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探讨氢氧化钠溶液冲洗全自动加样针对酶免实验的影响
[目的]解决TECAN全自动酰免设备的加样系统在加样时出现的拖尾现象,防止出现假阳性结果.[方法]用全自动加样系统RSP加样,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测,在标本加样过程中采用不同质量分数的氢氧化钠(NaOH)溶液对加样针及管道进行冲洗,并设蒸馏水对照.对各组检测数据进行比较,并作方差分析.[结果]5组数据间比较,方差分析结果为F＞F0.01(4.36),故P＜0.01,5组间存在着差异;4组间比较,分析结果为F＞0.01(3.28),故P＜0.01,4间亦存在差异;前3组间比较,方差分析结果为F＜0.01(221),故P＞0.01,前3组间差异无显著性.[结论](1)质量分数超过2.0%的NaOH溶液冲洗加样针及管道对实验结果会产生影响;(2)用质量分数为1%的NaOH溶液冲洗既可解决拖尾现象,又对实验不会造成影响,可避免假阴性结果;(3)NaOH溶液质量分数过高,也会产生假阴性结果,必须控制范围.
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酶标仪在加样仪中比对、性能确认的运用
目的 建立全自动加样仪仪器的比对、性能确认的可靠、简易方法.方法 利用酶标仪比色方法对全自动加样仪进行仪器的比对、性能确认,以期对全自动加样仪状态进行定期或时时监控,以避免加样过程的漏加而引起非试剂因素的漏检.结果 不同的全自动加样仪不同加样量的吸光度均值经过调液体曲线校正后,加样仪1与加样仪2加样结果较为接近.结论 避免酶联检测中因仪器因素所引发的漏检,提高设备运行效率,减少非预期的风险.
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全自动加样仪的应用
随着人们对安全输血问题的日益重视,采供血机构的质量保证工作已成为其关注焦点,全面质量管理的理念使血液的质量保证已不局限于对其终的检查,而依赖于对生产过程的每一个环节加以控制.自动化设备如全自动加样仪解决了大量标本加样和数据传输的问题,通过实验室管理系统软件与其他检测设备连接,终与局域网联网,使操作过程标准化、规范化,大大减轻了工作人员的工作强度、降低职业暴露的机会并减少了人为误差,提高了实验室检测的准确度和特异性,有效的保证血液检测质量.笔者根据实际工作经验并参照有关文献,从全自动加样仪的概况、发展、应用等方面加以综述.
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梅毒螺旋体颗粒凝集试验自动化检测方法建立
多年以来,梅毒螺旋体颗粒凝集试验(treponema pallidum particle agglutinaion Assay,TPPA)一直采用手工倍比稀释加样,肉眼判读结果的方式进行检测,未能实现自动化检测.笔者尝试采用全自动加样仪Xantus和340rt酶标仪,替代TPPA手工操作和肉眼判读结果的方式,建立TPPA的自动化检测方法,取得较好效果,报告如下.
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全自动加样仪参数设置的探讨
目的:探讨AT plus 2全自动加样仪程序参数设置,提高加样的准确性,确保检测结果准确、有效.方法:编制程序参数时,通过对加样先后顺序、加样针高度设置及洗针擦针的次数、深度等环节进行对比,观察加样结果.结果:不同的加样先后顺序、加样针高度设置及洗针擦针的次数、深度对加样结果影响大.结论:对全自动加样参数模式的优化设置,可提高检测结果准确性.
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全自动加样仪加样监控及样本漏加的预防
建立全自动加样仪漏加样本的判别方法及漏加样本的预防措施,对于提高检测质量具有重要意义.本文利用酶标仪对全自动加样仪加样结果进行监控,并对全自动加样漏加原因进行初步分析,以期避免因加样过程的漏加而引起非试剂因素的血液筛查的漏检.现报告如下.
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HBsAb阳性对酶标法HBsAg检测的影响
目的 探讨乙型肝炎表面抗原(HBsAg)假阴性的产生及预防方法.方法 应用全自动加样仪(ML-AT plusSampler),使加样针在不同的清洗次数下,同时加样12份含不同浓度HBsAb标本和12份含不同浓度HBsAg不同OD值标本,分别应用ELISA二步法检测HBsAg,观察其吸光度的变化.结果12份含HBsAg标本在清洗次数逐渐减少的情况下,OD值都有不同程度的下降.HBsAb强阳性标本对OD值影响很大,在只清洗3次的情况下,HBsAg弱阳性标本开始出现假阴性;在不洗涤也不擦拭的情况下,4份HBsAg弱阳性出现假阴性.结论高浓度的乙型肝炎表面抗体会引起HBsAg检测结果假阴性;使用一次性加样枪头,可避免假阴性.
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STAR超细加样尖在抗-HCV ELISA检测中的应用
目的 探讨分析STAR超细加样尖(300 μl SLIM Tips)在抗-HCV ELISA检测中加样的可靠性.方法 全自动加样器利用STAR SLIM超细加样尖吸取混合血浆10 μl,称重并计算精密度和偏差范围;分配1 NCU/ml抗-HCV血清1份为16孔(A组),用正常样本血浆倍比稀释1 NCU/ml抗-HCV血清为1∶2、1∶4及1∶8各1份并均分配为16孔(A1～A3组);1份抗-HCV可疑样本分配为16孔(B组)及1份抗-HCV阴性样本分配为8孔(C组),然后用FAME 24/20全自动酶免分析仪进行检测并分析.结果 加样的精密度和偏倚范围均可满足检测要求,所有样本符合率100％,重复性和均一性满足试验要求.结论 STAR全自动加样仪可以使用300μl超细加样尖进行抗-HCV ELISA检测.
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全自动加样仪STAR加样参数的选择
目的 解决全自动加样仪STAR加样存在的不足,优化选择加样参数.方法 采用正交试验选择加样参数,同时对液体校正曲线进行调整.结果 优化前仪器分配10 μl及100 μl血浆时,CV的范围分别为1.1%～2.2%、O.8%～1.2%,偏离范围分别为8.0%～12.7%、2.7%～6.0%;优化后CV的范围分别为0.9%～1.7%、0.4%～0.8%,偏离范围分别为0.4%～6.5%、0.1%～1.9%.结论 优化后加样的精密度和偏离范围均可满足实验要求.
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1例全自动加样仪引起抗HIV拖带阳性分析
我们在本院输血患者输血前经血感染性疾病筛查抗HIV时,发现1份抗HIV抗体强阳性样本,由于仪器混合时振荡幅度太大,使血液溅出和永久性加样针的拖带,导致污染了邻近1个孔位和另2份相同加样针加样的样本,造成假阳性.现将本例的发现和分析情况报道如下.
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不同容量规格一次性加样针对抗-HCV酶联免疫吸附实验的影响
目的 评估帝肯Freedom EVO 150全自动加样仪使用1 000与200 μL两种不同容量规格的一次性加样针对抗-HCV酶联免疫吸附实验的影响.方法 选1份抗-HCV弱阳性标本和稀释后血清标准物质作为待检样本,用两种酶免试剂在全自动加样仪上使用不同规格的一次性加样针进行加样检测,并对检测结果进行灵敏度、孔间精密度和符合性对比分析.结果 应用200与1 000 μL两种不同容量规格一次性加样针加样后,在两种抗-HCV酶免试剂检测各孔间S/CO值统计结果CV值差异有统计学意义(P<0.05).结论 应用全自动加样仪进行加样时,应选用满足微量样本移取精度要求的一次性加样针,避免因使用不当容量规格的一次性加样针而导致血液检测质量事故的发生.
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小型血站实验室设备性能比对方法探讨
目的 探讨小型血站血液检测实验室设备性能比对的方法.方法 比较2台不同型号的全自动加样仪、2台同系列全自动酶免后处理系统检测性能的一致性:使用4种ELISA检测试剂,分别检测HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、梅毒定值质控品和20份常规献血者标本,应用x2检验和Kappa检验,比较上述2组设备检测结果的一致性.结果 1)2台全自动加样仪抗-HCV、抗-HIV定性检测加样的一致性较好.2)2台同系列全自动酶免后处理系统,4种试剂一致性均为100％ (40/40),经x2检验一致性无统计学差异(P＞0.05).结论 小型血站实验室可以通过对定值质控品,和常规献血者标本的检测结果进行处理分析,比对酶免检测设备之间的性能是否一致.
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全自动加样仪与全自动酶免仪的2个关键点监控
按照<血站实验室质量管理规范>第6.3条对仪器、设备要持续监控的要求,我们根据本站实际,对实验室RSP150全自动加样仪与BEPⅢ全自动酶免仪运行过程中2个关键控制点进行持续监控.
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应用全自动加样仪留取血样的探讨
近年来,由输血引发的医疗纠纷呈上升趋势,采供血机构如何保存献血者的原始资料以备日后查询就显得尤为重要.卫生部规定血站所采集血源的原始记录必须保存10年,血液检验(复检)的全血标本保存期应在全血有效期内,血清或血浆标本的保存期应在全血有效期满后半年.
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扫描枪在全自动加样仪中的应用
由于全自动加样仪扫描器具有快速移动中扫描条码,扫描点固定,扫描距离固定的特点,有时会出现样本的条码由于过分倾斜、高度不足、打印不清晰、有划痕等使扫描器判读不出来.
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全自动酶标加样仪的携带污染分析
目的 分析全自动加样仪携带污染对酶联免疫吸附法检测结果的影响.方法 采用标本复测和几种试剂的比较,分析全自动加样仪携带污染对标本结果的影响.结果 以HIV检测为例,使用全自动加样仪时强阳性标本产生的携带污染连续污染了后续的3个标本;增加一次碱洗程序,可以消除这种现象.结论 全自动加样仪产生的携带污染,影响后续标本检测结果的准确性.增加一次碱洗程序,可以消除携带污染.
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全自动加样仪酶标仪微量酸碱法检测献血员血红蛋白
目的:寻找检测献血员血红蛋白的新方法.方法:在酸碱法的基础上采用全自动加样仪酶标仪微量法检测血红蛋白,并将HICN血红蛋白标准品碱化后测吸收光谱,绘制标准曲线.结果:酸碱法样本及HICN标准品碱化后吸收光谱一致,标准曲线线性好.结论:全自动加样仪酶标仪微量酸碱法检测献血员血红蛋白使操作实现微量化、批量化、自动化,简单、快速.HICN标准品碱化后可用于酸碱法中标准品.
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RSP 全自动加样器改造后一次性加样针的选择及加样过程的优化
目的：评估帝肯 RSP150全自动加样仪上针系统改造后使用1000、200、20μl 三种不同容量规格的一次性加样针，在不同工作模式下对 Anti －HCV 酶联免疫吸附实验的影响。方法利用万分之一的分析天平采用重量法对3种规格加样针，在不同模式下的加样情况进行校验，并对检测结果进行精密度对比分析。结果20、200μl 两种一次性加样针在单吸单分模式下，RSP 8根针测试蒸馏水10 mg（10p1）的 CV ＜3％，均通过精密度试验测试；1000μl 单吸单分模式和200与1000μl 一吸多分模式的 CV ＞3．0％，8根针精密度都没有通过测试。结论应用全自动加样仪进行微量加样时，应选用满足微量样本移取精度需要的一次性加样针，并采用合适的加样模式，避免因使用不当容量规格的一次性加样针而导致血液检测质量事故的发生。
