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类风湿性关节炎患者血清中sCR1和MMP-2、MMP-9水平的检测及其临床意义
目的 通过检测类风湿关节炎患者血清中可溶性补体Ⅰ型受体(sCR1)和基质金属蛋白酶(MMP-2)、MMP-9的水平,为临床诊断和治疗提供依据,探讨其水平变化在类风湿性关节炎中的临床意义.方法 选择类风湿关节炎67例,疾病活动情况用DAS28评分来判断,健康体检者65例作为对照组.采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清sCR1、MMP-2和MMP-9的含量水平,分析疾病活动情况的相关性.结果 类风湿性关节炎患者血清中sCR1水平低于健康体检者(P＜0.05)；MMP-2在类风湿性关节炎患者血清中含量高于健康体检者(P＜0.01),并与疾病活动情况呈正相关；MMP-9含量显著高于正常体检者(P＜0.05),MMP-9与疾病活动程度呈正相关.结论 血清中sCR1在类风湿性关节炎患者血清中降低,MMP-2、MMP-9在类风湿性关节炎中显著升高,可作为检测病情活动的监测指标.sCR1、MMP-2和MMP-9与类风湿性关节炎病情进展有重要相关性.提示sCR1、MMP-2和MMP-9可能在类风湿性关节炎发病中起重要作用.
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慢性乙型肝炎患者红细胞天然免疫黏附功能与血清sCR1变化的相关性研究
目的 研究乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)阳性慢性乙型肝炎患者红细胞天然免疫黏附功能(RNIAF)与血清可溶性Ⅰ型补体受体(sCR1)的浓度变化,分析二者的相关性,并探讨其临床意义.方法 选择48例肝功能正常、血清HBV DNA大于106 U/mL的HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者作为肝功能正常组,48例转氨酶高于正常值2倍以上的HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者作为肝功能异常组.检测RNIAF,同时采用酶联免疫定量检测试剂盒测定血清sCR1含量.结果 肝功能异常组的HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者RNIAF较肝功能正常组及健康对照组显著下降,而sCR1含量显著升高,差异有统计学意义(P<0.01).动态观察持续肝功能异常的HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者RNIAF与血清sCR1含量变化,显示二者呈明显负相关(r=-0.91).HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者血清sCR1含量与凝血酶原活动度也呈明显负相关(r=-0.87).结论 HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者RNIAF与血清sCR1的含量变化与肝脏功能损伤严重程度密切相关,可作为临床判断肝病患者病情严重程度及预后的参考指标.
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人sCR1结合C3b结构域基因的克隆及在大肠杆菌中高效表达
目的克隆表达人可溶性补体受体1型(sCR1)结合C3b结构域基因.方法从外周血单核细胞中提取总RNA,RT-PCR克隆编码sCR1-SCR15-18的cDNA,连接pMD-18T载体进行DNA序列分析,再亚克隆pET32原核表达载体,构建pET32-sCR1-SCR15-18重组表达载体,转化BL21菌,用IPTG诱导表达,表达产物通过免疫印迹实验鉴定.结果获得了预期的扩增目的片段,成功构建了pMD-18T重组克隆载体,核苷酸测序结果与GenBank登录的人sCR1-SCR15-18 cDNA序列一致.成功的构建了原核表达载体pET32-sCR1-SCR15-18,目的蛋白的表达量占菌体总蛋白的40%,并在菌体内形成包涵体.免疫印迹实验显示,在分子量约43×103处出现单一条带的阳性结果.结论从单核细胞中克隆出sCR1-SCR15-18片段基因,人sCR1-SCR15-18在大肠杆菌中得到高效表达.
关键词： 可溶性补体Ⅰ型受体 反转录多聚酶链式反应 互补DNA克隆 蛋白质表达
