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  • 肝泰Ⅷ号丸抗鸭乙肝病毒作用的实验研究

    作者:

    目的:观察肝泰Ⅷ号丸抗鸭乙型肝炎病毒(DHBV)的作用.方法:选1日龄樱桃谷鸭,人工感染DHBV后,分设正常对照组、肝泰Ⅷ号丸大、中、小3个剂量组,阿昔洛韦治疗组和模型对照组,连续2周每天给药.各组动物均分别在感染后第7天、用药后14天和停药后第3天,静脉取血.分离血清,作鸭血清斑点杂交,以杂交斑点OD值作为DHBV-DNA水平值.实验结束时取新鲜肝组奴左叶作病理切片光镜观察.结果:肝泰Ⅷ号丸各剂量组均有不同程度抑制DHBV-DNA的作用,尤以大剂量组明显,且无明显肝毒性作用.结论:肝泰Ⅷ号丸具有抗鸭乙肝病毒的作用,有剂量反应关系;肝泰Ⅷ号丸对肝脏无明显毒性作用.

  • 泛昔洛韦体内抗鸭乙型肝炎病毒的药效研究

    作者:陈压西;郭树华;齐珍元;张定凤

    目的:观察核苷酸类似物泛昔洛韦体内抗鸭乙型肝炎病毒(DHBV)的作用.方法:采用重庆麻鸭乙型肝炎动物模型,用泛昔洛韦灌胃治疗1月,检测用药前后血清中的DHBV DNA及血清转氨酶(ALT、AST)、肝组织HE染色病理检查.结果:泛昔洛韦各剂量组用药2周、1月均能使血清中DHBV DNA滴度总体水平显著降低(P<0.05)或极显著降低(P<0.01).停药1周后小剂量组有DNA滴度回升现象,而中、大剂量组DNA滴度回升现象不明显;其抗病毒效果与剂量大小及用药时间有关.此外,肝脏病理检查及治疗1月、停药1周后血清转氨酶检查未发现该药对鸭肝组织有明显的毒性损害.结论:泛昔洛韦在鸭体内有抗鸭乙型肝炎病毒的作用.

  • 紫金胶囊对鸭乙型肝炎病毒的作用

    作者:陈家春;聂广;蔡大勇;陈鸿珊;李壮

    目的:观察紫金胶囊在鸭体内抗鸭乙型肝炎病毒的作用.方法:采用1日龄北京雏鸭静脉注射鸭乙型肝炎病毒,7d后开始给鸭口服紫金胶囊,连续10d,分别在给药前、给药后第5天和第10天及停药后第3天取血清,检测鸭血清鸭乙型肝炎病毒DNA水平,观察药物对鸭血清鸭乙型肝炎病毒DNA的影响.结果:紫金胶囊20g·kg-1·d-1,在给药第5天和第10天能明显抑制鸭血清DHBV-DNA水平(P<0.01),10g·kg-1·d-1也具有一定的抑制作用(P<0.05),而且停药后未见血清DHBV-DNA水平回升现象.结论:紫金胶囊在鸭体内对DHBV-DNA具有明显的抑制作用.

  • 剔毒护肝方对乙型肝炎肝纤维化麻鸭血液流变学的影响

    作者:朱清静;陆定波;罗欣拉;杨玲

    目的观察剔毒护肝方对乙型肝炎肝纤维化麻鸭血液流变学的影响.方法:用鸭乙型肝炎和毒(DHBV)阴性血清反复攻击复制鸭乙型肝炎肝纤维化模型,同时用剔毒护肝方治疗,观察其对肝纤维化指标及血液流变学的影响.结果:剔毒护肝方能提高血清白蛋白,降低血清球蛋白含量,显著降低透明质的、层粘蛋白和Ⅲ型前胶原,改善血液流变学的作用.结论:剔毒护肝方贝石护肝纤维化和改善肝脏血流变学的作用.

  • 鸭乙型肝炎病毒感染模型及其方法学研究进展

    作者:谈博;张奉学;操红缨;郭兴伯

    回顾和展望鸭乙型肝炎病毒感染模型的研究进展.阐述鸭乙型肝炎病毒自然感染地区差异与鸭种属间差异,鸭乙型肝炎病毒的垂直传播,鸭乙型肝炎病毒实验感染中存在的问题,以及 DHBV传染性质粒等方面.

  • 田基黄提取物抗鸭乙型肝炎病毒作用的实验研究

    作者:李沛波;杨翠平;王永刚;彭维

    研究田基黄提取物抗鸭乙型肝炎病毒(DHBV)的作用.方法:采用DHBV阳性血清感染1日龄广州麻鸭的方法制备鸭乙型肝炎模型.按6.5、13.0、26.0 mg/kg灌服田基黄提取物,1次/d,连续28 d.分别于给药前、给药后7、14、28 d、停药后7d,检测鸭血清中DHBV-DNA滴度、乙肝表面抗原(HBsAg)水平及丙氨酸氨基转移酶(ALT)和门冬氨酸氨基转移酸(AST)活性,并于停药7d时,取肝脏病理切片行HE染色后,观察肝脏病变情况.结果:田基黄提取物能显著降低乙型肝炎模型鸭血清中DHBV-DNA滴度、HBsAg水平以及AST和ALT活性,且在停药后第7d,未见反跳现象,停药后第7d时肝组织HE染色结果亦显示:田基黄提取物能减少肝细胞的变性、坏死及炎症细胞浸润.结论:田基黄提取物具有显著抗鸭乙型肝炎病毒的作用.

  • 复方六月雪对鸭乙型肝炎病毒DNA的抑制作用

    作者:张士军;林军;蒋伟哲;黄春喜;黄仁彬

    目的:观察复方六月雪(CLYX)对鸭乙型肝炎病毒(DHBV)DNA的抑制作用,为研究和开发新的抗HBV药物提供实验依据.方法:采用1日龄雏鸭接种广西麻鸭DHBV强阳性血清,13天后用PCR法筛选出DHBV强阳性鸭.随机分成5组:CLYX高、中、低剂量组、模型组和阳性对照组,每组10只,各组雏鸭均灌胃给药14天.于用药前(T0)、用药7天(T7)、14天(T14)及停药后3天(P3)分别采血,采用荧光定量PCR(FQ-PCR)法检测血清DHBV DNA的含量.结果:CLYX各剂量组用药后血清DHBV DNA含量显著降低(P<0.01),停药3天后,CLYX低剂量组和阳性对照组血清DHBV DNA有反跳现象,而CLYX中、高剂量组血清DHBV DNA没有反跳现象.CLYX抑制DHBV DNA的作用有明显的量效和时效反应关系.结论:CLYX可有效地抑制DHBV DNA的复制.

  • 鸭乙型肝炎病毒YMDD突变株体外耐药模型建立

    作者:付喜花;梁蔚芳;吴小东;沈国俊;何海棠;陈金军;侯金林

    目的 构建鸭乙型肝炎病毒(DHBV)YMDD点突变的复制质粒,研究其在鸡肝癌细胞中的复制及拉米夫定抗性.方法 以广东樱桃谷鸭DHBV分离株为模板,将3631 bp的片段克隆至载体pBluescript Ⅱ KS(+)中,构建含1.2倍病毒全基因的重组质粒,经PCR定点突变获得YMDD突变株.将构建质粒经FuGENETM 6瞬时转染鸡肝癌细胞,分析变异株的复制能力及拉米夫定耐药性.结果 PCR鉴定、酶切鉴定及序列测定均证实成功获得1.2倍DHBV全基因YMDD突变质粒.Southern印迹杂交表明重组质粒转染细胞后可检测到病毒复制中间体;野生株的复制能力是突变株的2.7倍.拉米夫定对变异株的IC50=37.12+8.81 ng/ml,高于野生株的IC50=10.90±4.80 ng/ml.结论 与野生株相比,YMDD突变株质粒体外复制活性减弱,对拉米夫定敏感性下降.

  • 一株鸭乙型肝炎病毒DHBV全基因的克隆和序列分析

    作者:梁蔚芳;刘志华;何海棠;骆抗先

    目的从本地樱桃谷鸭血清中克隆鸭乙型肝炎病毒(DHBV)DNA,并进行序列分析.方法用PCR扩增DHBV全基因,连接至T载体上,挑选克隆进行测序分析,与GenBank中16株DHBV全基因组进行同源性比较,并进行分子进化树分析.结果24-18与16株DHBV基因组比较,核苷酸同源性介于89.4%99.3%之间,各开放阅读框氨基酸同源性比较显示差异显著地方位于P区.结论24-18属于DHBV西方基因型中的一个亚型.

  • 四逆散体内抗鸭乙型肝炎病毒的实验研究

    作者:陈诗慧;郭卫真;周红燕;李向阳;张奉学;郭兴伯;卢焯明

    目的观察四逆散加减方醇提物体内抗鸭乙型肝炎病毒(DHBV)的作用.方法采用先天感染鸭乙型肝炎病毒的广州麻鸭为动物模型,检测用药前后鸭血清DHBV-DNA OD值的变化,并以阿昔洛韦作阳性对照.结果停用后第3天,四逆散原方组鸭血清DHBV-DNA OD值明显低于用药前(P<0.05);用药后第5天和第10天,四逆散加味组鸭血清DHBV-DNA OD值明显低于用药前(P<0.05,P<0.01);用药后第10天,四逆散加味组的中位抑制率与对照组比较有显著性差异(P<0.05).结论四逆散原方、四逆散加味方在鸭体内有抗乙型肝炎病毒作用.

  • 广西麻鸭乙型肝炎感染病毒动物模型的实验研究

    作者:陈兆霓;黄仁彬;罗秀;何巧玲;吕鹏;张士军

    目的 探讨广西麻鸭作为乙型肝炎病毒感染动物模型的可能性.方法 应用广西1 d龄雏麻鸭经腹腔感染鸭乙型肝炎病毒(DHBV),13 d后采用实时荧光定量PCR法检测麻鸭血清DHBV含量,筛选出DHBV强阳性鸭.结果 共检测148份麻鸭血清标本,其中DHBV阳性标本136份,阳性率为91.9%.结论 广西麻鸭可作为乙型肝炎病毒感染动物模型.实时荧光定量PCR法检测DHBV敏感性较高,重复性好,可用于DHBV检测.

  • 鸭乙型肝炎病毒模型的研究意义

    作者:胡静;姚云清

    鸭乙型肝炎模型是研究乙型肝炎病毒的生物学特性、致病机制和抗病毒药物比较理想的实验动物模型.在筛选和评价抗病毒药物、乙型肝炎病毒基因治疗技术以及血液制品消毒学领域有广泛应用.

  • 强肝丸C抗鸭乙型肝炎病毒的动物实验研究

    作者:齐珍元;郭树华;陈压西

    肝丸C是以中草药叶下珠为主,黄芪等药为辅的中药方剂.近年来,国内外研究证实叶下珠有较强的抗乙型肝炎病毒作用,其抗病毒机制目前尚不清楚.本研究观察了强肝丸C、肝得健在体内抗鸭乙型肝炎病毒(DHBV)的作用.

  • 白背叶黄酮类化合物抗鸭乙型肝炎病毒活性研究

    作者:夏星;郑作文;谭为

    目的:研究白背叶黄酮类化合物(WF)抗鸭乙型肝炎病毒(DHBV)的活性.方法:对1 d龄雏鸭人工感染DHBV,7d后成功复制鸭DHBV感染模型.分别灌胃75、150mg·kg~(-1)的WF,或50mg·kg~(-1)拉米夫定,每天2次,连续给药10d.斑点杂交法测定给药第5天、第10天及停药后第3天鸭血清中DHBV-DNA浓度.结果:75及150 mg·kg~(-1)WF均能显著降低模型鸭血清中DHBV-DNA浓度(P<0.01),且停药后反跳程度轻于拉米夫定.结论:WF有显著的抑制DHBV-DNA复制的作用,表明其可能有较好的抗乙型肝炎病毒的活性.

  • 阿的福韦在鸭乙型肝炎模型及2.2.15细胞中抗乙型肝炎病毒的药效研究

    作者:陈压西;黄爱龙;郭晖;齐珍元

    目的:观察阿的福韦体内抗鸭乙型肝炎病毒(DHBV)的作用及体外抗乙型肝炎病毒(HBV)效果.方法:采用鸭乙型肝炎动物模型,用阿的福韦口服治疗10天,检测用药前后血清中的DHBV DNA、DHBsAg,并取肝脏样本提取总DNA,作Southern Blot分析.此外,以2.2.15细胞为靶细胞,给药后通过检测细胞培养液中HBsAg、HBeAg和HBV DNA观察阿的福韦抗HBV效果.结果:阿的福韦各剂量组用药后均能使血清中的DHBVDNA显著降低或极显著降低(P<0.05或P<0.01),但停药后有DHBV DNA回升现象;用药前后DHBsAg无明显改变.肝组织Southern Blot分析亦显示用药后肝脏中DHBV DNA有明显降低,停药后DHBV DNA反跳明显.大剂量阿的福韦加入细胞培养12天,对HBsAg抑制率为17.01%,对HBeAg抑制率为26.80%,对HBV DNA抑制率为26.92%.结论:阿的福韦在鸭体内有抗鸭乙型肝炎病毒的作用,但停药后DHBVDNA有"反跳"现象;体外实验无明显抗HBV病毒作用.

  • 碱性磷酸酶直接标记核酸探针检测血清中鸭乙型肝炎病毒DNA方法的建立及应用

    作者:陈压西;齐珍元;黄爱龙

    目的:建立碱性磷酸酶直接(AlkPhos Direc)标记核酸探针检测血清中鸭乙型肝炎病毒核酸(DHBV DNA)方法.方法:应用AlkPhos Direc[TM]将碱性磷酸酶直接标记纯化的DHBV DNA全基因制备探针,与目标核酸杂交后加入CDP-Star化学发光试剂,用胶片放射自显影检测DHBV DNA.同时检测了探针的灵敏度和特异性.比较了AlkPhos Direc标记DHBVDNA探针与地高辛标记的DHBV DNA探针检测鸭血清标本100份结果.并用AlkPhos Direc标记探针检测血清中鸭乙型肝炎病毒核酸的方法考核了活性肽类物质保尔佳(Polyerga)及其8种单体体内抗鸭乙型肝炎病毒作用.结果:探针灵敏度为10pg,无非特异性的结果出现,与地高辛探针比较,用AlkPhos Direct标记探针检测方法的敏感性为100%,特异性为100%,符合率为100%;抗鸭乙型肝炎病毒作用动物实验表明,保尔佳001号单体(CMS001)能使血清中DHBV DNA明显降低(P<0.05).结论:AlkPhosDirec标记DHBVDNA探针检测血清中鸭乙型肝炎病毒核酸方法灵敏、特异,与地高辛标记的DHBVDNA探针检测结果完全相符合,可作为药物抗鸭乙型肝炎病毒作用动物实验疗效评价的手段.

  • DHBV DNA在鸭胰脾组织中原位杂交的研究

    作者:彭凤英;郭树华

    目的:对慢性DHBV感染鸭的肝、胰、脾组织DHBV DNA作对比研究。方法:采用原位杂交技术。结果:DHBV不仅可以感染鸭肝细胞,且可感染胰、脾组织,DHBV DNA阳性细胞的分布密度以肝组织高,胰脾次之。结论:DHBV具有组织器官泛嗜性,但其在肝外组织中的复制似不及在肝细胞中活跃。

  • 老鼠簕醇提物抗鸭乙型肝炎病毒及护肝作用的实验研究

    作者:沐小敏;韦朋海;徐斌;苏齐鉴;韦金露;杨彦;覃斌;谢志春

    目的 观察老鼠簕醇提物(Elcohol Extract of Acanthus ilicifolius L.,EEA)治疗鸭乙型肝炎的疗效.方法 将60只感染鸭乙型肝炎病毒(DHBV)的麻鸭随机分为5组:EEA低、中、高剂量组、阿昔洛韦(ACV)组和模型对照组.另设1组正常对照组.每组12只,连续给药14d.用FQ-PCR法检测治疗前(TD)、用药后d 7(T7)、d 14 (T14)及停止治疗后d 5 (P5)血清中DHBV DNA的水平,ELISA法测定血清中DHBsAg、DHBeAg的OD值,同时检测血清AST、ALT,后取肝脏做病理检查.结果 老鼠簕(Acanthus Ilicifolius L.,AIL)各剂量组血清DHBV DNA水平、DHBsAg及DHBeAg OD值均未显著降低(P>0.05).高、中剂量EEA能显著降低ALT活性(P<0.05);高剂量EEA显著降低AST活性(P<0.01)及显著改善肝脏病理作用(P<0.001).结论 高剂量EEA对肝功能及肝组织有明显的保护作用,但未发现EEA有抗鸭乙肝病毒作用.

  • 饿蚂蝗总黄酮对鸭乙型肝炎的保护作用研究

    作者:刘舒凌;吴燕春;钟振国;朱茂强;庞家楠

    目的:研究饿蚂蝗总黄酮对鸭乙型病毒性肝炎的作用.方法:采用鸭乙型肝炎病-毒-(DHBV)血清感染1日龄广西麻鸭.感染7d后采用PCR法筛选出DHBV DNA强阳性鸭,随机分为5组:模型组、阳性药拉米夫定组(50mg/kg)、饿蚂蝗总黄酮组(300,150,75 mg/kg),每组10只.另设正常对照组(经PCR筛选出的未造模DHBV阴性鸭)10只.各组从造模后第14d开始给药,每天灌胃给药1次,持续给药14d.每组动物分别于给药前0天(T0)、给药后7天(T7)、给药后14天(T14)、停药后3天(P3)自颈静脉采血,检测血清中鸭乙型肝炎病毒DNA(DHBV DNA)、鸭乙型肝炎表面抗原(DHBsAg)和鸭乙型肝炎e抗原(DHBeAg)的水平,谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)的活性,白介素-2(IL-2)、γ干扰素(IFN-γy)的含量变化.结果:与模型组比较,在T14时,饿蚂蝗总黄酮300、150、75 mg/kg剂量组能够降低T14时鸭血清DHBV DNA载量以及ALT和AST含量,升高IL-2和IFN-γy水平;在P3时,饿蚂蝗总黄酮300、150mg/kg剂量组对鸭血清DHBV DNA载量以及ALT和AST含量的抑制仍然明显,停药后无反跳.结论:饿蚂蝗总黄酮具有抗鸭乙型病毒性肝炎作用,其机制与抑制病毒复制、保肝降酶、调节免疫功能有关.

  • 甲基阿魏酸抗鸭乙肝病毒复制及保肝作用

    作者:容明智;庞勇军;李勇文;庞文箫;李丽;林浩南;李薇;韦冰华

    目的:研究甲基阿魏酸(Methyl ferulic acid,MFA)对鸭乙型肝炎病毒(DHBV)复制的抑制作用与保肝的作用.方法:将鸭乙型肝炎病毒DNA阳性的广西麻鸭随机分成5组,分别为甲基阿魏酸200、100、50 mg/kg(MFAH、MFAM、MFAL)剂量组,模型组和拉米夫定(3TC)组.于用药前、用药后7天、14天、21天及停药后三天分别采血,检测血清中鸭乙型肝炎病毒DNA的拷贝数、丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶(AST)的含量.实验结束时,取肝组织做病理学检查.结果:与模型组比较,甲基阿魏酸200、100、50 mg/kg剂量组用药21天后血清鸭乙型肝炎病毒DNA拷贝数显著降低,分别为0.57±0.52、0.73±0.58、0.82±0.54.停药三天后,甲基阿魏酸各剂量组鸭乙型肝炎病毒DNA、丙氨酸氨基转移酶和天门冬氨酸氨基转移酶仍在较低水平而拉米夫定则有明显回升现象;镜下观察各组肝脏组织切片,与模型组比较甲基阿魏酸200、100、50 mg/kg剂量组肝脏的病理改变有明显改善.结论:甲基阿魏酸有一定的抗乙肝病毒和保肝的作用.

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