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  • 伤寒杆菌IVB型菌毛对THP-1细胞PKC和ERK及NF-κB活化的影响

    作者:汪付兵;涂建成

    目的:初步探讨伤寒杆菌IVB型菌毛对THP-1细胞PKC、ERK、NF-κB活化的影响.方法:将THP-1细胞分别与有IVB型菌毛的A21-6菌、缺失IVB型菌毛的pilS-菌共同孵育,底物磷酸激酶测定法检测PKC活性变化,免疫印迹法检测ERK磷酸化水平,荧光素酶报道基因分析法检测NF-κB激活表达.结果:THP-1细胞经有IVB型菌毛的A21-6菌刺激后,PKC活性变化、ERK磷酸化水平和NF-κB激活表达均显著高于相应的处理组;PKC、ERK、NF-κB活化水平分别于刺激10、30、60 min后即明显升高;并分别于30、60、120min左右达到峰值.结论:伤寒杆菌IVB型菌毛显著增强了THP-1细胞PKC、ERK、NF-κB活化水平,IVB型菌毛在伤寒杆菌诱导单核/巨噬细胞PKC、ERK、NF-κB活化过程中是一种重要的强刺激因素.

  • 伤寒杆菌IVB型菌毛激活PKC信号通路诱导THP-1细胞IL-6表达

    作者:汪付兵;章晓联

    目的探讨伤寒杆菌IVB型菌毛激活PKC信号通路诱导THP-1细胞IL-6表达.方法将THP-1细胞分别与有IVB型菌毛的A21-6菌、缺失IVB型菌毛的pilS-菌共同孵育,分别检测蛋白激酶C(PKC)活性、IL-6产量及IL-6 mRNA的表达水平;用PKC抑制剂DECA预处理THP-1细胞,然后再以A21-6菌诱导,测定PKC活性和IL-6产量.结果 THP-1细胞经有IVB型菌毛的A21-6菌刺激后,IL-6的产生水平、mRNA的表达水平以及PKC活性均显著高于相应的处理组.PKC活性在一定范围内呈时效关系,刺激10 min后即明显升高,并于30 min左右达到峰值.PKC抑制剂DECA一定程度上能够抑制IVB型菌毛诱导的THP-1细胞PKC活性和IL-6产生水平.结论 IVB型菌毛在伤寒杆菌诱导单核/巨噬细胞产生IL-6过程中是一种重要的刺激因素;PKC参与了该过程的细胞内信号转导.

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