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皮肤成纤维细胞纤维连接蛋白及其EDA、EDB表达与损伤时间的关系
目的 研究培养的皮肤成纤维细胞纤维连接蛋白(fibronectin,FN)及其可变剪接片段EDA、EDB在损伤后的mRNA水平,为推断早期损伤时间提供参考指标.方法 培养人体皮肤成纤维细胞,换无血清培养液培养24 h后,采用划痕法制作细胞损伤模型,损伤后0、0.5、1、2、6、24 h收集细胞,抽提RNA,实时RT-PCR定量检测总FN及其EDA、EDB的mRNA水平的变化.结果 皮肤成纤维细胞中总FN及其EDA、EDB的mRNA水平随损伤时间的延长而升高.EDAmRNA在损伤后1h达到高峰,EDBmRNA在损伤后6h达到高峰,FNmRNA在损伤后2h达到高峰;在损伤1h后总FN及其EDA、EDB的mRNA表达变化随时间的延长而呈现一种不断上升的趋势.结论 纤维连接蛋白EDA、EDB可作为早期损伤时间推断的较理想的参考指标.
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人体皮肤切创纤维连接蛋白EDA、EDB的表达与损伤时间关系的研究
目的研究纤维连接蛋白(fibronectin,FN)可变剪接片段EDA、EDB在人体皮肤切创的表达情况,并摸索EDA、EDB mRNA在离体皮肤上长检出时限,以期为早期损伤时间的推断提供实用的参考指标.方法采用DIG标记的反意RNA探针,原位杂交检测人体皮肤在损伤早期(从30min开始)FN EDA、EDB mRNA表达的变化.结果正常人体皮肤无EDA、EDB mRNA表达;在损伤早期(≤3h)FN EDA、EDB的表达随时间的延长而呈现一种不断上升的趋势;EDA、EDB mRNA主要出现在表皮基底层细胞;EDA、EDB mRNA在标本离体后4h就不能检测到.结论FN EDA、EDB可作为早期损伤时间推断的较理想的参考指标,但原位杂交的检测方法不适用于实际应用.