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光化学法病毒灭活的模型病毒培养与滴定方法的建立
目的建立Sindbis和伪狂犬病毒的培养与滴定方法.方法以Vero细胞为病毒传代及滴度滴定指示细胞,Karher氏法计算滴定结果.结果 Sindbis病毒感染的Vero细胞以圆缩、脱落为主;伪狂犬病毒感染的Vero细胞以变圆、形成折光性强的合胞体为主,病变细胞晚期脱落.Sindbis病毒第一次滴定TCID50＞11,第二次滴度TCID50为9.5;伪狂犬病毒第一次滴定TCID50＞11,第二次滴定TCID50为7.2.结论 Vero细胞对两种模型病毒均较敏感,适合用于此两种病毒的培养与滴定.该方法的建立为光化学法灭活血小板中病毒的研究奠定基础.
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丙型肝炎病毒样颗粒作为亚甲蓝光化学法灭活HCV效果评价物的可行性研究
目的 探讨丙型肝炎病毒样颗粒(HCVLPs)在亚甲蓝光化学灭活处理过程中的变化趋势及其作为亚甲蓝光化学法灭活HCV效果评价物的可行性.方法 以HCV阳性血浆作为平行对照组(HCV RNA载量约6.53 logcopies/mL)(n=6),将HCVLPs用代血浆调整成合适浓度(HCV RNA定量约为6.74 logcopies/mL)的悬液作为实验组(n=5),将2组分装至PVC血袋中,MB+L 1μmol/L进行病毒灭活处理,分别于光照处理0、5、10、20、30 min时取样,用荧光定量PCR技术检测病毒核酸载量;同时以细胞病变法测定HCV模型病毒sindbis病毒的残余滴度,验证MB+L灭活HCV的效果.结果 模型病毒sindbis的病毒滴度降至检测限以下(logTCID50/mL≤0.5);MB +L处理过程中,随着光照处理时间的增加,HCV及HCVLPs的核酸载量明显下降,分别从6.53与6.74下降至4.51和2.89log copies/mL(P＜0.05),且2组在不同取样点的HCV RNA载量之间具有相关性(R2 ＞0.98,Significance F＜0.01).结论 HCVLPs能够反映MB+L灭活处理中HCV RNA动态变化,或有望成为安全而有效的HCV灭活评价物来监控HCV灭活效果.
