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用免疫生物传感器快速检测金黄色葡萄球菌的初步研究
目的 研究快速、经济、高灵敏的金黄色葡萄球菌新型检测技术.方法 本研究应用F0F1-ATP酶旋转分子马达和免疫技术相结合,建立金黄色葡萄球菌的免疫生物传感器快速检测技术.首先pH变化敏感的荧光物质F1300标记到F0F1-ATP酶的栽体色素体的内表面,然后在F0F1-ATP酶上连接β亚基抗体-生物素-链亲和素-生物素-金葡菌抗体复合体,得到可以捕获金黄色葡萄球菌的免疫生物传感器.传感器上负载菌量不同,引起的酶活性变化不同,酶活性变化又引起色素体内pH变化,后通过F1300的荧光强度变化来检测菌量.结果 该方法时金黄色葡萄球菌标准菌株(CMCC26003)的检测时间为4.5 h,102~104CFU/孔呈现良好的梯度关系.结论 该技术耗时短、操作简单、成本低、灵敏度高,符合食品安全检测技术发展要求.
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TRAIL受体微阵列生物传感器检测系统的初步应用
目的:肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TNF-related Apoptosis-induced Ligand,TRAIL)受体微阵列生物传感器检测系统为离子敏场效应型(Ion sensitive field effect transistor,ISFET)免疫生物传感器,利用此检测系统检测细胞表面的TRAIL受体.方法:将1:10稀释的4种TRAIL受体的抗体吸附在此型免疫生物传感器上,对正常血管内皮细胞株EVC9611、肺癌细胞株AS49-DDP、舌癌细胞株Tca8113以及白血病人来源的白细胞进行检测.结果:这种微阵列传感器检测系统可以同时检测细胞表面的4种TRAIL受体,并发现正常血管内皮细胞株EVC9611和舌癌细胞株Tca8113的细胞表面没有4种TRAIL受体的表达,而肺癌细胞株AS49-DDP细胞表面的TRAIL R2表达较多,白血病人来源的白细胞4种受体都有表达.结论:研制的TRAIL受体微阵列生物传感器检测系统可以有效地同时检测各种细胞表面的4种TRAIL受体,为进一步使用TRAIL治疗肿瘤提供基础资料.
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检测克伦特罗的免疫生物传感器的研制
目的:探索检测饲料和动物性产品中克伦特罗等违禁激素类药物快速、灵敏、方便的检测方法.方法:采用自行研制的免疫生物传感器对克伦特罗进行检测.结果:仪器的稳定性、重现性良好,检出限可达0.1 μg/L,准确度达97%,检测时间在20 min以内,检测成本每个样品约2元.结论:免疫生物传感器体积小、灵敏度高、携带方便、操作简单,完全能满足现场检测的需要.
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尿胰蛋白酶原-2电流型免疫生物传感器的研究
目的:研制一种检测尿胰蛋白酶原-2 (Urinary Trypsinogen-2,TSG-Ⅱ)的新型电流型免疫生物传感器.方法:将Nafion吸附到玻碳电极表面,并通过静电吸附和共价键合作用将硫堇和纳米金进行层层自组装,然后通过形成的纳米金单层吸附TSG-Ⅱ抗体,后用辣根过氧化物酶封闭电极上的非特异吸附位点.结果:该免疫生物传感器对TSG-Ⅱ的响应特性良好,其线性检测范围为6.0~100μg/L;检出限为3.5μg/L.结论:该电流型免疫生物传感器具有灵敏度高、特异性好等优点,为建立一种检测TSG-Ⅱ新方法奠定了基础.
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微囊藻毒素免疫检测技术研究进展
微囊藻毒素主要是由蓝绿藻属产生的的一类毒素,其毒性主要表现在特异性抑制细胞内的蛋白磷酸酶(PP1和PP2A).目前有关微囊藻毒素分析和检测的研究开展得十分广泛,免疫检测技术由于其众多的优点更显示出其良好的应用前景.本文详细地综述了目前国内外在微囊藻毒素免疫检测方面的研究方法和成果;并在总结这些研究的基础上,展望了微囊藻毒素免疫检测技术的发展方向.