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一步法RT-PCR检测急性早幼粒细胞白血病PML-RARα融合基因
目的:建立一步法RT-PCR检测APL患者PML-RARα融合基因的实验方法.方法:用特异引物一步法RT-PCR检测PML-RARα融合基因,并作灵敏度试验.结果:本方法的灵敏度可达到1∶103水平.对25例APL患者检测PML-RARα融合基因,阳性率为100%,并可检测出PML-RARα融合基因各种融合方式.结论:一步法RT-PCR检测PML-RARα融合基因有很好的灵敏度和特异性,操作简便、快速,特别适用于临床检测.
关键词： 急性早幼粒细胞白血病 PML-RARα融合基因 聚合酶链反应 -
一步法RT-PCR检测急性早幼粒细胞白血病PML-RARα融合基因
目的 建立一步法RT-PCR检测急性平幼粒细胞白血病(acute promyelocytic leukemia,APL)患者PML-RARα融合基因的实验方法并作相关性能评价.方法 设计两对特异性引物,用一步法RT-PCR法检测APL患者PML-RARα融合基因的三种异构体,并用NB4阳性细胞株做稀释试验,得出该方法 的低检测限;同时对2006年以来华西医院确诊APL患者的PML-RARα融合基因检测和骨硅细胞形态学检查结果进行比较.结果 一步法RT-PCR法检测PML-RARa 融合基因的灵敏度可迭10-4水平;使用两对引物同时扩增,可检出PML-RARα融合基因全部三种异构体;62例经临床和骨髓形态学确诊为APL的患者,其PML-RARα融合基因阳性率为100%.结论 一步法RT-PCR检测APL患者PML-RARα融合基因有很好的灵敏度,临床符合度较高且操作简便快速,样本交叉污染可能性小,临床实用性较高.
关键词： 聚合酶链反应 PML-RARα融合基因 急性白血病 早幼粒细胞 -
全反式维甲酸与化疗交替治疗急性早幼粒细胞白血病的长期随访研究
目的:观察全反式维甲酸(ATRA)与化疗交替治疗急性早幼粒细胞白血病(APL)的长期疗效.方法:对17例经ATRA治疗取得完全缓解(CR)的APL患者,采用ATRA与化疗交替方案进行治疗.在治疗6个月以后,采用血细胞短期培养G显带技术进行染色体核型分析,RT-PCR技术检测PML-RARα融合基因,流式细胞术(FCM)检测CD+13CDdim 45 细胞和CD+33 CDdim 45细胞,监测t(15;17)染色体异位、PML-RARα融合基因以及CD+13 CDdim45 细胞和CD+33 CDdim 45细胞变化情况.结果:随访15个月～70个月(中位数36个月),白血病复发3例,复发率17.65%,总生存率(OS)94.12%,t(15;17)染色体异位、PML-RARα融合基因和FCM检测MRD转阴率分别为23.53%、29.41%和23.53%.结论:APLCR后采用ATRA与化疗交替治疗,可以较好地减少或消除APL患者体内的残存白血病细胞,减少白血病的复发率,延长患者的生存期,提高APL的临床治愈率.
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急性早幼粒细胞白血病两种PML-RARα融合基因亚型的临床研究
目的 探讨急性早幼粒细胞自血病(APL)PML-RARα融合基因亚型及其临床关系.方法 采用巢式反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测92例初诊APL患者PML-RARα融合基因不同转录本,根据结果 分为长型(L型)和短型(S型)两组,比较两组间的临床特征、治疗反应及预后.结果 92例APL患者PML-RARα融合基因均为阳性,L型52例,占56.5%,S型40例,占43.5%;两组相比,患者性别、年龄、治疗前的白细胞计数、骨髓原始早幼粒细胞比例及染色体无明显差异;诱导治疗的完全缓解(CR)率、达CR的时间、维甲酸综合征(RAS)、弥漫性血管内凝血(DIC)、颅内出血的发生差异无统计学意义;两组缓解后总体生存率(OS)及无复发生存率(RFS)亦差异无统计学意义.结论 APL患者PML-RARα融合基因亚型与临床疗效、预后无关.
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PML-RARα融合基因监测急性早幼粒细胞白血病微小残留病
目的 观察PML-RARα融合基因在监测急性早幼粒细胞白血病(APL)微小残留病(MRD)中的临床意义.方法 诱导缓解及巩固维持治疗期间,采用筑巢式反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测患者骨髓细胞中PML-RARα融合基因的动态变化、PML-RARα融合基因.结果 长期随访的18例完全缓解(CR)患者,2例出现分子学复发.其中1例发生于CR1后4个月,诱导缓解治疗后获得CR2,CR2后2个月再次出现分子学与血液学的复发,诱导治疗1个疗程获得CR3;1例发生于CR1后74个月,诱导缓解治疗后获得CR2,随访结束时生存期已达106个月.结论 在CR期定期监测PML-RARα融合基因,可早期发现分子学复发,及时干预治疗可避免血液学复发.
关键词： 急性早幼粒细胞白血病 PML-RARα融合基因 微小残留病 -
以亚砷酸为主方案治疗急性早幼粒细胞白血病的分子生物学疗效
目的 观察以亚砷酸(ATO)为主的方案治疗初治急性早幼粒细胞白血病(APL)的细胞学及分子生物学疗效.方法 56例APL患者均经骨髓细胞形态学检查、组织化学检查、免疫表型测定以及FISH法和实时定量PCR法检测PML/RARα融合基因而确诊.诱导化疗方案采用ATO 10mg/d,静脉滴注,直至获得完全缓解.缓解后采用ATO与化疗交替治疗,以ATO为主.对20例患者的PML/RARα融合基因进行动态观察.结果 56例PML-RARα融合基因阳性的初治APL患者完全缓解率98.2%,CR中位时间32(23～42)d.实时定量RT-PCR检测阳性的32例患者中位随访期3年,总生存率100%,复发率3.12%.完全缓解24个月后分子生物学缓解率100%(6/6).结论 以ATO为主的方案治疗PML/RARα融合基因阳性的APL患者疗效好,血液学缓解后24个月有可能获得分子生物学缓解.
