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男性生殖相关基因功能研究策略
男性不育是较为常见的病症,约4%的男性受到不育的困扰.男性原发性不育与男性生殖相关基因的缺陷有密切关系.近年来,国内外发表了大量文献展示了新发现的与男性生殖相关的基因.刘美玲等[1]在采用抑制性消减杂交技术(SSH)筛选大鼠精原细胞与精母细胞差异表达基因过程中,发现了大鼠睾丸特异表达基因LM23基因.沙家豪所在的重点实验室运用人胚胎和成人睾丸cDNA探针与人睾丸dDNA微阵列杂交,通过差异杂交的克隆进行序列测定和分析,筛选
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正常脾脏与肝硬化脾脏组织基因表达概况分析
目的了解正常脾脏与肝硬化脾脏的基因表达概况,寻找在两者之间的差异表达基因. 方法以正常脾脏及肝硬化脾脏组织的总RNA反转录合成含有α-32P dATP的cDNA 为探针,与Atlas微阵列表达分析膜进行差异杂交.结果放射自显影结果经AtlasImageTM软件分析显示:在所分析的588种已知基因中,CK8、ICE-LAP6、PISSLARE等32个在肝硬化脾脏组织中表达上调,byglycan、Caspase-10、CRAF-1等45个表达下调,参与细胞增殖、凋亡、分化、细胞间相互作用,与细胞侵袭相关的基因表达水平发生了明显改变.结论通过Atlas微阵列系统分析发现的这些基因的表达改变组成了一个不同情况下脾脏特异的基因表达谱,是人类首次全面系统地研究脾脏的基因表达改变,一些与脾脏变化有关的差异表达基因,对彻底了解脾脏在肝硬化过程中的变化及其所发挥的作用有重要的意义.Atlas微阵列技术的应用将为人类了解疾病的发生、发展过程提供一个较好的方法.
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微阵列分析肝癌组织中的整合素
目的了解肝癌中整合素的表达概况,探寻在肝癌及正常肝组织中的表达差异.方法以肝癌及癌旁正常肝组织的总RNA反转录合成含有α-32P dATP的cDNA为探针,与Atlas微阵列表达分析膜进行差异杂交,并应用半定量RT-PCR验证.结果放射自显影结果经AtlasImageTM软件分析显示:在所分析的588种已知基因中,整合素相关的基因共有17个,其中integrin alpha8、betal、beta7、beta8等4个在肝癌组织中表达上调.结论通过Atlas微阵列系统分析发现的这些基因的表达改变组成了一个肝癌特异的基因表达谱,是人类首次全面系统地研究肝癌的基因表达改变,整合素基因的差异表达为研究肝癌的侵袭、粘连和转移机制提供了有益的线索.
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肿瘤抑制基因nm23在泌尿生殖系肿瘤中的研究进展
肿瘤转移是肿瘤恶性的标志,是肿瘤患者死亡的主要原因.肿瘤的转移受自身的转移基因和转移抑制基因的调控[1].目前已发现的肿瘤转移抑制基因有:组织相容抗原、WDNMI、nm23、p53、金属蛋白酶组织抑制剂(TIMP)等,其中研究多和被认为有前途的是nm23.Nm23基因是Steeg等[2]于1988年通过差异杂交的方法从具有较高转移潜能的小鼠黑色素瘤细胞株K-1735中发现的.随后,许多学者对人体乳腺癌、肝癌、直肠癌、泌尿生殖系肿瘤等多种肿瘤中的nm23进行了广泛深入的研究,并且有研究结果显示nm23的表达与多数肿瘤的转移呈负相关[3,4].本文就nm23基因在泌尿生殖系肿瘤中的研究进展综述如下.