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THP-1细胞中p2x7R对ISG20的调节作用
目的 探讨脂多糖诱导的THP-1源性巨噬细胞中,嘌呤能受体2x7 (p2x7R)对IFN-α诱导干扰素刺激基因20(ISG20)的影响及其可能的机制.方法 THP-1源性巨噬细胞经LPS诱导4h后分别加入p2x7R非特异性抑制剂苏拉明(Suramin)、磷酸吡哆醛(PPADS),p2x7R特异性抑制剂oxidized ATP(O-ATP)、亮蓝G(BBG)、以及p2x7R特异性激动剂苯甲酰苯甲酸ATP(BzATP)作用1h后,联合IFN-α培养24 h.监测细胞内ISG20 mRNA、蛋白的表达差异及上清液中IL-1β的含量.BzATP组中,观察不同浓度BzATP以及caspase-1抑制剂预处理1h后BzATP、IFN-α对ISG20的调节作用.结果 RT-PCR及Western blot结果显示,p2x受体广谱抑制剂与p2x7R的特异性抑制剂具有抑制IFN-α对ISG20的诱导作用,IFN-α联用抑制剂组与IFN-α联用激动剂BzATP组中ISG20 mRNA较IFN-α组差异有统计学意义(P<0.05).浓度梯度实验中,上清液中IL-1β的含量在加入BzATP、BBG后发生改变.另外,BzATP直接诱导的ISG20可被caspase-1抑制剂抑制,上清液中IL-1β同样受到抑制.结论 在THP-1细胞中,BzATP对ISG20的诱导作用不同于IFN-α途径直接诱导ISG20的生成.这为将来探索新的抗病毒治疗提供了新的思路.