF-β2抗体对细胞周期的影响.结果 随着抗TGF-β2抗体浓度增大及作用时间的延长,FBG1期细胞百分数增多,而S、G2期的细胞含量逐渐减少,FB增殖指数呈下降趋势(P<0.05).结论 抗TGF-β2抗体能阻断FB从G1进入S期,使细胞停滞在G1期,从而抑制细胞的增殖过程.
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抗TGF-β2抗体对青光眼术后滤过泡成纤维细胞凋亡的影响
目的 观察抗转化生长因子-β2(Anti-Transforming Growth Factor-B2 Antibody,rhAnti-TGF-β2 mAb)抗体对体外培养的小梁切除术后失败滤过泡成纤维细胞凋亡及caspage-3的表达的影响.方法 利用手术修复小梁切除术后失败的滤过泡时切除下来的瘢痕组织进行原代细胞培养,获得成纤维细胞(fibroblagts,FB).将不同浓度的0、0.01、0.1、1μg/nl抗TGF-β2抗体作用于FB 24h以及用半数抑制浓度(IC50)0.14μg/ml作用0.24、48、72h,利用流式细胞仪、免疫组化法检测抗TGF-β2抗体诱导FB凋亡的情况及cagpage-3的表达.结果 在FB中加入不同浓度的抗体作用24h及IC50浓度处理FB 0、24、48、72h,结果显示随着抗体浓度增大,作用时间延长,FB棕褐色的cagpage-3强阳性表达增加,抗TGF-β2抗体高浓度组可见明显的亚二倍体凋亡峰,凋亡率为(9.8+1.3)%.结论 抗TGF-β2抗体能诱导FB凋亡,cagpage-3参与了诱导的凋亡过程.
