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核黄素光化学作用灭活大肠杆菌的研究
目的 研究核黄素光化学反应对细菌的灭活作用,探讨分析核黄素光化学灭活病原体的机理.方法 将含有细菌的培养液4.950 ml注入5 ml血袋中,再加入10 mmol/L的核黄素溶液50μl使其终浓度为100 μmol/L,将血袋置控温光照仪中接受400-500 nm波段可见光双侧照射[剂量(8.0-32.0)J/cm~2],照射时温度为(4±2)℃;照射后标本通过细菌培养,透射电镜影像、核酸检测(LacZ基因片段)等方法观察核黄素光化学作用灭活大肠杆菌的效果.结果 400-500 nm可见光激发的核黄素光化学作用可以有效灭活大肠杆菌达6 log;透射电镜影像示经核黄素光化学处理的大肠杆菌其拟核所在区域出现多个空泡;PCR显示经核黄素光化学处理的大肠杆菌其LacZ基因片段的复制被完全阻止.结论 可见光激发的核黄素光化学作用可以有效灭活大肠杆菌,核酸是核黄素光化学产生病原体灭活作用的主要靶点.
