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铁皮石斛/化学文献资料
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不同产地铁皮石斛形态及有效部位成分含量比较
[目的]比较不同产地铁皮石斛的形态及其有效部位成分,为铁皮石斛资源的开发利用提供科学依据.[方法]对铁皮石斛徒手切片及其粉末进行显微鉴定.多糖成分采用超声提取后分别用紫外分光光度法和高效液相色谱(HPLC)法测定多糖和甘露糖含量.[结果]甘露糖含量在150～250 mg/g之间;广东省新丰、广东省丹霞山、浙江省温州、浙江省义乌的多糖含量达250 mg/g以上.[结论]不同产地的铁皮石斛形态无显著差异,但其主要成分多糖的含量存在差异.
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铁皮石斛互补脱氧核糖核酸表达文库的构建及分析
[目的]构建铁皮石斛互补脱氧核糖核酸(cDNA)表达文库,为克隆石斛活性成分生物合成相关功能基因的全长奠定基础.[方法]以Trizol一步法从4年生的铁皮石斛中提取总RNA,分离纯化mRNA,LD-PCR(long distance polymerase chain reaction)法反转录合成双链cDNA,以λTripIEX2为载体,构建铁皮石斛cDNA文库,文库滴度以每mL含噬菌斑形成单位(pfu)的数目来表示,PCR扩增鉴定插入片段.[结果]成功地构建了铁皮石斛cDNA表达文库,原始文库的噬菌斑滴度为4.3×105 pfu/mL,总克隆数为3.1×105,重组率为97.6%,扩增后文库总滴度为6.8×109pfu/mL,对随机挑取的噬菌斑进行PCR鉴定,结果插入片段多分布在0.5～2.0kb之间,绝大部分在1.2～1.7kb左右.[结论]文库质量鉴定结果表明,所构建的铁皮石斛cDNA文库具有较好的库容量、较高的重组率以及较大的插入片段.
