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供精精液冻存时间对人工受精结局及子代出生缺陷的影响
目的:探讨精液冻存时间对供精人工受精(AID)结局及子代出生缺陷的影响.方法:回顾性分析2007年4月～ 2013年4月在本生殖中心实施AID助孕治疗的6038例妇女共14 290个AID周期的临床资料,分析供精精液冻存0.5～1年、＞1～3年、＞3～5年、＞5～7年、＞7～ 10年对AID妊娠率、流产率、子代出生缺陷率的影响.结果:供精精液不同冻存时间的妊娠率、流产率未见统计学差异(P＞0.05);子代出生缺陷发生率为1.33％,不同冻存时间子代出生缺陷率未见统计学差异(P＞0.05).结论:供精精液冻存0.5～ 10年,并不影响AID的临床妊娠率、流产率和子代出生缺陷率,用于人工受精安全有效,能获得类似自然妊娠的效果.
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137例单份非亲缘脐血造血干细胞移植患者的临床研究
目的 分析单份非亲缘脐血造血干细胞移植(sUCBT)的预后影响因素及脐血深低温冻存时间长短与细胞活力、移植预后的相关性.方法 回顾性研究2007年3月15日至2013年12月26日使用上海脐血库提供的脐血进行sUCBT的来自28家医院的137例患者,脐血平均冻存时间为698(96～1 968)d,复苏后细胞活力平均为87.4％.结果 脐血冻存2年以下及2年以上两组患者,细胞活力及患者的造血重建天数、植入失败率、急性移植物抗宿主病(GVHD)发生率及总体生存(OS)率差异均无统计学意义,两组5年OS率分别为55.6％和67.9％ (P=0.124).2011年以后移植的患者OS率显著高于2011年及以前移植的患者(79.6％对48.7％,P=0.001).多因素分析中,年龄＞16岁(RR=2.830,P=0.027)及2011年及以前移植(RR=0.203,P＜0.001)是治疗相关死亡的危险因素.结论 近两年sUCBT预后明显改善,脐血复苏后细胞活力、移植临床预后与脐血冻存时间长短无关.
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姐妹染色单体差别染色效果相关因素的研究与改进
目的 探讨影响姐妹染色单体差别染色效果的因素,明确作为课堂实验教学项目的可行性. 方法 用常规外周血淋巴细胞培养、染色体制备技术制备染色体标本片,细胞培养过程中分别加入新配制和-20℃保存10年的BrdU溶液.标本制备后分别取新鲜(1d龄)和-20℃冻存1,2,3,4,5周龄的染色体片用紫外线照射,照射条件为50,56,60℃三种温度,10,20,30 min三个时间,然后Giemsa染色10 min.根据姐妹染色单体着色效果与色差评价各因素对差别染色的影响. 结果 在-20℃冻存10年的BrdU与新鲜配制的BrdU掺入DNA后的染色效果无显著差异,终浓度以10 μg/ml为佳.新制备和-20℃保存1-5周的染色体标本片,在50-60℃的片温范围内,紫外照射10-30 min均获得良好的差别染色效果. 结论 BrdU溶液在-20℃长期冻存不影响DNA掺入效果；姐妹染色单体差别染色对相关因素容差性较强,改进后作为课内教学实验项目具有很好的可行性.
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不同贮存温度和不同贮存时间冷沉淀凝血因子Ⅷ含量及合格率变化分析
目的 比较冷沉淀在不同保存温度和不同保存时间凝血因子Ⅷ含量及合格率变化情况,探讨影响变化的原因.方法 选择2016年1月1日至2016年3月30日我站制备1U冷沉淀80袋,分成两组各40袋,分别于-80℃SANYO冰箱和-30℃海尔冰箱贮存90、180、270、360 d后测量冷沉淀凝血因子Ⅷ含量并计算合格率.结果 在不考虑冻存温度差异的情况下,不同冻存时间因素主效应存在差异:F=3.50 P＜0.05,保存时间为90、180、2 70、360 d的冷沉淀凝血因子Ⅷ平均含量分别96.67、91.75、89.88、84.69 IU/袋,即随保存时间的延长,相应的凝血因子Ⅷ平均含量下降,但不同保存时间其凝血因子Ⅷ含量合格率不存在差异,F=9.28 P＞0.05.在不考虑冻存时间差异的情况下,不同冻存温度因素主效应是存在着差异:F=4.43 P＜0.05,在-80℃和-30℃保存冷沉淀的凝血因子Ⅷ平均含量分别为93.77 IU/袋和88.03 IU/袋,相差5.74 IU/袋,且在-80℃和-30℃冻存冷沉淀凝血因子Ⅷ含量合格率分别为87.5％和82.5％,存在差异,F=15.00 P＜0.05.不同冻存温度和不同冻存时间不存在交互作用,F=0.50 P＞0.05,即在不同温度和不同保存时间两因素作用下冷沉淀凝血因子Ⅷ平均含量下降的速率不存在差异.结论 随冻存时间的延长,冷沉淀凝血因子Ⅷ平均含量会下降.保存温度的变化对冷沉淀凝血因子Ⅷ的影响更为主要更为直接,因此如果是保存时间超过180 d冷沉淀,好能超低温保存,才能更好地保证冷沉淀质量.
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人成纤维样滑膜细胞冻存时间对其活性的影响
目的 探讨适合人成纤维样滑膜细胞(FLS)低温冷藏保存的佳冻存时间.方法 将FLS经-80℃冰箱冷冻保存.在冷冻后2、3、4、5 wk分别复苏,培养.观察FLS的生长情况和细胞存活率及24 h贴壁率.结果冻存5 wk的FLS细胞存活率(66±1.3)%,较冻存2 wk(90±2.0)%有明显下降;冻存5 wk的FLS 24 h贴壁率(61.3±2)%,与冻存2 wk(85.9±3)%比较有明显下降;未冻存和冻存2 wk复苏后FLS的增殖能力无明显差异.结论 FLS可以进行低温冷冻,冻存时间4 wk为宜.
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不同冻存时间对兔角膜内皮细胞活性的影响
目的 探讨适合角膜内皮细胞(corneal endothelial cell,CEC)超低温冷藏保存的佳期限.方法 将CEC经-196 ℃液氮冷冻保存.在冷冻后1、6、12、24个月分别复苏,培养.观察CEC的生长情况和细胞存活率及24 h贴壁率.结果 冻存1、6、12个月复苏的CEC细胞存活率均≥80.0%,冻存24个月的CEC细胞存活率(72.0%)较前三个时间段稍有下降但没有差异;冻存1、6、12个月CEC 24 h贴壁率均≥72.5%,此三个时间段比较没有明显差异,冻存24个月CEC 24 h贴壁率(59.2%)与前三个时间段比较有统计学差异(P＜0.05).结论 在供体来源短缺,细胞需要长期保存的情况下,深度冷藏是保存CEC的一种较好的方法.
