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纳米SiO2对HaCaT细胞基因组DNA总体甲基化水平的影响
目的 检测纳米SiO2( nano-SiO2)暴露的体外培养的人皮肤表皮细胞(HaCaT)基因组DNA总体甲基化水平及DNA甲基转移酶DNMT1的表达改变.方法 应用5-甲基胞嘧啶免疫荧光法和流式细胞定量分析法检测nanoSiO2(0、2.5、5和10μg/ml)和10 μg/ml微米级二氧化硅(micro-SiO2)以及DAC组(10 μg/ml nano-SiO2+3μm DAC)暴露后细胞基因组DNA整体甲基化变化趋势,以Real-time Q-PCR和Western blot方法检测DNMT1的mRNA和蛋白的表达变化.结果 与对照细胞组相比,5-甲基胞嘧啶免疫荧光强度逐渐降低,在nano-SiO2致HaCaT细胞损伤的过程中,DNA的总体甲基化程度有随nano-SiO2浓度升高而降低的趋势,同剂量的纳米暴露组与溶剂对照组及微米级对照组相比具有更低的基因组DNA甲基化水平.流式细胞定量分析实验结果显示,溶剂对照组的平均荧光荧光强度为153.43,不同浓度的nano-SiO2处理细胞24h(2.5,5和10 μg/ml)后,其平均荧光强度分别为76.32,53.26和55.16,溶剂对照组和微米对照组( Micro-SiO2)的甲基化程度差异没有统计学意义.DNMT1的mRNA和蛋白表达水平一致,在细胞暴露于nano-SiO2过程中,DNMT1表达呈下降趋势.结论 本试验条件下,基因组DNA甲基化水平的降低可能与DNMT1水平降低有关.
关键词： nano-SiO2颗粒 HaCaT DNA甲基化 DNMT1 -
亚砷酸钠对HaCaT细胞的氧化应激作用
目的研究不同浓度亚砷酸钠(NaAsO2)对人皮肤永生化角质形成细胞株(HaCaT)的氧化应激作用.方法用AlamarBlue还原法检测NaAsO2对细胞活力的影响,用PI染色法检测细胞的凋亡和坏死率,利用2′7′-二乙酰二氯荧光素(DCFH-DA)检测细胞内ROS水平,同时用荧光法测定细胞内还原型谷胱甘肽(GSH)和氧化型谷胱甘肽(GSSG)的含量.结果0.001μmol/L至1μmol/L组的AlamarBlue还原率显著高于对照组,而10μmol/L以上组的AlamarBlue还原率下降,20μmol/L组的凋亡和坏死率显著高于对照组,各实验组的DCF荧光强度与对照组相比明显提高,1μmol/L以上组细胞内GSH水平增高,5μmol/L组GSSG水平增高.结论各浓度砷引起HaCaT细胞内ROS增多,低浓度时促进细胞增殖,高浓度则抑制细胞活力,砷诱导HaCaT细胞内的GSH增多,发挥解毒作用.
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消疹止痒喷剂治疗EGFRI相关性皮疹的细胞学机制研究
目的:探究消疹止痒喷剂对皮肤角质细胞增殖分化及巨噬细胞浸润的影响及其作用机制.方法:MTT法观察不同浓度消疹止痒喷剂对皮肤角质细胞HaCaT生长能力的影响;划痕实验(Wound healing)及Transwell实验考查消疹止痒喷剂对HaCaT及巨噬细胞RAW264.7运动能力的影响,采用western blotting实验考察消疹止痒喷剂对HaCaT细胞的PI3K、AKT、tPA、CD147及RAW264.7细胞中基质金属蛋白酶MMP-2(Matrix metalloproteinases-2,MMP-2)、MMP-9蛋白表达的影响,采用RT-PCR考察消疹止痒喷剂对RAW264.7细胞的MMP-2、MMP-9 mRNA水平的影响.结果:消疹止痒喷剂可以剂量依赖性地促进HaCaT细胞的增殖,抑制其分化;Wound healing实验和Transwell小室迁移实验中,随着消疹止瘁喷剂浓度提高,HaCaT及巨噬细胞RAW264.7迁移数目呈递减趋势;随着消疹止瘁喷剂浓度的提高,HaCaT及巨噬细胞RAW264.7侵袭能力呈递减趋势;消疹止瘁喷剂可以剂量依赖性抑制HaCaT细胞PI3K和AKT增殖蛋白表达,同时降低分化蛋白tPA和CD147的表达;此外消疹止痒喷剂可以显著抑制RAW264.7 MMP2和MMP9的mRNA和蛋白水平表达.结论:消疹止痒喷剂促进皮肤角质细胞增殖并抑制巨噬细胞浸润是其治疗EGFRI相关性皮疹的重要机制之一.
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ERK信号途径对EGF诱导的HaCaT细胞增殖具有双向调节作用
目的利用带有ERK-2基因的腺病毒载体感染成角质细胞系HaCaT,探讨ERK信号途径在EGF对HaCaT细胞增殖影响中的作用.方法用3H-TdR掺入法检测HaCaT细胞增殖及PD98059对EGF促HaCaT细胞增殖的影响.腺病毒载体转染HaCaT细胞,流式细胞仪检测转染率,Western blot检测ERK-2蛋白的表达.结果 1μg/L和10μg/L EGF可促进HaCaT细胞增殖,而100μg/L EGF促增殖作用反下降.PD98059抑制EGF引起的HaCaT细胞增殖,且具有浓度依赖性.腺病毒载体具有高转染率,感染Ad-ERK2的HaCaT细胞高表达ERK-2.EGF抑制转染的HaCaT细胞增殖.结论 ERK信号途径在EGF促HaCaT细胞增殖中具有双向调节作用.
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槲皮素、虎杖苷和染料木素抗氧化作用及其对 UVB 致 HaCaT 细胞损伤的保护研究
目的考察槲皮素、虎杖苷、染料木素的抗氧化能力及对中波紫外线（ UVB）致永生化人角质形成细胞（ HaCaT ）损伤的保护作用。方法以维生素C为阳性对照药，通过DPPH自由基清除实验，羟基（· OH）自由基清除实验，测定槲皮素、虎杖苷、染料木素不同浓度的抗氧化能力。体外培养HaCaT细胞，与槲皮素、虎杖苷、染料木素100μmol/L共抚育30 mim后，以30 mJ/cm2 UVB直接照射细胞，12 h后收集细胞， MTT法检测细胞增殖活性，ELISA法和硫代巴比妥酸（ TBA）法分别检测TNF-α、MDA含量，黄嘌呤氧化酶法测定超氧化物歧化酶（ SOD）活性。结果槲皮素、虎杖苷、染料木素对DPPH和· OH自由基都具有一定的清除力，其清除能力的大小为染料木素＜虎杖苷＜槲皮素。 UVB辐射对HaCaT细胞造成明显损伤，三种药物作用于HaCaT细胞，与单纯UVB辐射对照组相比，经UVB辐射后各给药组的细胞活性明显增高（ P＜0.05），TNF-α分泌减少（P＜0.05），MDA含量降低（P＜0.05），SOD活力增强（P＜0.05）。结论三种药物能抑制UVB辐射诱导的HaCaT细胞损伤，促进细胞存活增殖，对UVB辐射损伤的HaCaT细胞具有保护作用，其清除体内自由基，增强细胞的抗氧化能力可能是这些药物抑制UVB辐射诱导HaCaT细胞损伤的作用机制之一。
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2型单纯疱疹病毒对HaCaT细胞分泌白细胞介素-19和白细胞介素-20的影响
目的 观察2型单纯疱疹病毒(HSV-2)对人永生化角质形成细胞株(HaCaT)分泌白细胞介素(IL)-19、IL-20的影响,探讨角质形成细胞(KC)对HSV-2病毒感染初期的免疫防御机制.方法 用HSV-2病毒感染HaCaT细胞,采用荧光实时定量PCR检测感染后24,48,72 h的IL-19、IL-20 mRNA的表达量.结果 经HSV-2病毒感染后HaCaT细胞分泌IL-19、IL-20 mRNA的表达量在72 h内逐渐上升,与对照组相比均有统计学意义(P＜0.05).结论 KC具有类淋巴细胞样功能,能分泌IL-19、IL-20在HSV-2感染KC初期,[L-19、IL-20表达上升,参与HSV-2感染的早期免疫防御反应.
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凉血活血复方对体外培养HaCaT、ECV304细胞端粒酶活性的影响
目的 观察凉血活血复方水醇粗提液时人永生化表皮细胞株(HaCaT)和人脐静脉血管内皮细胞株(ECV304)端粒酶活性的影响,探讨该复方治疗银屑病可能的作用机制.方法 将不同浓度的凉血活血复方水醇粗提液分别地作用于体外培养的HaCaT和ECV304细胞株,应用端粒重复序列扩增一酶联吸附(TRAP-ELAISA)试剂盒检测两株细胞的端粒酶活性.结果 凉血活血复方分别作用两株细胞48h,细胞端粒酶活性在所测定实验浓度范围内,随浓度的增加时细胞的端粒酶活性的下调作用逐渐增强.各加药组与对照组在统计学上有显著性差异,且各加药组之间差异亦有统计学意义(P＜0.01).结论 凉血活血复方以剂量依赖性抑制端粒酶活性.
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绿原酸对紫外线损伤的HaCaT细胞肿瘤坏死因子α和白细胞介素6表达的调节
目的 研究绿原酸对紫外线(UVB)损伤HaCaT细胞的保护作用及其机制.方法取对数生长期的HaCaT细胞,用总剂量64 mJ·cm-2(照射强度0.61 mW·cm-2×照射时间105 s)的UVB照射细胞建立光损伤模型,以0.1,1和10 μmol·L-1的绿原酸处理光损伤细胞24 h,用试剂盒分别检测细胞中超氧化物歧化酶(SOD)活性、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和丙二醛(MDA)含量,RT-PCR法检测细胞中P38、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)mRNA的表达,ELISA检测细胞上清液中TNF-α和IL-6的含量.结果 与正常对照组相比,模型组SOD活性、GSH-Px活性和CAT活性明显降低,MDA含量、P38 mRNA表达、TNF-α和IL-6 mRNA及蛋白表达明显升高(P<0.01).与模型对照组相比,绿原酸1和10 μmol·L-1能明显提高细胞中SOD,GSH-Px和CAT活性,降低MDA含量(P<0.05),降低细胞中P38,TNF-α和IL-6 mRNA的表达(P<0.05),降低上清液中TNF-α和IL-6的含量(P<0.05).结论 绿原酸能抵抗UVB对HaCaT细胞的损伤,其机制可能与抑制氧化损伤、调控P38信号通路和调节TNF-α和IL-6表达有关.
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黄芩素对HaCaT细胞光老化模型ERK信号通路的影响
目的 研究黄芩素对皮肤光老化模型中细胞外调节蛋白激酶(ERK)信号通路的影响.方法 使用照射强度为0.5 mJ/cm2的UVB型紫外线辐照计,照射不同时间制备光老化细胞模型.细胞分为对照组,模型组,黄芩素1×10-7、1×10-6、1×10-5 mol/L组.使用流式细胞仪检测各组细胞中活性氧(ROS)量的变化,qRT-PCR检测各组细胞中白细胞介素-1α(IL-1oα)、IL-8 mRNA表达量,蛋白免疫印迹法(Western blotting)检测各组细胞中IL-1α、IL-8、p-ERK、ERK蛋白的表达量.结果 与对照组比较,模型组细胞出现皱缩、椭圆形,细胞边缘有破损现象,趋于死亡状态.与模型组相比,1×10-mol/L黄芩素组细胞破损现象减轻,1×10-6 mol/L黄芩素组细胞无明显的皱缩及破损现象,1×10-5 mol/L黄芩素组细胞状态良好,接近于正常状态;与对照组比较,模型组细胞中ROS的量显著升高(P＜0.01).与模型组比较,1×10-7、1×10-6、1×10-5 mol/L黄芩素组细胞中ROS的量显著降低(P＜0.01);与对照组比较,模型组IL-1α、IL-8 mRNA表达量显著升高(P＜0.01).与模型组比较,1×10-7、1×10-6、1×10-5 mol/L黄芩素组细胞中IL-1α、IL-8 mRNA的表达量显著降低(P＜0.01);与对照组比较,模型组细胞IL-1α、IL-8、p-ERK蛋白表达量显著升高(P＜0.01),ERK蛋白表达量不变.与模型组比较,1×10-7、1×10-6、1×10-5 mol/L黄芩素组细胞中IL-1α、IL-8、p-ERK蛋白表达量显著降低(P＜0.05、0.01),ERK蛋白表达量不变.结论 黄芩素对HaCaT细胞光老化模型的保护作用主要通过降低ROS的量,阻断ERK信号通路,进而降低炎症因子的产生实现的.
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蜈蚣败毒饮对HaCaT凋亡的影响
目的:观察蜈蚣败毒饮对HaCaT凋亡的影响.方法:本研究采用含药血清作用于HaCaT,观察不同药物对HaCaT凋亡的影响.实验将生理盐水、制备好的不同浓度的蜈蚣败毒饮浓缩液、甲氨蝶呤片混悬液、复方青黛胶囊混悬液灌服于大鼠后,提取含药血清,同时将培养好的HaCaT分为6组:即空白对照组、中药对照组、中药低剂量组、中药中剂量组、中药高剂量组、西药对照组分别予以不同含药血清,通过采用ELISA法检测药物对HaCaT凋亡的影响.结果:蜈蚣败毒饮低、中、高剂量合药血清、甲氨蝶呤片含药血清、复方青黛胶囊含药血清对HaCaT凋亡均有促进作用,与空白组比较均有显著性差异,中药高剂量组促进凋亡效果好于中药对照组(P＜0.05).结论:蜈蚣败毒饮可促进角质形成细胞的凋亡,这也许是其治疗银屑病的机制之一.
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亚砷酸钠对Hacat细胞GSK-3β及CyclinD1表达的影响
目的 探讨亚砷酸钠对人上皮角质形成细胞系(Hacat细胞)PI3K/AKT信号通路中细胞周期相关分子GSK-3β、CyclinD1的影响.方法 将人Hacat细胞暴露于浓度分别为0、10、25、50、100 μmol/L的亚砷酸钠6h,采用Western Blot法检测细胞总蛋白的GSK-3β,磷酸化GSK-3β(p-GSK-3β),CyclinD1和磷酸化CyclinD1(p-CyclinD1)的蛋白表达水平.结果 与对照组比较,10、25、50、100 μmol/L染砷组总蛋白中p-GSK-3β和CyclinD1蛋白表达水平均显著增高(P＜0.05),而p-CyclinD1蛋白表达水平显著降低(P＜0.05).结论 亚砷酸钠可影响Hacat细胞中的GSK-3β分子,使其磷酸化失活,进而失去对细胞周期相关蛋白CyclinD1的磷酸化作用,从而促进CyclinD1的表达.
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牙本质基质蛋白1在口腔鳞癌细胞中的表达
目的:观察牙本质基质蛋白1 (dentin matrix protein 1,DMP1)在舌鳞癌细胞Cal-27、Tca-8113以及人永生化表皮细胞Hacat中的表达情况,初步探讨DMP1与口腔鳞癌的相关性.方法:免疫荧光染色用于人永生化表皮细胞Hacat与舌鳞癌细胞Cal-27中,于共聚焦显微镜下观察DMP1在两组细胞的染色情况;采用Western blot方法,分别提取Hacat,Cal-27和人舌鳞癌细胞Tca-8113中DMP1蛋白并检测其含量.结果:通过免疫荧光实验观察到DMP1在Cal-27细胞及Hacat细胞中都表达于细胞质,同时发现DMP1在Hacat细胞中的荧光强度为41.2,高于Cal-27细胞荧光强度26.5;Western blot实验结果显示Hacat细胞中DMP1蛋白的灰度分析值为100和109,明显高于Cal-27和Tca-8113细胞的40.8和37.6.结论:DMP1在口腔鳞癌细胞和Hacat细胞中的表达存在差异,提示DMP1可能与口腔鳞癌的发生相关.
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2型单纯疱疹病毒感染后HaCaT细胞分泌细胞因子的变化研究
目的 探讨2型单纯疱疹病毒(HSV-2)感染后人角质形成细胞分泌细胞因子的状况.方法 采用非洲绿猴肾细胞株VERO细胞进行HSV-2病毒扩增,再以HSV-2感染HaCaT细胞,采用ELISA和荧光实时定量PCR检测感染后24h、48h和72h时IL-10、IFN-γ、TGF-β的分泌和表达情况.结果 经HSV-2感染后HaCaT细胞分泌和表达的IL-10、IFN-γ、TGF-β与对照组相比有统计学差异,并呈时间相关性.结论 在HSV-2感染早期KC参与了免疫反应,其分泌和表达的细胞因子的偏移可能参与了HSV-2的病理机制.
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长波紫外线照射和基因甲基化状态对HaCaT细胞诱导型一氧化氮合酶表达的影响
目的:研究长波紫外线(UVA)照射和基因甲基化状态改变对HaCaT细胞诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达的影响.方法:5 J/cm<'2>UVA照射HaCaT细胞后24 h、48 h和72 h及1μmol/L 5-氮杂胞苷(5-azaC)处理HaCaT细胞24 h、72 h和120 h后,采用反转录(RT)-PCR、Western blot方法和巢式聚合酶链反应(nested polymearse chain reaction,N-PCR)分别检测iNOS mRNA、蛋白和cDNA的表达情况.结果:HaCaT细胞正常对照组无iNOS mRNA、蛋白和cDNA的表达;5 J/cm<'2> UVA照射后,HaCaT细胞的iNOS mRNA、蛋白和cDNA表达在24 h时出现,48 h达高峰,且明显高于24 h(P<0.05),72 h无表达:5-azaC处理HacaT细胞24 h后,仅有iNOS cDNA表达,72 h和120 h有iNOS mRNA、蛋白和cDNA表达,且120 h表达量强于72 h(P<0.05).结论:HaCaT细胞iNOS表达与UVA照射存在一定的时间关系,iNOS基因甲基化状态的改变可以影响其表达.
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姬松茸不同提取物对UVB致HaCaT细胞光损伤的保护作用研究
[目的]研究姬松茸不同提取物对中波紫外线(ultraviolet B,UVB)致人永生化角质形成细胞(HaCaT)光损伤的保护作用.[方法]采用四甲基偶氮唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法测定不同剂量UVB对正常HaCaT细胞存活率的影响,姬松茸不同提取物对正常HaCaT细胞存活率的影响,以及姬松茸不同提取物对UVB所致光损伤的HaCaT细胞存活率的影响.[结果]①不同剂量UVB照射后细胞存活率均下降,且呈剂量依赖性,当UVB达20mj/cm2时,细胞存活率为53.23%.②姬松茸水提物浓度在0.2~4mg·mL-1、醇提物在0.1~2mg·mL-1、粗多糖在0.2~1mg·mL-1时具有促进HaCaT细胞增殖的作用,醇提物和粗多糖浓度增大则抑制细胞生长.③姬松茸水提物浓度在1~4mg·mL-1、醇提物在1~2mg·mL-1、粗多糖在0.5~1mg·mL-1均能显著提高20mj/cm2 UVB照射后HaCaT细胞的存活率(P<0.01).[结论]姬松茸不同提取物可以在一定程度上减轻UVB诱导的HaCaT细胞的光损伤,具有抗皮肤光老化的潜力.
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紫草素对HaCaT细胞Notch-1信号通路的调节作用
目的 研究紫草素对HaCaT细胞抑制增殖的作用及其作用机制.方法 倒置显微镜下观察不同浓度紫草素(0、2、5、10、15μmol/L)作用后HaCaT细胞的形态学改变;MTT法检测紫草素对HaCaT细胞抑制增殖的作用;流式细胞术检测细胞凋亡率变化;Western blot法检测Notch-1、Jagged1和Hes5蛋白的表达情况.RT-PCR检测下游信号分子Hes1和Hes5的mRNA表达.结果 10μmol/L紫草素即可显著抑制HaCaT细胞的增殖,且随着浓度的增加,紫草素呈剂量依赖性地抑制HaCaT细胞的增殖(均P＜0.01).流式细胞术检测结果显示101μmol/L紫草素能够显著诱导HaCaT细胞凋亡(P＜0.01).Western bolt法检测结果显示,Notch-1、Jagged1和Hes5蛋白表达逐渐降低.RT-PCR法检测结果显示,Notch信号通路下游信号分子Hes1和Hes5的mRNA表达水平亦呈剂量依赖性降低.结论 紫草素呈剂量依赖性地抑制HaCaT细胞的增殖,并诱导细胞凋亡,Notch-1信号通路在其中起了重要作用.
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扇贝多肽经由死亡受体和线粒体通路抑制UVB诱导的HaCaT细胞凋亡
目的 从凋亡相关分子Fas(CD95)、半胱天冬酶-3(caspase-3)和活性氧(ROS)、细胞色素C的角度,研究扇贝多肽(polypeptide from Chlamys farreri,PCF)抑制UVB引起的人角质HaCaT细胞凋亡的分子机制.方法 实验设计为5组:对照组、UVB模型组、UVB+5.69 mmol·L-1PCF组、UVB+2.84 mmol·L-1PCF组、UVB+1.42 mmol·L-1PCF组.应用小干扰RNA(siRNA)干扰UVB辐射的HaCaT细胞的Fas表达;琼脂糖凝胶电泳分析Fas siRNA及ROS清除剂NAC对细胞凋亡的影响;以DCFH-DA为荧光探针,检测细胞内ROS的含量;免疫印迹法检测细胞色素C及用RNAi干扰降低Fas表达后caspase-3的表达.结果 干扰Fas后,UVB辐射的HaCaT细胞凋亡受到明显抑制及caspase-3的表达降低;NAC对UVB诱导的HaCaT细胞凋亡有抑制作用;1.42～5.69 mmol·L-1剂量范围内的PCF可剂量依赖性抑制UVB引起的ROS的生成及细胞色素C的释放.结论 PCF可抑制UVB诱导的HaCaT细胞凋亡,其作用机制与抑制Fas-caspase-3及ROS-细胞色素C通路有关.
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肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体及扇贝多肽在UVA诱导HaCaT细胞凋亡中的作用
目的 研究UVA对HaCaT细胞肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(tumour necrosis factor related apoptosis inducing ligand,TRAIL)表达的影响;复制UVA诱导的HaCaT细胞凋亡模型,探究TRAIL在UVA诱导的HaCaT细胞凋亡中的作用及扇贝多肽(Polypeptidefrom Chlamys farreri,PCF)对UVA诱导的TRAIL凋亡通路的影响.方法 实验设计分为5组:对照组、UVA模型组、UVA+5.69 mmol·L-1PCF组、UVA+2.84 mmol·L-1PCF组、UVA+1.42 mmol·L-1PCF组.Real-Time PCR检测TRAIL mRNA表达;蛋白质印迹法检测TRAIL蛋白表达及caspase-8活性;琼脂糖凝胶电泳分析TRAIL中和性抗体对UVA诱导的HaCaT细胞凋亡的影响.结果 8 J·cm-2UVA照射HaCaT细胞后TRAIL mR-NA及蛋白表达增加,与对照组相比差异有显著性(P＜0.01);TRAIL中和性抗体对UVA诱导的HaCaT细胞凋亡有抑制作用;1.42～5.69 mmol·L-1剂量范围内的PCF可剂量依赖性抑制UVA引起的HaCaT细胞TRAIL mRNA及蛋白表达(P＜0.05,P＜0.01);PCF对UVA引起的HaCaT细胞caspase-8的活化有抑制作用,且呈量效关系.结论 UVA可增强HaCaT细胞TRAIL表达;TRAIL参与了UVA诱导的HaCaT细胞凋亡;PCF对UVA诱导的HaCaT细胞TRAIL表达有抑制作用,也可减弱UVA诱导的caspase-8活化,以其抗氧化活性抑制TRAIL凋亡通路而发挥抗凋亡作用.
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他克莫司联合罗格列酮对TNF -α诱导的HaCaT 细胞增殖分化的影响
目的:评价他克莫司联合罗格列酮对TNF -α诱导的HaCaT 细胞体外增殖和分化的影响.方法:他克莫司(10μmol/L)和不同浓度罗格列酮单独及联合作用于TNF -α诱导的HaCaT 细胞48 h 后,用CCK-8 法测定细胞增殖,逆转录- 聚合酶链反应(RT-PCR)检测增殖分化标志物角蛋白6 及外 皮蛋白mRNA 的表达水平;结果:他克莫司和罗格列酮均可抑制TNF -α诱导的HaCaT 细胞体外增 殖,下调角蛋白6 mRNA 表达,上调外皮蛋白mRNA 表达,且联合用药组的作用更强.各组细胞生长抑 制率:他克莫司10 μmol/L 组为(21.71 ± 5.36)%,罗格列酮组10、20、40、80 μmol/L 组分别为(5.04 ± 7.12)%、(12.56 ± 6.93)%、(21.41 ± 5.95)%和(39.17 ± 8.03)%,联合1 ～ 4 组分别为(27.60 ± 6.68)%、(38.35 ± 7.24)%、(48.60 ± 8.40)%和(65.21 ± 4.53)%.结论:他克莫司、罗格列酮单独或联合应用 均可抑制TNF -α诱导的HaCaT 细胞体外增殖,促进其分化.
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2型单纯疱疹病毒对HaCaT细胞分泌IL-10、IFN-γ的影响
目的:观察2型单纯疱疹病毒时人永生化角质形成细胞株分泌IL-10、IFN-γ的影响,探讨角质形成细胞对HSV-2病毒感染初期的免疫防御机制.方法:用2型单纯疱疹病毒感染人永生化角质形成细胞,采用荧光实时定量PCR检测感染后24,48,72 h的IL-10、IFN-γ mRNA的表达量.结果:与对照组比较,经2型单纯疱疹病毒感染后人永生化角质形成细胞分泌IL-10的表达量在24 h内下降,24～48 h上升,48～72 h下降,而IFN-γ则相反,24 h内上升,24～48 h下降,48～72 h上升,与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05).结论:在2型单纯疱疹病毒感染角质形成细胞初期,角质形成细胞具有类淋巴细胞的功能,能分泌IL-10、IFN-γ,在不同的时段产生不同的免疫反应,并且IL-10、IFN-γ的表达互为抑制.
