首页 > 文献资料
-
吴茱萸生物碱类抑制大鼠血管平滑肌细胞增殖作用的比较
目的 比较吴茱萸总碱、吴茱萸碱和吴茱萸次碱抑制血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖的作用.方法 采用SD大鼠胸主动脉贴壁法,培养VSMCs并传代,通过特异性抗体SM α-actin进行免疫组化细胞学鉴定；MTT比色法检测VSMCs的增殖,制作各生物碱抑制VSMCs增殖的量效曲线,并依照改良寇式法计算吴茱萸各生物碱的半数抑制浓度(IC50),比较三种生物碱的效应.结果 当质量浓度小于3×10-6g·L-1时,吴茱萸总碱的抑制作用低于等量的吴茱萸碱和次碱；高于此浓度,吴茱萸总碱抑制效应强于吴茱萸碱和次减,三种生物碱的IC50分别是1.72×10-5g·L-1、2.56×10-4g·L-1和3.42 ×10-4g·L-1.但总碱浓度高于3×10-5 g·L-1时,则呈细胞毒作用.结论 吴茱萸碱、次减和总碱均有抑制VSMCs增殖作用,吴茱萸碱的抑制作用略高于次减,总碱浓度过高可产生细胞毒作用.
-
多指标正交试验优选萸黄连佳提取工艺
目的:分别以萸黄连中小檗碱、吴茱萸总碱、总生物碱为检测指标对萸黄连进行提取工艺优选.方法:采用单因素考察和正交试验相结合的方法,正交试验中选取乙醇含量(A)、提取次数(B)、提取时间(C)、溶剂用量(D)4个因素,每个因素选取3个水平进行试验.结果:因素A、C对检测指标均有显著性影响,因素B、D为不显著因素,可结合生产实际进行选择.结论:以80%乙醇10倍量提取2次,每1 h为佳提取工艺.
-
吴茱萸生物碱类抑制大鼠心肌细胞肥大作用的比较
目的 比较吴茱萸碱(Evo)、吴茱萸次碱(Rut)和吴茱萸总碱(Eta)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导大鼠心肌细胞肥大的抑制作用.方法 将培养3d后的新生SD大鼠原代心肌细胞随机均分为对照组、模型组、Evo组、Rut组和Eta组;采用Image-Pro Plus 6.0图像分析系统测量单个心肌细胞的表面积,BCA法测定细胞的蛋白含量,实时荧光定量PCR检测心肌细胞肥大的标志性基因心房利钠因子(ANF)的表达.结果 AngⅡ能明显增加心肌细胞的表面积、细胞蛋白的含量和ANF的表达;Evo、Rut和Eta能明显抑制AngⅡ诱导的心肌细胞表面积的增加、细胞蛋白质含量的增多和ANF mRNA的表达,且抑制作用呈量效关系;但相同浓度的抑制效应无明显差别.结论 Evo、Rut和Eta可明显抑制AngⅡ诱导的心肌细胞肥大,但抑制效应无明显差异.
-
吴茱萸总碱对大鼠原代心肌细胞肥大的抑制作用
目的 研究吴茱萸总碱对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导大鼠心肌细胞肥大的抑制作用, 探讨其可能的作用机制.方法 应用胰酶和Ⅱ型胶原酶混合消化法制备新生大鼠原代心肌细胞.实验随机分为正常对照组, 模型组(AngⅡ0.1 μmol/L), Eta 1、10、100 mg/L组和Eta 100 mg/L+L-NAME(1.5×10-2 mol/L)组.心肌细胞加入不同浓度Eta 30 min后再加入AngⅡ 0.1 μmol/L作用24 h.采用Image-Pro Plus 6.0图像分析系统测量心肌细胞的表面积, BCA 法测定总蛋白含量, 比色法测定细胞培养上清液中一氧化氮(NO)含量和一氧化氮合酶(NOS)活性, RT-PCR 检测心房利钠肽(ANP)、丝裂素活化蛋白激酶磷酸酶-1(MKP-1)和内皮型一氧化氮合酶(eNOS)基因的表达.结果 与正常对照组比较, AngⅡ 0.1 μmol/L明显诱导心肌细胞肥大, 增加心肌细胞表面积、细胞蛋白质含量和ANP mRNA的表达;降低NOS活性、NO含量和eNOS mRNA表达.与模型组比较, Eta 10和100 mg/L明显抑制AngⅡ诱导的心肌细胞肥大, 心肌细胞表面积、蛋白质含量及ANP mRNA的增加;明显增加eNOS和MKP-1 mRNA表达、NOS活性和NO的产生.L-NAME能取消Eta抗心肌细胞肥大效应.结论 Eta可抑制AngⅡ诱导的心肌细胞肥大, 作用机制可能与Eta增加心肌细胞NO的生成,促进MKP-1表达,增加MAPK去磷酸化有关.
-
吴茱萸碱、吴茱萸次碱和吴茱萸总碱的小鼠急性毒性
目的 观察吴茱萸碱、吴茱萸次碱和吴茱萸总碱的急性毒性,为吴茱萸碱类的深入研究提供实验依据.方法 昆明种小鼠,清洁级,雌雄兼用,随机分为4组:空白对照、吴茱萸碱、吴茱萸次碱和吴茱萸总碱组.各给药组分别单次灌胃给药2 g/kg,无小鼠死亡.然后进行单次灌胃大给药量(5g/kg)实验,连续观察14 d.观察小鼠一般指标及体重变化;分别在给药后2h、8h、1d、7d和14 d测定血清谷氨酸转氨酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、肌酐(Crea)和尿素(Urea)的浓度;同时进行心、肝、脾、肺、肾和脑组织病理学观察,并计算脏器指数.结果 在观察的14 d内无小鼠死亡.与空白对照组比较,吴茱萸3种生物碱给药小鼠的皮毛、行为活动、呼吸、精神状态、饮食等均未见明显异常改变.测定药后2h、8h、24 h、7d和14dALT、AST、Crea、Urea及主要脏器指数,与对照组没有明显差异.肉眼及组织病理学观察没有异常发现.吴茱萸碱组于给药后7d和14 d时,体重较对照组呈下降趋势,但无统计学意义.结论 小鼠分别单次灌胃吴茱萸碱、吴茱萸次碱或吴茱萸总碱大给药量5g/kg,连续观察14 d,未见明显毒性.
-
吴茱萸总碱抑制大鼠左室肥厚及对钙调神经磷酸酶信号通路的影响
目的 观察吴茱萸总碱对大鼠腹主动脉缩窄术后压力超负荷所致心肌肥厚的抑制作用,及对钙调神经磷酸酶信号通路的影响.方法 采用腹主动脉缩窄制备SD大鼠左室肥厚模型.实验分为假手术组,模型组,吴茱萸总碱低(10 mg/kg),中(20 mg/kg)、高剂量组(40 mg/kg)和L-arg(200 mg/kg)阳性药对照组.模型制备次日大鼠灌胃给药4周,记录大鼠体重(BW),测量左室重量(LVW),计算左室肥厚指数(LWHI),行病理切片观察心肌肥厚,以明确吴茱萸总碱防治左室肥厚效应.检测左室血流动力学参数,实时荧光定量PCR检测心肌ANF、CaN mRNA的表达.结果 与假手术组比较,模型组大鼠明显增加LVW和LWHI(P＜0.05),病理学见左室心肌结构和心肌细胞严重受损,左室内压峰值(LVSP)和舒张期末压(LVEDP)明显升高(P＜0.05),而±dp/dt max显著降低(P＜0.01).与模型组比较,吴茱萸总碱中、高剂量明显抑制大鼠因腹主动脉缩窄所致LVW、LWHI增加,LVSP、LVEDP的升高和±dp/dtmax降低,明显减轻心肌病理损伤,下调ANFmRNA和CaN mRNA的表达(P＜0.01).结论 吴茱萸总碱20 mg/kg和40 mg/kg可防治腹主动脉缩窄所致大鼠心肌肥大,其机制可能与抑制钙调磷酸神经酶信号通路有关.
