首页 > 文献资料
-
HPLC法测定大鼠血浆中马钱子碱的浓度
目的:建立HPLC测定大鼠血浆中马钱子碱浓度的方法.方法:以士的宁为内标,血浆用液-液2次萃取进行处理.采用Phenomenex C18(250 mm×4.6 mm,5μm)和汉邦C18预柱;流动相:乙腈-0.01 mol·L-1庚烷磺酸钠与0.02 mol·L-1磷酸二氢钾等量混合(用10%磷酸调pH 2.8)(24:76);检测波长:264 nm;流速:1.0 mL·min-1;柱温:30℃.大鼠静脉注射马钱子碱溶液10 mg·kg-1.应用3P97药动学软件程序对数据进行计算机处理.结果:血浆内源性杂质对样品测定无干扰.马钱子碱定量限为50 ng·mL-1,在50～5000 ng·mL-1范围内线性关系良好(r=0.9978).血浆中的马钱子碱的绝对回收率为86.3%～97.6%.方法回收率为97.7%～107.O%,日内RSD≤6.3%,日间RSD≤7.0%.样品多次冻融后稳定性良好.主要药动学参数A=2589 ng·mL-1,α=0.06 min-1,B=926 ng·mL-1,β=0.008 min-1,Vc=2907 mL·kg-1,t1/2β=16 min,t1/2β=80 min,K21=0.022 min-1,K10=0.020 min-1,K12=0.022 min-1,AUC=187 min·μg·mL-1,CL=57 mL·kg-1·min-1.结论:该法快速、灵敏、准确,可用于马钱子碱在大鼠体内的药代动力学研究.
-
RP-HPLC法同时测定骨筋丸胶囊中士的宁和马钱子碱的含量
目的:建立骨筋丸胶囊中士的宁和马钱子碱的反相高效液相分析法,为该药质量控制提供依据.方法:采用Therno Hypersil C18 ODS色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm);乙腈-甲醇-0.01mol·L-1KH2PO4-三乙胺(10∶5∶85∶0.5,10%磷酸调pH至2.5)为流动相;流速1 mL·min-1;检测波长254 nm.结果:士的宁在0.104～0.368μg(r=0.9999)、马钱子碱在0.072～0.252μg(r=0.9996)范围内呈良好的线性关系;士的宁回收率为99.22%(RSD=1.8%);马钱子碱回收率为100.01%(RSD=2.0%).结论:本方法准确可靠,简便灵敏,重现性好,可用于骨筋丸胶囊中士的宁和马钱子碱的质量控制.
-
毛细管区带电泳法测定马钱子药材及其制剂中士的宁和马钱子碱的含量
目的:建立了测定马钱子药材及其制剂中士的宁和马钱子碱含量的毛细管区带电泳法.方法:选择25 mmol*L-1醋酸钠含0.01%冰醋酸(pH 3.86)溶液为运行缓冲液,无涂层毛细管柱(57 cm×75 μm,有效长度50 cm),采用5 kPa,5 s压力进样,运行电压30.0 kV,温度20 ℃,DAD检测波长203 nm.实验以盐酸麻黄碱为内标物质.结果:士的宁和马钱子碱的浓度分别在6.93～138.20 μg*mL-1和6.51～130.20 μg*mL-1范围内时,具有良好的线性关系,相关系数r分别为0.999 7和0.999 4(n=6);马钱子药材中士的宁和马钱子碱的加样回收率分别为101.3%和99.42%;RSD分别为2.5%和 2.2%(n=6).士的宁和马钱子碱的低检测限分别为0.05 μg*mL-1和0.06 μg*mL-1.结论:马钱子药材及其制剂中的其它组分与士的宁和马钱子碱可产生良好分离,本法简便、快速、准确、可靠.
-
液相色谱-电喷雾离子阱质谱法检测体液中士的宁、马钱子碱及其主要代谢物
目的:检测体液中士的宁、马钱子碱及其主要代谢物.方法:采用液相色谱-电喷雾离子阱质谱联用法,对送检样品进行了鉴定.结果:与士的宁、马钱子碱对照品的LC/MSn分析结果比较,证明送检样品中含有大量士的宁、马钱子碱.并根据色谱和质谱行为,推测士的宁在人体内的主要代谢产物为葡糖苷酸结合物,马钱子碱的代谢途径为去甲基化.低检测限为5 ng.结论:本法快速、简捷,尤其适合于毒物检测等相关部门的分析检测用.
关键词： 液相色谱-电喷雾离子阱质谱联用法 士的宁 马钱子碱 代谢产物 -
高效液相色谱法测定伤科缓释胶囊中士的宁和马钱子碱的含量
目的:建立伤科缓释胶囊中士的宁和马钱子碱的含量测定方法.方法:采用高效液相色谱法,使用迪马ODS(5μm,4.6 mmx200mm)色谱柱,流动相为乙腈-含0.2%磷酸和0.2%三乙胺的水(11∶89),流速1ml·min-1,检测波长260nm,柱温为室温.结果:士的宁的进样量在0.29-1.74μg范围内线性关系良好(r=0.9999),平均加样回收率为98.4%(RSD=1.4%);马钱子碱进样量在0.245-1.47μg范围内线性关系良好(r=0.9997),平均加样回收率为99.0%(RSD=1.6%).结论:该方法简便、灵敏、准确,可用于伤科缓释胶囊的质量控制.
-
HPLC测定风湿安泰片中马钱子碱和士的宁的含量
目的:采用反相高效液相色谱法测定风湿安泰片中士的宁和马钱子碱的含量.方法:采用Hypersil BDS C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),保护柱(4.6 mm×12 mm);乙腈-0.3%三乙胺溶液(磷酸调pH=2.6)(10:90)为流动相,流速:1.0 mL·min-1,柱温:室温,检测波长:254 nm.结果:士的宁在4.6～46 μg·mL-1(r=0.9998),马钱子碱在2.65～26.5 μg·mL-1(r=0.9998)范围内呈良好的线性关系,士的宁的平均回收率(n=5)为101.1%,RSD为2.8%;马钱子碱的平均回收率(n=5)为99.6%,RSD为2.9%.结论:本方法准确、简便、快速,适用于风湿安泰片的质量控制.
-
微透析联合LC-MS/MS法研究马钱子总碱囊泡凝胶透皮吸收
目的:建立皮肤微透析采样技术联合LC-MS/MS同时测定马钱子碱和士的宁的分析方法,并研究大鼠经皮给予马钱子囊泡凝胶后的透皮吸收.方法:应用皮肤微透析技术对大鼠给药部位皮下进行采样；微透析样品以他克林为内标,不经预处理直接进样;色谱采用XDB-C18柱,甲醇-乙腈-水(含0.05％甲酸和10 nmol·L-1甲酸铵)梯度洗脱；质谱采用正离子扫描多反应监测(MRM)方式.,用于定量的离子对分别为m/z335.2→ m/z 184.2(士的宁),m/z395.2 →m/z324.2(马钱子碱),m/z199.1→ m/z 171.1(他克林).结果:测定微透析样品中马钱子碱和士的宁2种成分的线性范围分别为0.195 ～50 ng·mL-1和0.156～40 ng·mL-1,日内和日间精密度(RSD)均小于15％,准确度、稳定性符合要求.结论:该方法操作简便、灵敏度高、专属性强,适用于皮肤微透析样品中马钱子碱和士的宁的测定.
-
马钱子对照提取物的研究及其在马钱子药材及复方制剂质量控制中的应用
目的:研制马钱子对照提取物,建立采用该对照提取物对马钱子药材和复方制剂进行质量控制的方法.方法:采用Symmetry ShieldTM RP C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-0.01 mol· L-1庚烷磺酸钠与0.02 mol·L-1磷酸二氢钾等量混合溶液(21:79)为流动相,流速1 mL· min-1,检测波长260 nm,柱温30℃.对对照提取物的均匀性、稳定性进行考察,并进行赋值;对马钱子药材和骨刺片进行含量测定.结果:马钱子对照提取物的均匀性(F-test)和稳定性良好,士的宁和马钱子碱的平均含量(n=6)分别为49.9％(RSD=1.0％)和45.4％(RSD=0.59％).采用对照提取物测定马钱子药材及复方制剂共8批次,测定结果与采用士的宁和马钱子碱单体对照品测得的结果基本一致.结论:本文初步验证了马钱子对照提取物可替代单体对照品用于马钱子药材及复方制剂的质量控制.
-
HPLC法测定神农丸中士的宁与马钱子碱的含量
目的:采用氨基键合硅胶为固定相的正相高效液相色谱法,研究建立神农丸中士的宁与马钱子碱的含量测定方法,并进行方法学研究.方法:以ZORBAX NH2氨基键合硅胶柱为色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈-异丙醇-3％磷酸溶液(80∶10∶10)为流动相,以260 nm为检测波长,流速1.0 mL·min-1,柱温:40℃.结果:士的宁进样量在0.051 2～0.512 μg范围内线性关系良好,回归方程:Y=1 989.6X+3.610,r=0.999 9;马钱子碱进样量在0.057 6～0.576 μg范围内线性关系良好,回归方程:Y=1 932.8X-2.569,r=1.000,士的宁与马钱子碱的平均回收率分别为98.6％、96.7％.结论:本方法操作简便,供试品色谱图基线稳定,主成分峰峰形对称,分离度高,方法的重复性好、准确度高,可用于神农丸中士的宁与马钱子碱的含量测定.
-
骨刺片中士的宁和马钱子碱含量测定方法的研究
目的:拟建立骨刺片中士的宁和马钱子碱的高效液相色谱(HPLC)含量测定方法,并考察马钱子生物碱对照提取物(简称对照提取物)和马钱子生物碱混合对照溶液(简称混合对照溶液)替代单体对照品,测定骨刺片中士的宁和马钱子碱含量的可行性.方法:采用Symmetry Shield TM RP C18(4.6 mm×250 mm,5 μm)色谱柱,以乙腈-0.01 mol·L-1庚烷磺酸钠与0.02 mol·L-1磷酸二氢钾等量混合溶液(21∶79)为流动相,流速1 mL· min-1,检测波长260 nm,柱温30℃.分别采用士的宁、马钱子碱的对照品,对照提取物和混合对照溶液为对照,测定骨刺片中士的宁和马钱子碱的含量.结果:士的宁和马钱子碱进样量分别在0.14～10.00 μg和0.10～10.00μg范围内线性关系良好;以对照品、对照提取物和混合对照溶液为对照,士的宁的平均回收率(n=6)分别为95.7％、98.8％和97.5％,RSD分别为1.6％、1.2％和1.4％;马钱子碱的平均回收率(n=6)分别为97.7％、99.5％和96.9％,RSD分别为1.3％、0.92％和2.0％.采用建立的HPLC方法测定了10个厂家22批次骨刺片样品,以对照品、对照提取物和混合对照溶液为对照,士的宁含量范围分别为0.09～0.69、0.10～0.68和0.10～0.69 mg·g-1,马钱子碱含量范围分别为0.05～0.62、0.05～0.61和0.05～0.62 mg·g-1.结论:本研究建立的HPLC方法,可快速、准确地测定骨刺片中士的宁和马钱子碱的含量.本文采用士的宁和马钱子碱单体对照品、对照提取物和混合对照溶液为对照,测定骨刺片中士的宁和马钱子碱的含量,结果无显著差异(P＜0.05),表明对照提取物和混合对照溶液可替代单体对照品测定骨刺片中士的宁和马钱子碱的含量.
-
云南马钱与马钱的比较研究
目的:对云南马钱与马钱进行比较研究.方法:运用高效液相色谱法、薄层色谱法、显微鉴别法、特征图谱研究等多种方法对云南马钱和马钱从原植物形态,种子性状、显微特征、薄层色谱及高效液相色谱进行比较.结果:云南马钱与马钱的植物基原,种子的性状、液相色谱特征具明显区别,显微特征与薄层色谱无明显差异,马钱子碱与士的宁含量存在差异.结论:采用植物形态、药材性状、液相色谱图谱特征可以鉴别云南马钱与马钱.
-
HPLC法测定马钱子及其制剂中士的宁与马钱子碱的含量
报道了采用HPLC法测定马钱子及其制剂中士的宁与马钱子碱的含量.色谱填料为硅胶(3 μm), 流动相为正己烷-二氯甲烷-甲醇-浓氨试液(47.5∶47.5∶5∶0.35), 检测波长为254 nm.实验结果表明, 该方法简便、准确,灵敏度高,重现性好.
-
马钱子碱对白血病细胞株HL-60的作用研究
目的 研究马钱子碱对人类白血病细胞株HL-60的增殖抑制作用及诱导凋亡作用.方法 分别用0、40、80、160、320、640 μg/ml的马钱子碱培养HL-60细胞,24、48、72 h后用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测各组细胞的生长抑制率并计算IC50值；用AO/EB染色法荧光显微镜下观察细胞的形态学变化；用Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞的凋亡及凋亡率；用PI单染流式细胞术检测细胞周期分布.结果 马钱子碱可明显抑制HL-60细胞增殖,其作用呈剂量和时间依赖性,马钱子碱作用24、48、72 h后的IC50值分别为211.82、107、83μg/ml.320μg/ml马钱子碱作用48 h后观察到典型细胞凋亡形态,大部分细胞核染色质被EB染成桔红色并呈固缩状或圆珠状凋亡形态.流式细胞术检测显示各浓度组的细胞凋亡率分别为(2.1±1.1)％、(21.3±1.2)％、(38.6±1.3)％、(58.5±4.1)％、(75.3±0.87)％、(66.2±0.75)％,在0～ 320 μg/ml范围内随马钱子碱作用浓度的增加凋亡率逐渐升高,640 μg/ml浓度组细胞已无早期凋亡与活细胞.细胞周期检测显示明显的凋亡峰,与对照组相比G0/G1期细胞明显减少,G2/M期细胞明显增多.结论 马钱子碱可明显抑制人类白血病细胞株HL-60的增殖,其机制可能是诱导细胞凋亡和阻滞细胞于G2/M期.
-
马钱子碱对多发性骨髓瘤骨病骨代谢影响的体外研究
目的 探讨马钱子碱体外对多发性骨髓瘤(MM)骨病骨代谢的影响,同时与硼替佐米比较体外对MM骨病的疗效.方法 应用马钱子碱和硼替佐米作用于MM细胞株U266,MTT法检测硼替佐米与马钱子碱对MM细胞株U266的半数抑制浓度(IC50),将成骨细胞株MC3T3-E1加入有马钱子碱或硼替佐米作用的MM细胞株U266上清中培养,分为空白对照组、U266上清干预组、硼替佐米作用的U226细胞上清干预组、马钱子碱作用的U266细胞上清干预组,以RT-PCR法测定各组MC3T3-E1细胞碱性磷酸酶(ALP)、骨钙素(OC)、骨保护素(OPG)及NF-κB受体活化因子的配体(RANKL)的mRNA水平.结果 硼替佐米作用于MM细胞株U266 48h的IC50为22.4 nmol/L,马钱子碱为0.16mg/ml;经马钱子碱作用的U266细胞上清液干预组的MC3T3-E1细胞中的ALP、OC及OPG的mRNA水平高于只经U266细胞上清液干预组(P＜0.05),而RANKL的mRNA水平则降低(P＜0.05),且4个基因mRNA水平增高或降低的程度大于经硼替佐米作用的U266细胞上清液干预组的MC3T3-E1细胞表达水平(P＜0.05).结论 马钱子碱对MM骨病中骨代谢机制的影响可能通过成骨细胞对破骨细胞的调节而发挥作用；体外马钱子碱对MM骨病骨代谢的影响效果大于硼替佐米.
-
LC/MS/MS法测定全血中马钱子碱和士的宁的含量
目的 建立定量分析人全血中马钱子碱和士的宁的高效液相色谱质谱联用法.方法 应用OasisTMMCX小柱进行固相萃取法提取,XTerra TM RP18色谱柱分离.结果 在该条件下,人血中马钱子碱和士的宁的线性范围为0.01～5.0μg/ml,小检出限为0.2ng/ml;马钱子碱和士的宁在0.01～5.0μg/ml浓度范围内的回收率均在80%以上.结论 高效液相色谱质谱联用法可定量测定血中马钱子碱和士的宁.
-
甲醛固定组织中士的宁与马钱子碱的LC-MS/MS分析
目的 建立甲醛固定组织中士的宁与马钱子碱的高效液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)分析方法.方法 甲醛固定组织经匀浆、离心后,上清液用SCX固相萃取小柱净化,在SB-C18液相色谱柱上以V(0.1％甲酸溶液):V(0.1％甲酸乙腈溶液)=75∶25为流动相进行分离,采用电喷雾离子源(ESI)、正离子检测、多反应监测模式进行分析,外标法定量.结果 甲醛固定肾、肝组织中士的宁与马钱子碱色谱分离良好,在0.002～2.0 μg/g内均具有良好的线性(r＞0.996)；肾组织中士的宁和马钱子碱的检出限分别为0.06 ng/g和0.03 ng/g,肝组织中均为0.3 ng/g；提取回收率均＞74.5％,日内及日间精密度均小于8.2％.结论 所建LC-MS/MS方法灵敏度高,可用于甲醛固定组织中士的宁和马钱子碱的检测,以满足法医毒物分析的鉴定需求.
关键词： 法医毒理学 液相色谱-串联质谱法 士的宁 马钱子碱 甲醛固定 -
关节止痛胶囊质量标准的研究
目的:建立关节止痛胶囊的质量标准.方法:采用显微鉴别法和薄层色谱法对关节止痛胶囊进行定性鉴别.结果:显微鉴别、薄层色谱鉴别可检出样品中相应的显微特征及薄层斑点.结论:所建立的方法专属性强,可有效控制关节止痛胶囊的内在质量.
-
马钱子毒性物质基础及减毒增效方法研究进展
目的：马钱子具有消肿利咽、通痹止痛、清热解毒等功效，广泛用于用于风湿顽痹，麻木瘫痪，类风湿性关节痛等疾病，临床疗效确切。但因马钱子主要的生物活性成分同时也是主要的毒性成分番木鳖碱和马钱子碱的治疗剂量与中毒剂量较接近，其临床应用的毒副作用限制了马钱子的广泛使用。通过查阅近年国内外文献，总结了马钱子毒性物质基础和毒性机制以及减毒增效方法，为马钱子的毒性研究以及临床使用提供相关的参考。
-
马钱子炮制关键工艺参数研究
目的 优选马钱子的炮制工艺参数,以有效控制马钱子质量.方法 采用高效液相色谱法测定,以士的宁、马钱子碱含量为指标,评价砂料比,砂烫温度,炒制时间对马钱子质量的影响.结果 佳炮制工艺为炮制时物料温度约200-225℃,时间约4-5分钟.结论 优选的炮制工艺稳定可行,适用于大规模生产.
