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鸭γ干扰素体外抑制鸭乙型肝炎病毒复制的实验研究
目的在体外模型中系统研究DuIFN-γ对鸭乙型肝炎病毒(DHBV)复制的影响,探讨其抑制病毒复制的可能机制.方法用重组DuIFN-γ及DHBV特异抗原刺激的PBMC上清液,分别作用于DHBV慢性感染的原代鸭肝细胞(PDH),检测PDH上清液中DHBV DNA、DHBsAg浓度和胞内病毒复制水平.结果 1 U/mL、10 U/mL重组DuIFN-γ可以抑制培养细胞上清液中DHBV DNA和DHBsAg的分泌,与慢性感染对照组比较,P＜0.05.病毒复制的抑制水平(包括细胞内DHBV总DNA、闭合环状DNA以及上清液中病毒颗粒和DHBsAg)与DuIFN-γ作用呈时间、剂量依赖性,但DHBV特异抗原刺激的PBMC上清液无明显抑制病毒复制的作用.结论 DuIFN-γ在体外DHBV慢性感染的PDH模型中可抑制病毒复制.
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肝舒胶囊抗鸭体内乙型肝炎病毒的实验研究
目的 观察肝舒胶囊抗鸭体内乙型肝炎病毒(DHBV)的作用.方法 以DHBV静脉注射感染雏鸭为模型,于感染后口服肝舒胶囊28 d,每日剂量分别为1.750、0.875、0.437 g·kg-1.采用斑点杂交方法检测鸭血清中的DHBV DNA;用ELISA快速法检测血清中鸭乙型肝炎病毒表面抗原(DHBSAG),检测用药前、后血清中DHBV DNA的滴度改变、DHBSAG的OD值改变情况.结果 高、中剂量肝舒胶囊组用药后7 ～28 d均出现鸭血清中DHBV DNA的滴度明显降低,但在停药7d后出现DHBVDNA滴度回升现象;肝舒胶囊3个剂量组治疗期间均对血清中DHBSAG有明显的降低作用.对DHBV DNA和DHBSAG的抑制作用均表现出一定的量效关系.结论 肝舒胶囊对鸭体内DHBV有明显的抑制作用.
关键词： 肝舒胶囊 鸭乙型肝炎病毒 鸭乙型肝炎病毒表面抗原 -
依肝达对鸭乙型肝炎病毒DNA的抑制作用
目的 研究壮药依肝达体内抗鸭乙型肝炎病毒(DHBV)的作用.方法 1日龄北京雏鸭24只,接种鸭DHBV 7 d后,随机分为依肝达高、低剂量组(相当于10、5.0 g·kg-1生药量)、DHBV组和拉米夫定阳性对照组.各组均ig给药,bid,共10 d.采用斑点杂交法观察用药前与用药后第0、5、10日及停药后3d血清中DHBV-DNA的表达.结果 高剂量依肝达于给药后第5、10日,低剂量依肝达于给药后第10 日,显著抑制感染鸭血清DHBV-DNA的复制,停药3d后未见明显反跳.结论 依肝达可抑制鸭体内DHBV的复制.
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肝康乐颗粒抗鸭乙型肝炎病毒的实验研究
目的采用实验动物方法观察肝康乐颗粒在体内抗鸭乙型肝炎病毒(DHBV)的作用.方法采用重庆麻鸭乙型肝炎动物模型,肝康乐颗粒喂服治疗28 d,停药观察7 d,检测用药前、后血清中DHBVDNA、DHBsAg的改变情况及肝脏病理改变.结果肝康乐颗粒在鸭体内有一定抑制鸭乙型肝炎病毒DNA的作用,且抗病毒作用与用药剂量有关,停药后DHBV DNA有反跳现象.结论中药治疗乙型肝炎具有一定的疗效.
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截短型鸭乙型肝炎病毒核心蛋白单克隆抗体的制备及初步应用
目的: 制备能与鸭乙型肝炎病毒核心抗原(DHBcAg)特异性结合的单克隆抗体(mAb),使之能特异性地对鸭乙型肝炎病毒(DHBV)进行检测.方法: 以原核表达的截短型鸭乙型肝炎病毒核心抗原(DHBcAg1-214)免疫BALB/c小鼠后常规杂交瘤技术进行细胞融合,有限稀释法克隆化,间接酶联免疫吸附试验( ELISA)和免疫组织化学( IHC)筛选、鉴定.结果: 筛选出3株(3H4、 4A11、 5A12)能有效分泌抗鸭乙肝病毒核心抗原的杂交瘤细胞株.该mAb可用于ELISA、 IHC和Western blot研究.结论: 获得了3株有效分泌抗核心抗原的mAb,可用于鸭乙肝病毒相关肝病组织与血清的检测.
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截短型鸭乙型肝炎病毒核心蛋白原核表达、多克隆抗体的制备和鉴定
目的:构建截短型鸭乙型肝炎病毒(DHBV)核心蛋白的原核表达质粒并在大肠杆菌中表达,制备多克隆抗体.方法:应用基因工程技术将编码截短型DHBV核心蛋白(DH-BeAg 1～214 aa)的基因片段装入原核表达载体pRSET-B内,在宿主菌Rosetm(DE3)pLacI内进行诱导表达,运用Ni-NTA方法纯化目的蛋白.用纯化的重组蛋白免疫BALB/c小鼠制备多克隆抗体,并采用酶联免疫吸附实验(ELISA),Westemblot及免疫组化检测抗体的灵敏度和特异性.结果:成功地构建了含截短型DHBV核心区基因的质粒,并纯化得到了相对分子质量(Mr)约为28 000的目的蛋白,用之免疫BALB/c小鼠获得了高效价的特异性多克隆抗体.结论:获得的重组截短型DHBV核心抗原纯度高,免疫反应性强;获得的多克隆抗体有较高的效价和较好的特异性,为DHBV的检测和研究奠定了实验基础.
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中药抗先天性华南绿头鸭乙肝病毒的实验研究
目的通过应用先天感染的绿头鸭乙型肝炎动物模型,从而筛选有效的抗病毒中草药.方法应用先天性感染鸭乙型肝炎病毒(DHBV)模型,随机分组,给予阳性药物和几种中药提取物进行治疗,采用斑点杂交方法检测血清DHBV-DNA的水平.结果用叶下珠醇提取物后5d,10d鸭血清DHBV-DNA OD值均明显低于给药前,差异有显著性(P＜0.05,P＜0.01).停药后3d后没有明显反跳现象.结论在华南绿头鸭乙型肝炎模型中,中药叶下珠醇提物对鸭乙肝病毒有一定的抑制作用.
