NAC通过不同机制抑制激动剂依赖和非依赖的过表达mGlu1a介导的细胞凋亡

目的 探测N-乙酰半胱氨酸(NAC)对于组成型和诱导型表达mGlu1a所介导的兴奋性毒性的影响.方法 在过表达mGlu1a的HEK293细胞中,通过免疫印迹法,MTT法,胎盘蓝排斥法,酶联免疫吸附实验,二氯荧光素检测法及HPLC等方法,探测了NAC对mGlu1a下游信号分子活性,细胞活力和凋亡,受体表面表达以及细胞内氧化应激的影响.结果 发现受体的组成型和诱导型活性通过不同机制,参与了NAC对于mGlu1a所介导的兴奋性毒性的抑制.在以上两种情况下,NAC均可以通过降低ROS调节细胞内氧化还原电势.结论 在不同生理刺激条件下,mGlu1a的活性对于疾病的发生可能起着不同的作用,尤其是对mGlu1a高表达所产生的效应,为探究与mGluI相关疾病的发生提供了理论依据.

Objective Transforming growth factor-β1 (TGF-β1)can activate mitogen-activated protein kinases (MAPKs) in many types of cells.

人心肌细胞缺血再灌注损伤后ERK、Akt的表达以及黄芪多糖的干预作用

目的 观察人心肌细胞在缺血再灌注损伤过程中蛋白激酶B(protein kinase B,PKB)又称Akt,与细胞外信号调节激酶1/2(extracellar signal-regulated kiase,ERK1/2)的表达规律及其与细胞凋亡的关系,以探索黄芪多糖产生心肌保护作用的机制.方法 培养原代人心脏微血管内皮细胞(human cardiac microvascular endothelial cells,HCMEC),通过缺氧再复氧刺激细胞损伤,模拟缺血再灌注损伤的实验技术平台,建立缺血再灌注损伤模型,继而采用黄芪多糖进行干预,随机分为:HCMEC正常对照组(对照组)、HCMEC损伤组(损伤组)、HCMEC损伤组+低浓度的药物(低药物组)、HCMEC损伤组+中浓度的药物(中药物组)、HCMEC损伤组+高浓度的药物(高药物组),进而采用Western Blot方法检测ERK、p-ERK、Akt蛋白表达情况,采用流式细胞仪检测细胞周期及细胞凋亡情况.结果 从流式细胞仪结果显示:对照组为5.43%;损伤组细胞凋亡程度增高明显,为92.88%;高药物组次之,为29.78%;低药物组及中药物组细胞凋亡程度较轻,生存状态较佳,分别为12.15%和6.08%.Western Blot结果显示:与对照相比较,p-ERK、ERK及Akt磷酸化水平在各组中表达均显著下降(P<0.05);与损伤组相比,低药物组、中药物组和高药物组三组p-ERK、ERK及Akt磷酸化水平升高(P<0.05);与低药物组相比,中药物组中p-ERK、ERK及Akt磷酸化水平升高(P<0.05).结论 黄芪多糖可提高人心肌细胞缺血再灌注损伤后ERK、Akt的活性,减少细胞凋亡.

益气活血中药对大鼠缺血心肌微血管内皮细胞血管新生功能的影响

目的：观察益气活血中药对大鼠缺血心肌微血管内皮细胞（ CMECs）增殖、迁移、成管功能的干预作用，及其对细胞增殖相关蛋白激酶（ERK）和细胞死亡相关分子（p53）mRNA 表达的影响。方法制备芪参益气滴丸高剂量（QG 组）、中剂量（QZ 组）、低剂量（QD 组）大鼠含药血清，分别与大鼠缺血 CMECs 共孵育，同时制备空白血清，分别与心肌缺血模型大鼠（ MX 组）、正常大鼠（ ZC组）来源的原代 CMECs 共孵育；噻唑蓝比色法检测细胞增殖情况，细胞划痕法检测细胞迁移能力，倒置相差显微镜观察管腔结构的形成情况；实时定量聚合酶链反应（ Real - time PCR）检测 ERK 和 p53 mRNA 的表达情况。结果增殖窗口期 QZ 组、QD 组均为第2天，而 QG 组、ZC 组均为第3天，MX 组为第6天；QG 组、QZ 组、QD 组增殖率、迁移率及成管率均显著高于 MX 组，而 QD 组增高明显（P ﹤0.01）；与 MX 组比较，QG 组、QZ 组、QD 组 ERK mRNA 表达增加，p53 mRNA 表达降低（P ﹤0.05）。结论益气活血中药可促进大鼠缺血 CMECs 的血管新生功能，但其作用与药物剂量并非成正相关，可能与不同药物浓度干预导致 ERK 及 p53的差异表达有关。

肝郁脾虚证胃溃疡大鼠ERK通路中TFF1及ERK2的表达及柴黄胃溃宁干预研究

目的:探讨肝郁脾虚证胃溃疡大鼠TFF1、ERK2表达情况及验方柴黄胃溃宁的可能作用机制.方法:采用多因素复合模拟中医病因结合乙酸烧灼法复制肝郁脾虚证胃溃疡大鼠模型.采用RT-PCR、Western Blot技术检测模型大鼠与正常大鼠胃黏膜组织中TFF1、ERK2表达水平;同时分别用柴黄胃溃宁低、中、高剂量对模型大鼠进行干预.结果:TFF1、ERK2mRNA表达水平呈现正常组-模型组-用药组逐步升高.其中中高组升高明显,与正常组比较,模型组TFF1、ERK2mRNA表达显著上调(P＜0.01);与模型组比较,中中组、中高组TFF1、ERK2mRNA表达上调(P＜0.05).模型组胃黏膜组织TFF1、P-ERK2蛋白表达较正常组升高.经药物干预后,中低、中中、中高、西药组TFF1、P-ERK2蛋白表达量较模型组均有不同程度的上调.结论:柴黄胃溃宁可通过调节ERK通路中细胞因子TFF1及ERK2的表达发挥其促进胃黏膜重建与修复作用,从而治疗肝郁脾虚证胃溃疡.

眼针八区八穴对脑缺血再灌注24h大鼠海马组织中MAPK信号传导通路的影响

目的;观察八区八穴取穴眼针疗法对脑缺血再灌注损伤模型大鼠海马组织中p38MAPK、ERK1/2、JNK表达水平的影响,探讨八区八穴取穴眼针疗法治疗缺血性脑病的部分机制.方法:健康SPF级雄性SD大鼠40只,体质量(280±20)g.按体质量随机分组,分为空白对照组(8只)、假手术组(8只)和模型复制组(24只).对模型复制组24只大鼠采用线栓法进行模型复制,模型评价后,筛选模型合格的大鼠进行亚组划分,分别为模型对照组、眼针对照组,即分为正常组、假手术组、模型组、眼针组4组.眼针组大鼠给予眼针干预,再灌注即刻以及之后的每8h进行1次针刺治疗,至再灌注24 h取材进行相关指标检测.采用免疫组织化学法检测各组大鼠海马组织中P38MAPK、ERK1/2和JNK蛋白表达水平.结果:与空白对照组比较,模型对照组和眼针组大鼠海马组织中P38MAPK、ERK1/2、JNK蛋白表达水平均显著升高;与模型对照组比较,眼针组大鼠脑组织中P38MAPK、ERK1/2、JNK蛋白表达水平显著下降.结论:眼针可能通过抑制p38-MAPK信号传导通路而发挥其脑保护作用.

清肝化瘀方药、苦参素对大鼠肝癌形成过程中ERK蛋白的影响

目的:观察清肝化瘀方药阻断大鼠肝癌前病变和癌变的作用及其对信号蛋白ERK的影响.方法:以二乙基亚硝胺长期灌胃诱发大鼠肝癌,以苦参素做对照,进行癌前病变及癌变期HE染色、γ-谷氨酰转肽酶(GGT)组化染色,ERK免疫组化.结果:清肝化瘀方药和苦参素癌前病变及癌变期病理改变较病理组明显减轻.癌前病变期病理组肝组织GGT酶组化染色单位切面病灶数、单位面积内病灶面积、病灶平均面积3项指标显著高于各药物预防组(P＜0.05或P＜0.01).单位切面病灶数、单位面积内病灶面积清肝化瘀方药组低于苦参素组(P＜0.05).癌前病变期和癌变期清肝化瘀方药组ERK在肝细胞胞浆和胞核着色较病理组明显减轻,毛细胆管轻微着色,苦参素组ERK在肝细胞异型增生灶、癌巢周围及毛细胆管均着色,但较病理组轻.结论:清肝化瘀方药能阻断二乙基亚硝胺所致大鼠肝癌前病变和癌变的发生,效果优于苦参素.清肝化瘀方药能降低MAPKs通路中通路的活性,抑制细胞过度增殖.

黄芩茎叶总黄酮对高甘油三酯血清刺激的VSMCs增殖的影响

目的:观察黄芩茎叶总黄酮(SSTF)对单纯高甘油三酯血清(HTG)刺激的血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖的抑制作用及可能的分子机制.方法:体外培养大鼠胸主动脉VSMCs,HTG诱导其增殖,观察SSTF对细胞增殖、细胞周期、CO含量、血红素氧化酶-1(HO-1)平EFLK/p-ERK蛋白表达的影响.结果:50HD mg·L~(-1)的SSTF可明显抑制HTG诱导的VSMCs增殖,增加VSMCs培养上清液中CO的生成量,抑制细胞周期进程(P＜0.05,P＜0.01),并呈时间和剂量依赖趋势;500 mg·L~(-1)的SSTF显著诱导细胞ERK/p-ERK蛋白的表达(P＜0.01),但是对HO-1蛋白的表达无影响.结论:SSTF通过阻滞细胞周期进程直接参与抑制VSMCs增殖的作用,ERK信号通路可能参与SSTF介导的细胞保护作用.

七叶皂苷钠通过抑制AKT, ERK上游信号SRC活性诱导人乳腺癌MCF-7细胞凋亡

探讨七叶皂苷钠对乳腺癌MCF-7细胞的凋亡诱导作用及其可能的作用机制.运用MTT法检测七叶皂苷钠对MCF7细胞的增殖抑制作用;倒置显微镜观察细胞形态学变化;DAPI染色后在荧光显微镜下检测细胞核变化;采用Annexin V-FITC/PI流式细胞术检测细胞凋亡率;采用Western blotting检测凋亡相关蛋白(PARP,cleaved caspase-8,pro-caspase-3)和细胞存活相关信号分子(AKT,ERK)及其共同上游激酶SRC的磷酸化变化情况.结果显示,不同浓度七叶皂苷钠作用于乳腺癌MCF-7细胞后,以剂量依赖方式抑制MCF-7细胞增殖;诱导细胞凋亡(典型的凋亡形态学变化、细胞核改变和细胞凋亡率显著增加);细胞凋亡相关蛋白PARP切割增加,cleaved caspase-8表达增加,pro-caspase-3表达减少进一步验证了七叶皂苷钠的凋亡诱导作用;七叶皂苷钠显著抑制细胞存活相关信号分子(AKT,ERK)的磷酸化,其共同上游激酶SRC的活化亦显著下降.结果表明,七叶皂苷钠通过抑制SRC的活化,阻断信号向下游信号分子AKT,ERK的传递,抑制乳腺癌细胞MCF-7增殖,诱导细胞凋亡.

JSRV-Env诱导转染TC-1、TC-1-Hyal2细胞后对AKT和ERK表达的影响

为了探索JSRV与其受体相互作用后靶细胞的致瘤机制,本研究应用JSRV Env真核表达质粒分别诱导转染小鼠肺上皮细胞(TC 1)和稳定表达绵羊Hyal-2的小鼠肺上皮细胞(TC-1-Hyal2),而后检测细胞信号转导通路上AKT(丝氨酸/苏氨酸激酶)和ERK(细胞外信号调节激酶)在mRNA及蛋白水平上的表达变化,并分析绵羊Hyal-2在JSRV Env诱导TC-1细胞转化过程中的作用.首先体外培养TC-1和TC-1-Hyal2两种细胞,并分别设立pEGFP-C1-env转染组、pEGFP-C1转染组及未转染质粒组.通过实时荧光定量PCR和Western blot方法检测两关键酶在不同水平上的表达变化.qPCR结果显示:与未转染质粒细胞组比较,转染pEGFP-C1-env的两细胞组中AKT和ERK1/2mRNA表达均显著升高(P＜0.05).Western blot结果显示:与未转染质粒细胞组比较,转染pEGFP-C1-env两细胞组中p-Akt(S473)蛋白表达量显著升高(P＜o.05);且p Akt(T308)和p-Erk1/2蛋白在转染pEGFP-C1-env的TC-1细胞组中表达量也均呈显著升高变化趋势(P＜0.05),而这两种蛋白在相同处理的TC-1Hyal2细胞组中表达量均呈极显著升高(P＜0.01).此外,转染pEGFP-C1空载体的各细胞组与未转染质粒细胞组相比较AKT和ERK mRNA和蛋白含量差异均小显著(P＞0.05).JSRV Env在诱导上述细胞系转化过程中,Ras-Raf-MAPK和PI3K-Akt两条细胞信号转导通路被激活;实验检测得知,转染pEGFP-C1-env的两细胞组中AKT、ERK表达量均升高;相比之下,在TC-1-Hyal2细胞组中其表达量升高更显著.研究结果推测绵羊Hyal-2在JSRV Env诱导TC-1细胞转化过程中起促进作用.

重组甲型流感病毒基质蛋白1和2通过ERK信号因子诱导小鼠气管上皮细胞产生IFN-γ

探讨重组甲型流感病毒基质蛋白1和2(rM1和rM2)通过细胞外信号调节蛋白激酶(Extracellular signal regulated kinase,ERK)诱导小鼠气管上皮细胞产生γ-干扰素(Interferon-γ,IFN-γ)作用及机制.以原代小鼠气管上皮细胞为实验模型,实验分为6组(rM1组、rM2组、甲型流感病毒(Influenza A virus,IAV)组、rM1+IAV组、rM2+ IAV组和正常对照组).在各组分干预细胞4h、8h、24h时,采用半定量RT-PCR法检测各组细胞中IFN-γmRNA的表达和免疫印迹法检测各组细胞中IFN-γ、ERK、磷酸化ERK (phospho-ERK,p-ERK)蛋白的表达;用抑制剂阻断ERK信号因子信号传导,观察对各组分诱导小鼠气管上皮细胞产生IFN-γ的影响.各组分干预细胞4h、8h、24h,rM1组、rM2组、IAV组、rM1+ IAV组、rM2+ IAV组细胞的IFN-γ mRNA和IFN-γ蛋白表达水平高于正常对照组(P＜0.01或P＜0.05);rM1+ IAV组、rM2+ IAV组细胞的IFN-γ mRNA和IFN-γ蛋白表达水平高于IAV组(P＜0.01或P＜0.05).在干预细胞4h,仅rM2组细胞中ERK磷酸化水平显著高于正常对照组(P＜0.01),在干预细胞8h、24h,rM1组、rM2组、IAV组、rM1+IAV组、rM2+ IAV组细胞中ERK磷酸化水平均显著高于正常对照组(P＜0.01或P＜0.05).加入ERK抑制剂,rM1组、rM2组、rM1+ IAV组、rM2+ IAV组细胞的IFN-γ mRNA和IFN-γ蛋白表达水平显著低于非抑制剂组.本研究数据表明rM1和rM2可通过上调ERK信号因子的磷酸化水平诱导小鼠气管上皮细胞中产生IFN-γ,该诱导作用在于预4h即显著表现,并维持至少24h.

Objective To investigate the role of extracellular signal-regulated kinase (ERK) in apoptosis of human colon cancer (HCT116) cells.
Methods After the HCT116 cells were pretreated with specific ERK inhibitor (U0126) or specific siRNA and exposed to 10 mmol/L sodium butyrate (NaBT) for 24 h, their apoptosis was detected by flow cytometry, levels of SphK2 and ERK protein were measured by Western blot, and translocation of SphK2 was assayed by immunofluorescence microscopy.
Results The U0126 and siRNAs specific for SphK2 blocked the export of SphK2 from nuclei to cytoplasm and increased the apoptosis of HCT116 cells following NaBT exposure. Over-expression of PKD decreased NaBT-induced apoptosis of HCT116 cells, which was reversed by U0126. Furthermore, transfection of HCT116 cells with constitutively activated PKD plasmids recovered the U0126-blocked export of SphK2.
Conclusion ERK regulates the export of SphK2 and apoptosis of HCT116 cells by modulating PKD. Modulation of these molecules may help increase the sensitivity of colon cancer cells to the physiologic anti-colon cancer agent, NaBT.

Objective To investigate whether the antioxidation and the regulation on the Extracellular Regulated Protein Kinases (ERK) signaling pathway are involved in the protective effects of blueberry on central nervous system.
Methods 30 Senescence-accelerated mice prone 8 (SAMP8) mice were divided into three groups and treated with normal diet, blueberry extracts (200 mg/kg·bw/day) and cyaniding-3-O-galactoside (Cy-3-GAL) (50 mg/kg·bw/day) from blueberry for 8 weeks. 10 SAMR1 mice were set as control group. The capacity of spatial memory was assessed by Passive avoidance task and Morris water maze. Histological analyses on hippocampus were completed. Malondialdehyde (MDA) levels, Superoxide Dismutase (SOD) activity and the expression of ERK were detected.
Results Both Cy-3-GAL and blueberry extracts were shown effective functions to relieve cellular injury, improve hippocampal neurons survival and inhibit the pyramidal cell layer damage. Cy-3-GAL and blueberry extracts also increased SOD activity and reduced MDA content in brain tissues and plasma, and increased hippocampal phosphorylated ERK (p-ERK) expression in SAMP8 mice. Further more, the passive avoidance task test showed that both the latency time and the number of errors were improved by Cy-3-GAL treatment, and the Morris Water Maze test showed significant decreases of latency were detected by Cy-3-GAL and blueberry extracts treatment on day 4.
Conclusion Blueberry extracts may reverse the declines of cognitive and behavioral function in the ageing process through several pathways, including enhancing the capacity of antioxidation, altering stress signaling. Cy-3-GAL may be an important active ingredient for these biological effects.

ERK参与调节人脐动脉平滑肌细胞内SMAD2/3蛋白及其mRNA的表达

目的 了解ERK信号转导通路对人脐动脉平滑肌细胞(hUASMC)内SMAD2/3蛋白及其mRNA表达的影响.方法 原代培养hUASMC,实验分四组:1)对照组,2)PDGF组,3)ERK阻断剂组,4)PDGF+ERK阻断剂组.分别用免疫细胞化学和RT-PCR法测hUASMC内磷酸化SMAD2/3蛋白和SMAD2/3 mRNA的表达.结果 1)与对照组相比,PDGF组hUASMC细胞内磷酸化SMAD2/3蛋白的表达增强(P＜0.01);2)四组hUASMC细胞内SMAD2/3 mRNA的表达无明显差异.结论 在hUASMC中,ERK通路可促进SMAD2/3蛋白的磷酸化,但对SMAD2/3 mRNA的表达没有影响.

ERK和P38MAPK升高MLC20磷酸化调节大鼠平滑肌低氧反应性

目的 研究丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)亚类ERK、P38 MAPK和JNK在低氧血管平滑肌收缩反应性调节中的作用,并从肌球蛋白轻链(MLC20)磷酸化的钙敏感性调节途径上初步探讨其机制.方法 用低氧培养血管平滑肌细胞(VSMC)模型和大鼠失血性休克模型,用荧光法检测VSMC收缩反应,用Western blot检测血管平滑肌MLC20磷酸化水平,用离体血管张力测定技术观察休克血管钙敏感性.结果 低氧损伤使VSMC对去甲肾上腺素(NE)诱导的收缩反应性明显降低,同时休克血管平滑肌MLC20磷酸化水平和血管钙敏感性降低;给予具有MAPK激动作用的AngⅡ处理可恢复低氧VSMC的收缩反应性、升高休克血管MLC20磷酸化水平和钙敏感性.PD98059(ERK抑制剂)、SB203580(P38 MAPK抑制剂)和SP600125(JNK抑制剂)均可拮抗AngⅡ诱导低氧VSMC反应性升高的作用;同时ERK和P38 MAPK的抑制剂也拮抗了AngⅡ诱导的休克血管MLC20磷酸化水平和钙敏感性升高,而JNK抑制剂无明显作用.结论 ERK、P38 MAPK和JNK都参与了低氧VSMC收缩反应性的调节,其中ERK和P38MAPK的作用机制可能与MLC20磷酸化的钙敏感性调节途径有关,而JNK可能通过其他途径发挥调节低氧VSMC反应性的作用.

ERK信号途径对EGF诱导的HaCaT细胞增殖具有双向调节作用

目的利用带有ERK-2基因的腺病毒载体感染成角质细胞系HaCaT,探讨ERK信号途径在EGF对HaCaT细胞增殖影响中的作用.方法用3H-TdR掺入法检测HaCaT细胞增殖及PD98059对EGF促HaCaT细胞增殖的影响.腺病毒载体转染HaCaT细胞,流式细胞仪检测转染率,Western blot检测ERK-2蛋白的表达.结果 1μg/L和10μg/L EGF可促进HaCaT细胞增殖,而100μg/L EGF促增殖作用反下降.PD98059抑制EGF引起的HaCaT细胞增殖,且具有浓度依赖性.腺病毒载体具有高转染率,感染Ad-ERK2的HaCaT细胞高表达ERK-2.EGF抑制转染的HaCaT细胞增殖.结论 ERK信号途径在EGF促HaCaT细胞增殖中具有双向调节作用.

刺五加多糖通过ERK信号转导途径诱导H446细胞G_2/M期阻滞

目的 研究刺五加多糖(ASPS)对人小细胞肺癌H446细胞G_2/M期阻滞的诱导作用及对ERK信号传导途径的影响.方法 流式细胞技术(FCM)检测H446细胞周期;Western blot分析检测ASPS对ERK、p-ERK蛋白的影响.结果 与对照组相比,各ASPS处理组G_2/M期细胞所占的比例明显增高(P<0.01),G_0/G_1期细胞所占的比例没有差异;加入ERK抑制剂PD98059后,G_2/M期和G_0/G_1期细胞所占的比例与对照组没有差异;p-ERK的量显著高于对照组(P<0.01),而对ERK蛋白表达没有明显影响.结论 ASPS可能通过激活ERK信号转导途径诱导H446细胞发生G_2/M期阻滞.

低盐通过激活ERK和AP-1通路诱导小鼠致密斑细胞系COX-2的表达

目的 探讨低盐培养对小鼠致密斑(mouse macula densa derived cells,MMDD1)细胞环氧化酶-2(cyclooxygenase,COX-2)表达和p44/42 激酶(ERK)、 AP-1活性的影响.方法 经脂质体转染含AP-1的报告质粒,采用瞬时表达方法检测AP-1转录活性;RT-PCR检测MMDD1细胞COX-2的表达;免疫印迹方法检测细胞内p-p44/42、C-JUN、C-FOS和COX-2蛋白的表达.用ELISA法检测上清液PGE2的含量.结果 低盐(LS)培养促进MMDD1细胞COX-2 mRNA和蛋白表达.培养后ERK的磷酸化程度显著上调,180 min达到高峰;ERK抑制剂PD-98059降低LS诱导的COX-2表达和PGE2分泌;LS培养促进C-JUN、C-FOS蛋白表达,激活AP-1的转录活性.AP-1抑制剂curcumin (20 μmol/L)下调LS诱导的AP-1活性、COX-2 mRNA和蛋白表达.结论 LS促进MMDD1细胞COX-2的表达,其作用可能与促进ERK的磷酸化、增加AP-1的活性有关.

钙敏感受体通过ERK信号通路参与低氧诱导的人气道上皮细胞黏液高分泌

目的 探究钙敏感受体(CaSR)在低氧诱导的气道黏液高分泌中的信号通路.方法 低氧培养箱(37℃,94％N2-1％ O2-5％ CO2)培养人气道上皮细胞16HBE复制细胞低氧模型.分为对照组、低氧组、CaSR特异性激动剂CaCl2+低氧组、对照siRNA+低氧组、CaSR-siRNA+低氧组、细胞外信号调节激酶(ERK)信号通路特异性抑制剂U0126+低氧组.RT-PCR检测黏蛋白(MUC)5AC的转录水平,Western blot检测CaSR、ERK1/2及磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)的蛋白相对含量,ELISA检测MUC5AC的分泌水平,四甲基偶氮唑盐法(MTT)测定细胞的活性.结果 CaSR表达于人气道上皮细胞,转染特异性的CaSR-siRNA明显抑制CaSR的表达.低氧组p-ERK1/2、MUC5 ACmRNA和MUC5AC蛋白的相对含量分别为(0.63±0.11、0.51 ±0.03、0.56±0.07)较对照组(0.27 ±0.04、0.18±0.04、0.25 ±0.06)显著增加(P＜0.05).CaSR的激动剂CaCl2可进一步增强低氧引起的上述作用(P＜0.05),而转染CaSR-siRNA及给予ERK信号通路特异性抑制剂U0126可抑制低氧引起的上述效应(P＜0.05).结论 CaSR可通过MEK/ERK1/2信号通路参与低氧诱导的气道黏液高分泌.

电针胃经穴的大鼠血清上调胃黏膜细胞ERK磷酸化

目的 探讨电针胃经穴的大鼠血清对胃黏膜细胞外信号调节激酶(ERK)磷酸化的影响.方法 72只大鼠随机分为正常组、模型组、胃经组、胆经组、胃经+PD153035组和胆经+PD153035组,链霉蛋白酶消化法分离胃黏膜细胞,分别用表皮生长因子受体(EGFR)抑制剂PD153035和100 mL/L血清孵育胃黏膜细胞,Western blot检测ERK的磷酸化.结果 胃经组和胆经组胃黏膜细胞ERK磷酸化明显高于正常组和模型组(P<0.01);胃经组胃黏膜细胞ERK磷酸化明显高于胆经组(P<0.01);当用PD153035阻断EGFR后,胃经+PD153035组胃黏膜细胞ERK磷酸化明显低于胃经组(P<0.01).结论 电针胃经穴的大鼠血清能上调胃黏膜细胞ERK的磷酸化水平,并且存在经脉-脏腑的特异性联系.