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维生素U对丙戊酸钠所致大鼠肾毒性的保护作用
目的 探讨维生素U (Vit U)对丙戊酸钠(VPA)所致大鼠肾毒性的保护作用,为临床应用提供实验室依据.方法 将48只雌性SD大鼠随机分为4组(n=12),对照组(A组)、VitU组(B组)、VPA组(C组)、VitU+VPA组(D组).A组:等量生理盐水;B组:Vit U 50 rmg/(kg·d);C组:VPA 300 mg/(kg·d);D组:先给予Vit U 50 mg/(kg·d),1h后VPA 300 mg/(kg·d).连续给药2、4周后,分别采血后开腹取肾(n=6).检测血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)、肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)及尿酸(UA)的水平.结果 ①血脂:2、4周时与A组相比,C组的TC及LDL均升高,差异具有统计学意义(P＜0.05);②肾功能血清生化指标:2周时与A组相比较,B、C、D三组的Cr、BUN及UA,差异均无统计学意义(P＞0.05);4周时C组的Cr、BUN及UA水平与其他三组相比明显增高(P＜0.05),差异具有统计学意义,D组与A组相比较差异无统计学意义(P＞0.05);③肾组织损伤:2周时各组肾脏组织形态学无明显异常,4周时仅C组可见炎性病灶,余各组无明显异常.结论 VPA可导致大鼠血脂水平升高,诱导的肾毒性可能与药物暴露时间有一定的关系;Vit U对VPA所致大鼠的肾毒性具有一定的保护作用.
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正交试验优选维U颠茄铝胶囊中维生素U的HPLC柱前衍生条件
目的 探索维U颠茄铝胶囊中维生素U的佳衍生条件.方法 选取二硝基氟苯(DNFB)为柱前衍生剂,以反应温度、介质pH、衍生剂DNFB与维生素U的摩尔比、反应时间4个考察因素设计L9(34)正交表安排试验,优选佳工艺,并进行验证试验.在优选的条件下进行衍生反应,确定维生素U的含量测定方法.结果 优选的衍生化反应条件为:反应温度70C,介质pH=10.0,衍生剂DNFB与维生素U的摩尔比为1.3,反应时间40 min.维生素U的两种构型分别在8～40 μg/mL(r=0.9992)和12～60 μg/mL(r=-0.9997)浓度范围内线性关系良好.按照正交试验确定的佳反应条件,对同一样品安排3次试验,衍生剂DNFB的转化率分别为99.2％、99.5％、99.4％,表明该工艺稳定可行.结论 该衍生方法简单方便、工艺稳定可行,可用于维生素U的柱前衍生-高效液相色谱测定.
关键词： 维生素U 柱前衍生-高效液相色谱法 正交试验 -
电位滴定法测定维生素U制剂中维生素U的含量
目的:改进维生素U制剂中维生素U的含量测定方法.方法:建立电位滴定法测定维生素U制剂中维生素U的含量,并与现行质量标准的手动滴定法进行比较.结果:电位滴定法测定维生素U的含量不受处方中其他组分、辅料以及滴定过程中产生的沉淀的影响,两种结构的维生素U(氯化甲基蛋氨酸和碘化甲基蛋氨酸)的平均回收率分别为99.47%(RSD=1.0%,n=9)和100.22%(RSD=1.4%,n=9).3个不同厂家的6批次产品测定结果表明,本法测定结果与现行标准中的手动滴定法测定结果相对误差≤0.5%.结论:该方法操作简单方便、灵敏度高、准确度好,适于各种维生素U制剂中维生素U的含量测定.
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柱前衍生化HPLC法测定维U颠茄铝胶囊中维生素U的含量
目的:对维U颠茄铝胶囊中维生素U含量测定的方法进行改进,根据维生素U的特殊结构,建立柱前衍生化HPLC检测法测定其含量.方法:以二硝基氟苯(FDNB)为柱前衍生剂,在碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液(pH 10.0)介质中进行衍生化反应;以HPLC法测定含量,采用Agilent TC-C18(250 mm×4.6 mm,5 μm)色谱柱,以0.01 mol·L-1乙酸钠溶液(用乙酸调pH至6.5)-乙腈(70∶30)为流动相,流速1.0mE·min-1,检测波长360 nm.结果:2种结构维生素U(氯甲基蛋氨酸和碘甲基蛋氨酸)的衍生产物色谱分离效果均良好,氯甲基蛋氨酸和碘甲基蛋氨酸质量浓度分别在为20.12～201.20和29.23～292.31 μg·mL-1范围内线性关系良好,氯甲基蛋氨酸和碘甲基蛋氨酸的加样回收率分别为97.33％～98.74％和97.71％～99.24％,RSD(n=6)分别为1.95％～2.52％和1.85％～2.78％;以本文的柱前衍生化HPLC法测得的不同厂家的3批样品中维生素U含量分别为99.06％、99.73％、100.52％,传统滴定法测得的含量分别为101.07％、102.26％、99.79％,两法结果基本一致.结论:方法学验证结果表明,本文建立的方法可以用于测定维U颠茄铝胶囊制剂中维生素U的含量.
