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MTT法检测异咯嗪光动力对Bel-7402细胞的抑制作用
目的 研究异咯嗪光动力对Bel-7402细胞的抑制作用.方法 采用四甲基偶氮唑蓝染色法(MTT法)测定异咯嗪光动力对Bel-7402细胞的抑制作用.结果 异咯嗪光动力能明显抑制Bel-7402细胞.结论 异咯嗪是一种很有潜力抗癌光敏剂.
关键词： 异咯嗪 光动力 凋亡 Bel-7402细胞 -
人参多糖注射液对肝细胞癌的增殖抑制作用及机制探讨
目的:观察人参多糖注射液对人肝癌细胞BEL-7402和HpeG2增殖抑制作用,并探讨其机制.方法:将不同浓度的人参多糖注射液与人肝癌细胞BEL-7402和HpeG2作用,采用cell counting kit-8(CCK8)检测细胞的增殖抑制,通过倒置显微镜观察用药前后细胞形态、数量变化,透射电镜观察细胞坏死、凋亡等形态学变化,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肿瘤坏死因子受体1(TNFR1)蛋白表达情况.结果:人参多糖注射液对人肝癌细胞BEL-7402和HpeG2的增殖有明显抑制作用(P＜0.05),并且与浓度和时间呈正相关.60,80,100 g·L-1人参多糖注射液作用于人肝癌细胞BEL-7402和HpeG2 24,48,72h后,可显著抑制其增殖(P＜0.01),40 g·L-1人参多糖注射液作用于人肝癌细胞BEL-7402和HpeG2 24,48,72 h后可明显抑制其增殖(P＜0.05).人参多糖注射液作用人肝癌细胞BEL-7402和HpeG2 48 h后,细胞出现细胞核边集、凋亡小体等凋亡形态变化,72 h后部分细胞出现空泡样变等形态学变化.与空白组比较,40,60,80 g·L-1人参多糖注射液组作用人肝癌细胞BEL-7402和HpeG2后,TNFR1蛋白相对表达量明显升高(P＜0.05,P＜0.01).结论:人参多糖注射液对人肝癌细胞BEL-7402和HpeG2的增殖有明显的抑制作用;诱导细胞凋亡可能是抑制作用的机制.
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半夏蛋白抗肿瘤活性组分的提取分离
目的 分离半夏蛋白的抗肿瘤活性组分,研究该半夏蛋白组分的抗肿瘤作用.方法 用凝胶柱分离纯化半夏粗总蛋白,采用四氮唑蓝比色法(MTT法)观察半夏蛋白对肝癌Bel-7402细胞增殖的抑制,应用流式细胞术(FCM)检测其对细胞凋亡的影响.结果 半夏粗总蛋白中30%硫酸铵沉淀部分、60%硫酸铵沉淀部分对肿瘤抑制的量效关系不明显,30%硫酸铵沉淀部分经分离后0.05 mol/L和0.1 mol/L NaCl的洗脱峰呈现较好的量效关系,且对Bel-7402细胞的抑制作用与空白对照组有显著性差异.30%硫酸铵沉淀蛋白有促进Bel-7402细胞凋亡的作用.结论 半夏蛋白中30%硫酸铵沉淀部分对Bel-7402细胞生长具有明显抑制作用及促进Bel-7402细胞凋亡的作用.
关键词： 半夏 Bel-7402细胞 抗肿瘤蛋白组分 抗肿瘤活性测定 -
人羊膜上皮细胞上清液对人肝癌BEL-7402细胞的体外抗肿瘤作用
目的 探讨人羊膜上皮细胞(hAECs)上清液对体外培养的肝癌细胞系BEL-7402细胞迁移、增殖与凋亡的影响.方法 BEL-7402细胞随机分为5组,其中对照组不加hAECs上清液,其余4组加入体积分数分别为6.25％、12.5％、25％和50％的hAECs上清液作用24 h后,通过划痕实验、MTT试验和流式细胞术检测BEL-7402细胞迁移、增殖和凋亡;Western blot法检测凋亡相关蛋白的表达量.结果 hAECs上清液能剂量依赖性地抑制BEL-7402细胞迁移、增殖并诱导凋亡(P＜0.05);25％和50％ hAECs上清液组BEL-7402细胞easpase-3和caspase-8蛋白的切割片断蛋白定量明显高于对照组(P＜0.05).结论 hAECs上清液对体外培养的BEL-7402细胞具有一定的抗肿瘤作用.
关键词： hAECs Bel-7402细胞 细胞迁移 细胞增殖 细胞凋亡 -
MR1 siRNA抑制人肝癌细胞BEL-7402的增殖
目的 研究MR1基因对肝癌细胞增殖的影响及机制.方法 化学合成MRI siRNA,用脂质体lipofectamine2000转染肝癌细胞系BEL-7402细胞,RT-PCR检测MR1 siRNA基因沉默效果.用SRB法、集落形成法和生长曲线法检测MR1 siRNA对BEL-7402细胞增殖的影响.流式细胞术检测BEL-7402细胞周期,用细胞同步化的方法 ,即与G2期阻滞药物噻氨酯哒唑(nocodazole)联合应用,以间接反映MR1 siRNA对肿瘤细胞周期的影响.Western blot法检测Cyclin D1蛋白.结果 (1)300 nmol/L MR1 siRNA处理BEL-7402细胞24 hA,MR1基因的mRNA水平明显降低.(2)经siRNA处理后,BEL-7402细胞存活细胞数明显下降,细胞生长速度明显减慢,集落形成率显著下降,Cyclin D1表达水平明显降低.(3)MR1 siRNA与nocodazole联合处理BEL-7402细胞后,G2期细胞比例显著减少,而G1期细胞明显增多.结论 MR1基因与人肝癌BEL-7402细胞增殖相关,抑制MR1表达,能够引起细胞的增殖抑制,其作用机制与诱导细胞的G1期阻滞有关.
关键词： 肌纤基因调节因子 siRNA 细胞周期 细胞增殖 Bel-7402细胞 -
华蟾素对肝癌Bel-7402细胞放疗敏感性的影响及其作用机制的研究
目的 探讨华蟾素对肝癌Bel-7402细胞放疗敏感性的影响及其作用机制.方法 分别使用浓度为0.125、0.250、0.500、1.000μg/mL华蟾素处理肝癌Bel-7402细胞24 h、48 h、72 h,噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖的影响,根据半数抑制浓度(IC50)选择华蟾素浓度及作用时间.用0μg/mL(对照组)和0.4μg/mL华蟾素处理肝癌Bel-7402细胞,同时用剂量为0、2、4、6、8 Gy的6 MV X线进行照射,克隆形成实验检测细胞放疗敏感性.用IC50为0.4μg/mL华蟾素、6 Gy的X线分别单独或联合处理肝癌Bel-7402细胞,48 h后流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡率;Western blot检测细胞中p50、p65、Bcl-2、cyclin D1蛋白表达情况.结果 华蟾素能够显著抑制肝癌Bel-7402细胞增殖,随着作用浓度的增加及作用时间的延长,细胞抑制率逐渐升高.华蟾素能够抑制经照射后的肝癌Bel-7402细胞克隆形成能力,细胞存活率显著低于对照组(P<0.05).与对照组相比,华蟾素组、放疗组及联合组肝癌Bel-7402细胞G0/G1期细胞比例增多,S期细胞减少,细胞凋亡率升高,p50、p65、Bcl-2和cyclin D1蛋白表达降低,差异均有统计学意义(P值均<0.05);联合组与华蟾素组和放疗组相比,细胞周期、细胞凋亡率及蛋白表达差异均有统计学意义(P值均<0.01).结论 华蟾素能够增强肝癌Bel-7402细胞的放疗敏感性;其作用机制可能与华蟾素能够通过抑制核因子-κB信号通路及下调Bcl-2和cyclin D1蛋白表达,进而抑制细胞增殖、诱导细胞周期阻滞和细胞凋亡相关.
关键词： 肝肿瘤 Bel-7402细胞 华蟾素 放射治疗 核因子-κB -
蛋白激酶Cα对人正常肝和肝癌细胞周期及G1期相关调控因子cyclinD1、cyclinE的影响
目的探讨蛋白激酶Cα(PKCα)对人正常肝和肝癌细胞周期的作用和对G1期相关调控因子的影响. 方法通过细胞转染技术将PKCα cDNA正向插入的真核表达质粒PXJ41-PKCα导入正常肝细胞(L-02),并利用本室已构建的表达反义PKCα的BEL-7402细胞(HT6)检测细胞的生长曲线,细胞周期以及细胞对G1期相关调控因子cylinD1和cyclinE的影响. 结果构建了稳定过表达PKCα的人正常肝细胞模型(LT3),过表达PKCα可促进L-02细胞增殖,促进细胞由G1期向S期的过渡;cyclinD1和cyclinE的蛋白水平上升,反之表达反义PKCα的BEL-7402细胞(HT6)增殖被抑制,阻抑细胞由G1期向S期的过渡,cyclinD1和cyclinE的蛋白水平下降. 结论从正反两个方面表明,PKCα可通过作用于G1期相关周期蛋白的水平影响G1/S期的进程.
关键词： 蛋白激酶Cα L-02细胞 Bel-7402细胞 细胞周期 G1期相关调控蛋白 -
油樟叶挥发油及其主要成分的体外抗肝癌活性
目的 探讨油樟叶挥发油及其主要组成成分(1,8-桉叶油素、黄樟油素、γ-松油烯、α-松油烯和松油烯-4-醇)的抗肝癌活性. 方法 运用体外培养细胞四甲基偶氮唑盐(MTT)快速比色法,观察油樟叶挥发油的主要组成成分(1,8-桉叶油素、黄樟油素、α-松油烯、松油烯-4-醇和γ-松油烯)对人肝癌BEL-7402细胞的抑制作用,并用软琼脂细胞集落形成实验,观察油樟叶挥发油的主要组成成分对人肝癌BEL-7402细胞形成细胞集落的抑制作用. 结果 油樟叶挥发油、1,8-桉叶油素、黄樟油素、γ-松油烯、α-松油烯和松油烯-4-醇体外对人肝癌BEL-7402细胞的大增殖抑制率分别为58.63％、42.83％、90.04％、81.53％、34.83％和31.46％；对人肝癌BEL-7402细胞集落形成的大抑制率分别为55.13％、61.99％、94.56％、89.54％、62.02％和59.91％. 结论 油樟叶挥发油及其主要组成成分能不同程度地抑制人肝癌BEL-7402细胞的体外增殖及单个细胞形成细胞集落.其中黄樟油素和γ-松油烯对人肝癌BEL-7402细胞的抑制作用强.
关键词： 油樟叶挥发油 Bel-7402细胞 四甲基偶氮唑盐法 人 -
纳米羟基磷灰石的制备及其抗肿瘤活性的研究
采用溶胶凝胶法合成了含CO32-的纳米羟基磷灰石,研究了热处理温度对羟基磷灰石结晶性能、粒子大小和形貌的影响.并采用体外细胞培养的方法对含CO32-纳米羟基磷灰石的抗肿瘤活性进行了初步的探索.结果表明:以Ca(NO3)2*4H2O和PO(CH3O)3为原料,采用溶胶凝胶法,600℃处理可得到结晶性能良好、分散均匀、50nm左右大小的含CO32-的羟基磷灰石粉体.MTT比色法研究结果表明纳米HAP粒子对正常肝细胞L-02的抑制率较小,而对BEL-7402肝癌细胞有明显的抑制作用,且呈现明显的浓度和时间依赖性.荧光显微照片显示纳米HAP粒子能够诱导BEL-7402肝癌细胞的凋亡.
关键词： 纳米羟基磷灰石 制备 Bel-7402细胞 抗肿瘤活性 -
FABP-5基因沉默对肝癌Bel-7402细胞生物学特性及人参川穹嗪敏感性的影响
目的 探讨通过siRNA干扰技术沉默表皮脂肪酸结合蛋白-5(FABP-5)基因表达对人肝癌Bel-7402细胞生物学特性及人参川穹嗪敏感性的影响.方法 以人肝癌Bel-7402细胞为研究对象,根据FABP-5mRNA 编码序列设计并合成干扰 siRNA 序列,瞬时转染Bel-7402 细胞.将人肝癌 Bel-7402 细胞分为 FABP-5 siRNA 组、阴性对照组、空白对照组.用 RT-PCR 和Western blot 法分别从 mRNA 水平和蛋白水平检测FABP-5 基因的表达;CCK8 法测定细胞体外增殖能力;流式细胞技术检测各组细胞周期和凋亡的变化情况;细胞侵袭小室法检测各组细胞的体外侵袭力;MTT 法观察 FABP-5基因沉默后 Bel-7402 细胞对人参川穹嗪的敏感性.结果 RT-PCR 和 Western blot 显示,FABP-5 siRNA 组较阴性对照组和空白对照组的 FABP-5 mRNA 和蛋白表达都明显下降;FABP-5 siRNA 组细胞的生长速度明显减慢,细胞周期阻滞在 G0/G1期,S 期细胞数减少;与阴性对照组和空白对照组相比,FABP-5 siRNA 组细胞的凋亡率明显升高(P < 0.01),增殖、侵袭能力显著下降(P < 0.05);FABP-5 siRNA组细胞对人参川穹嗪的敏感性显著增强(P < 0.05).结论 特异性沉默 FABP-5 基因表达能够降低肝癌细胞的侵袭能力,抑制细胞的增殖,将细胞周期阻滞于 G0/G1期,使其凋亡显著增加.
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益气活血软坚解毒含药血清诱导人肝癌细胞系Bel-7402细胞的凋亡
目的:研究益气活血软坚解毒(YHRJ)含药血清对人肝癌细胞系Bel-7402生长抑制及诱导凋亡作用.方法:将YHRJ含药血清作用于人肝癌细胞系Bel-7402细胞,应用MTT检测对肝癌细胞生长抑制作用,倒置显微镜、荧光显微镜、激光共聚焦扫描显微镜等影像学方法观察细胞形态学变化,以及PI染色单染、AnnexinV-PI双染后,流式细胞术检测对细胞周期影响及诱导细胞凋亡程度.结果:MTT法检测结果显示:YHRJ含药血清具有抑制Bel-7402肿瘤细胞生长作用(其中20%YHRJ等效剂量抑制率49.1%,与NS比,P＜0.01);荧光显微镜及激光共聚焦显微镜可观察到典型的凋亡形态学变化.流式细胞术检测结果,细胞周期出现G0/G1期阻滞,并出现典型的凋亡峰,AnnexinV-PI双染法检测到早期及中晚期细胞凋亡.结论:YHRJ含药血清有抑制人肝癌细胞系Bel-7402细胞生长并有诱导细胞凋亡作用.
关键词： 益气活血软坚解毒 肝癌 Bel-7402细胞 -
Hint2基因过表达质粒的构建及其对肝癌细胞BEL-7402迁移的影响
目的 探讨Hint2基因过表达质粒的构建及其对肝癌细胞BEL-7402迁移的影响.方法 根据Hint2基因设计引物,扩增Hint2基因全长并以pcDNA3.1(+)为载体构建Hint2过表达质粒.转染BEL-7402细胞提取mRNA和总蛋白,分别使用Real-time PCR和Western blot检测转染细胞Hint2 mRNA和蛋白质表达的变化,应用免疫荧光染色法对细胞中Hint2蛋白与细胞线粒体进行共定位.使用划痕愈合实验检测Hint2过表达后对肝癌细胞BEL-7402迁移能力的影响.结果 转染Hint2过表达质粒细胞的Hint2 mRNA和蛋白表达显著上调,免疫荧光染色表明过表达的Hint2蛋白定位于线粒体.划痕愈合实验表明Hint2过表达质粒使肝癌细胞BEL-7402迁移速率显著降低.结论 Hint2过表达质粒能够上调BEL-7402细胞中Hint2 mRNA和蛋白质的表达水平,表达的蛋白定位于细胞线粒体并抑制肝癌细胞的迁移.
关键词： Hint2 pcDNA3.1(+) Bel-7402细胞 -
应用蛋白质组学方法研究黄芪总黄酮对人肝癌细胞的影响
目的:应用蛋白质组学方法研究黄芪总黄酮(TFA)对人肝癌细胞的影响.方法:随机将BEL-7402人肝癌细胞分成两组,一组为对照组,另一组以黄芪总黄酮(剂量为半数抑制率)处理48 h.用双向凝胶电泳建立黄芪总黄酮组和对照组对人肝癌细胞蛋白质组影响的二维凝胶电泳图谱,用MALDI-TOF-MS生物质谱对差异的蛋白质进行鉴定分析.结果:黄芪总黄酮作用于人肝癌细胞的蛋白质组,质谱鉴定出10个差异蛋白:胆绿素还原酶B、转胶蛋白2、抗氧化蛋白1、磷酸化应激诱导蛋白1、内质网蛋白29、磷酸甘油酸变位酶1、胆绿素还原酶B、ABHD14B蛋白、LASP-1和NM23A;其中磷酸化应激诱导蛋白1表达下调,其他蛋白均上调.结论:黄芪总黄酮中的某些蛋白如转胶蛋白2、磷酸化应激诱导蛋白1、抗氧化蛋白1、内质网蛋白29、磷酸甘油酸变位酶1、胆绿素还原酶B等可能与黄芪总黄酮抗肿瘤作用机制相关.
关键词： 黄芪总黄酮 Bel-7402细胞 蛋白质组 二维凝胶电泳 质谱技术 -
复方苦参注射液对SGC-7901,HepG2和BEL-7402肿瘤细胞作用的实验研究
目的通过观察复方苦参注射液(商品名:岩舒注射液)对SGC-7901,HepG2和BEL-7402肿瘤细胞的作用,探讨其在恶性肿瘤治疗中的作用机制.方法选用SGC-7901,HepG2和BEL-7402细胞,采用MTT法检测岩舒注射液对于各肿瘤细胞的体外杀伤率,流式细胞仪检测岩舒注射液作用后的肿瘤细胞的细胞周期、凋亡率及bcl-2、CD44V6和nm23基因表达的变化.结果岩舒注射液浓度达到150μl/ml时HepG2,SGC-7901和BEL-7402细胞存活率低.岩舒注射液终浓度100μl/ml作用后的HepG2细胞G0/G1期、G2/M期明显增高,S期的细胞数量明显减少,凋亡率(2.8%)明显高于对照组(0.2%);SGC-7901细胞G2/M期细胞明显增多,S期细胞明显减少,凋亡率(4.6%)明显高于对照组(0.8%);100μl/ml岩舒注射液浓度作用后的nm23为97.85%,明显高于对照组(41.01%),CD44V6为10.29%,明显低于对照组(12.26%).结论岩舒注射液对于SGC-7901,HepG2和BEL-7402细胞具有明显的体外杀伤作用,并影响SGC-7901及HepG2的细胞周期,促进其凋亡;同时能够明显的抑制BEL7402细胞体内CD44V6的表达,促进抑转移因子nm23的表达,具有明显的抑制肿瘤转移的作用.
关键词： 复方苦参注射液 SGC-7901 HepG2 Bel-7402细胞 -
安宫牛黄丸通过诱导细胞凋亡和降低线粒体膜电位抑制肿瘤细胞增殖
目的 观察安宫牛黄丸的抗肿瘤作用,并探索其可能的作用机制.方法 安宫牛黄丸9,30,90,300和900 mg·L-1分别与人胃癌MGC-803和人肝癌BEL-7402细胞孵育24,48和72 h.采用噻唑蓝[3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-5(3-羧基甲基苯基)-2-(4-磺酸苯基)-2H-四氮唑)细胞毒实验MTS法和克隆实验观察安宫牛黄丸对MGC-803和BEL-7400细胞增殖的影响；应用Hoechst 33258/PI染色和流式细胞仪检测细胞凋亡；荧光分光光度计检测线粒体膜电位.结果 安宫牛黄丸具有浓度依赖性地抑制肿瘤细胞增殖的作用.MTS法测定结果表明,安宫牛黄丸作用48和72 h对MGC-803细胞增殖具有抑制作用,浓度-效应相关系数分别为0.996(P =0.000)和0.756(P =0.004)；与BEL-7402细胞作用48和72 h的浓度-效应相关系数分别为0.732(P =0.030)和0.700(P =0.037).细胞克隆实验结果表明,安宫牛黄丸作用24h可浓度依赖性地抑制MGC-803细胞(r=0.914,P=0.011)和BEL-7402细胞(r=0.871,P=0.024)克隆形成.Hoechst 33258/PI染色和流式细胞仪检测结果表明,安宫牛黄丸900 mg·L-1作用24h可诱导MGC-803和BEL-7402细胞凋亡,细胞凋亡百分率分别达27.2％和19.7％.安宫牛黄丸900 mg· L-1作用后连续检测3 min,MGC-803和BEL-7402细胞的线粒体膜电位比对照组分别下降15.9％和15.0％.结论 安宫牛黄丸具有抑制肿瘤细胞增殖的作用,其作用机制与诱导细胞凋亡和降低肿瘤细胞线粒体膜电位有关.
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人参多糖诱导人肝癌BEL-7402细胞凋亡作用及机制
目的 本实验探讨人参多糖(GPS)诱导人肝癌BEL-7402细胞凋亡作用及机制.方法 在人肝癌BEL-7402细胞中,采用人参多糖处理给药,CCK8检测细胞存活率,流式细胞术检测细胞周期分布,TUNEL染色法和扫描电镜观察细胞形态变化,Western blot检测TNFR1、Bcl-2和Bax蛋白表达以及ERK磷酸化情况.结果 CCK8结果显示,GPS以时间及浓度依赖方式抑制人肝癌细胞BEL-7402的生长;流式细胞术检测细胞周期表明,随GPS浓度逐渐增高,S期阻滞作用也逐渐增强,出现明显的“亚二倍体”凋亡峰,随浓度的增高凋亡峰也逐渐升高;TUNEL染色法和扫描电镜观察到,GPS使人肝癌细胞BEL-7402发生明显的凋亡形态变化,并随浓度的增加出现凋亡作用逐渐增强;Western blot结果显示,随GPS浓度逐渐增高,凋亡相关蛋白Bax的表达逐渐升高,抗凋亡蛋白Bcl-2的表达逐渐下降,同时出现死亡受体TNFR1的表达增强,提高ERK磷酸化水平.结论 人参多糖可通过线粒体依赖途径、死亡受体依赖途径及ERK通路诱导人肝癌BEL-7402细胞的凋亡.
关键词： 肝细胞癌 人参多糖 细胞周期 凋亡 Bel-7402细胞 -
稀土离子对BEL-7402细胞蛋白质构象变化的影响
应用傅立叶变换红外光谱(FT-IR)方法,考察了稀土离子作用于BEL-7402细胞后所引起的整个细胞蛋白质构象的变化.结果:在Hepes缓冲液介质中,1.0×10-4 mol*L-1La3+对BEL-7402细胞蛋白二级结构的影响随时间变化,作用1 h没有影响;作用2 h和3 h结果类似;作用3 h,1.0×10-4 mol*L-1的不同稀土离子相比较,使Random上升的程度是Yb3+>La3+>Gd3+.提示:稀土离子可使BEL-7402细胞蛋白质构象发生变化,这种变化可能是由于蛋白质很大一部分氢键作用发生了变化和蛋白质发生了聚集造成的.
关键词： 稀土离子 Bel-7402细胞 傅立叶变换红外光谱 蛋白质构象 -
脂质体-姜黄素水溶制剂抗肝癌效应的稳定性研究
目的研究脂质体-姜黄素水溶制剂抗肝癌效应的稳定性.方法MTT法观察脂质体-姜黄素水溶制剂(放置1、2、4、8、12个月)对Bel-7402细胞增殖的抑制作用.原位末端标记方法(TUNEL技术)观察脂质体-姜黄素水溶制剂放置12个月后诱导Bel-7402细胞凋亡的作用.免疫组织化学染色(SABC)法检测脂质体-姜黄素水溶制剂放置12个月后对Bax、Bcl-2和P53蛋白表达的影响.结果姜黄素水溶制剂随着放置时间的延长,抑制Bel-7402细胞增殖和诱导凋亡的作用均显著减弱.脂质体-姜黄素随放置时间的延长,抑制Bel-7402细胞增殖和诱导凋亡的作用无明显衰减现象,至放置12个月后脂质体-姜黄素10、5及0.25μg/mL 3个剂量对Bel-7402细胞增殖仍有显著抑制作用,与同质量浓度的姜黄素比较,差异显著(P＜0.01),抑制作用随药物质量浓度增高而有加强趋势,高抑制率可达43.90%,且呈量效关系,3个剂量组间差异有显著性(P＜0.01),同质量浓度的脂质体-姜黄素的抑制率显著高于姜黄素的抑制率(P＜0.01).姜黄素-脂质体放置12个月,Bel-7402细胞凋亡率达63.7%.结论脂质体能显著提高姜黄素对Bel-7402细胞增殖的抑制和诱导凋亡作用.脂质体-姜黄素水溶制剂放置12个月后对P53表达有显著影响,但对Bax和Bcl-2的表达无显著影响.
关键词： 姜黄素 脂质体 Bel-7402细胞 细胞凋亡 Bcl-2基因家族 -
鲜壁虎水提物联合环磷酰胺对BEL-7402细胞增殖及P-糖蛋白表达的影响
目的:探讨鲜壁虎水提物(aqueous extracts of gecko,AG)与化疗药物环磷酰胺(CTX)联用对人肝癌细胞株BEL-7402增殖的抑制作用,比较两药联用的疗效是否优于单药,并检测两种药物联用对BEL-7402细胞P-糖蛋白(permeability-glycoprotein,P-gp)表达的影响,为二者临床联用提供实验依据.方法:MTT法检测药物对BEL-7402细胞株的增殖抑制作用,通过计算药物联合作用指数(combination index,CI)分析两种药物联用的效应;Western Blot检测两药联用后BEL-7402细胞株P-gp表达的变化,Quantity One软件对结果进行半定量分析.结果:当抑制率达到90％时,0.830或0.996 mg/mL的AG分别与10或5μmol/mL CTX合用显示为低度协同作用;CTX与AG联用后可降低BEL-7402细胞P-gp的表达,当4μmol/mL CTX与1.162 mg/mL的AG联用时抑制率达67.3％.结论:AG与CTX联合后对BEL-7402细胞增殖的抑制作用优于二者单用,显示为低度协同作用;同时能降低细胞P-gp的表达水平,提示AG与CTX联用可能有较好的抗肿瘤效果,并可逆转由P-gP介导的肿瘤细胞耐药的作用.
关键词： 鲜壁虎水提物 环磷酰胺 Bel-7402细胞 P-gp -
膈下逐瘀汤对肝癌Bel-7402细胞增殖的抑制及其机制
目的:观察中药复方膈下逐瘀汤对肝癌Bel-7402细胞增殖的抑制及其相关机制.方法:实验于2005-09/2006-07在南方医科大学细胞生物实验室完成.膈下逐瘀汤(按<医林改错>方组成:五灵脂6 g,当归9 g,川芎6 g,桃仁9 g,丹皮6 g,赤芍6 g,乌药6 g,延胡索3 g,甘草9 g,香附5 g,红花9 g,枳壳5 g.均购自南方医院中药房)经研粉、煮沸、离心、过滤配成质量浓度为25,50,100,200 mg/L的药液;顺铂配制成质量浓度为0.5,1.0,1.5,2.0 mg/L的药液(作为阳性对照),均作用于Bel-7402细胞,并设空白对照(未加任何药物).采用甲基噻唑基四唑(methyl thiazolyltetrazolium,MTT)比色法检测膈下逐瘀汤各组对Bel-7402细胞生长的影响,用酶标仪测定培养细胞在600 nm处吸光度值,并计算细胞抑制率,抑制率(%)=(实验组吸光度值-对照组吸光度值/对照组吸光度值)×100%.用蛋白印迹试验检测不同质量浓度药物作用48,72 h时第10号染色体同源丢失性磷酸酶-张力蛋白基因蛋白的表达水平.结果:①中药复方膈下逐瘀汤对Bel-7402细胞增殖的影响:膈下逐瘀汤对肝癌Bel-7402细胞有明显的生长抑制作用,呈良好的剂量-效应关系.膈下逐瘀汤质量浓度在200 mg/L时其48 h细胞生长抑制率介于0.5 mg/L顺铂组与1.0 mg/L顺铂组之间(分别为41.27%,34.01%,47.49%);膈下逐瘀汤质量浓度在50,25 mg/L时,其细胞抑制率明显低于顺铂组,72 h细胞抑制率结果基本相同.②药物作用肝癌Bel-7402细胞48 h后第10号染色体同源丢失性磷酸酶-张力蛋白基因蛋白的表达:第10号染色体同源丢失性磷酸酶-张力蛋白基因蛋白的表达增多,200 mg/L膈下逐瘀汤组介于0.5 mg/L顺铂组和1.0 mg/L顺铂组之间.结论:中药复方膈下逐瘀汤抑制Bel-7402细胞的增殖机制可能是第10号染色体同源丢失性磷酸酶-张力蛋白基因表达增多的原因.
关键词： 膈下逐瘀汤 Bel-7402细胞 肿瘤抑制蛋白质类
