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雷氏大疣蛛蛛毒对人肝癌BEL-7402 细胞增殖的抑制作用及其机制的研究
背景与目的:蜘蛛毒素抗肿瘤的研究迄今还是未知领域.本研究探讨雷氏大疣蛛(Macrothele raveni)蛛毒对BEL-7402细胞增殖的抑制作用,进一步探讨其作用机制.方法:采用MTT法测定了雷氏大疣蛛蛛毒(10、20、40、80 靏/ml)对BEL-7402细胞增殖作用的影响;采用[3H]-TdR掺入法检测蛛毒加入前后BEL-7402细胞DNA的变化;利用流式细胞光度术(FCM)探讨雷氏大疣蛛蛛毒对BEL-7402细胞凋亡率和细胞周期的影响;利用Western blot方法进一步检测雷氏大疣蛛蛛毒对细胞周期相关基因c-myc的变化.结果:雷氏大疣蛛蛛毒对BEL-7402细胞增殖有较强的抑制作用(P<0.05),IC50为20靏/ml,时效和量效关系良好.雷氏大疣蛛蛛毒可以抑制BEL-7402细胞DNA的合成.流式细胞仪检测发现经过雷氏大疣蛛蛛毒作用下的BEL-7402细胞凋亡率增加,细胞周期阻滞在G0/G1期.Western blot方法进一步检测表明雷氏大疣蛛蛛毒作用于BEL-7402细胞72h后,c-myc基因表达减弱.结论:雷氏大疣蛛蛛毒就可以抑制人肝癌BEL-7402细胞的增殖和DNA的合成.其药理作用机制可能是除了诱导凋亡外,主要是使细胞周期相关基因c-myc表达减弱,导致细胞周期的变化.