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  • 2013年山东省聊城市柯萨奇病毒 A 组16型基因特征分析

    作者:许光银;裴耀文;张世英;王志玉

    目的:分析2013年聊城市手足口病( hand foot and mouth disease, HFMD)病原构成及柯萨奇病毒A组16型(coxsackievirus A16, CVA16)VP1区基因特征。方法采集聊城市2013年1—12月监测点医院手足口病患儿的粪便和咽拭子标本,采用RT-PCR方法对HFMD疑似病例标本进行病原鉴定,选取CVA16核酸阳性标本,使用RD细胞和Vero细胞进行病毒分离。对9株CVA16病毒阳性的分离物进行VP1区基因扩增及核苷酸序列测定,与其他各基因型及亚型的代表株序列构建亲缘进化树,并进行核苷酸和氨基酸同源性分析。结果2013年聊城市共检测手足口病病例标本961份,阳性者747份,阳性率77.73%。其中人肠道病毒71型( enterovirus 71, EV71)74份,占阳性标本的9.91%,CVA16130份,占17.40%;其他肠道病毒543份,占72.69%。应用 BioEdit 和 MEGA 4软件分析发现,9株CVA16彼此间VP1核苷酸和氨基酸水平同源性较高,分别在97.7%~100%和99.3%~100%之间。亲缘进化树分析显示山东聊城CVA16分离株与B2b基因亚型的代表株处于同一分支,属于B2b基因亚型。结论2013年引起聊城市手足口病的主要病原体以其他肠道病毒为主,兼有CVA16和EV71参与,而CVA16属于B2b亚型。手足口病的病原谱正发生改变,应加强EV71、CVA16及其他肠道病毒的分子流行病学监测,了解其基因特征,对预防和控制手足口病具有重要意义。

  • 引起神经症状的柯萨奇A组16型病毒分子流行病学分析

    作者:马红霞;潘静静;李懿;卫海燕;杜燕华;李幸乐;黄学勇;许汴利

    目的 分析引起神经症状的柯萨奇病毒A组16型病毒(coxsackievirus A16, CA16) VP1基因特征.方法 采集表现神经症状的病例临床标本及信息,采用荧光RT-PCR方法检测病原,肠道病毒阳性标本进行病毒分离培养,培养阳性标本采用RT-PCR方法扩增VP1序列并测序.利用DNAStar 5.0和Mega 5等生物学软件进行基因序列及亲缘进化分析.同时收集病例的临床及流行病学信息,采用SPSS软件进行统计分析.结果 15份标本来源于12例临床诊断为病毒性脑炎或手足口合并神经症状的患者,8例有临床信息记载的都表现有发热、皮疹、脑膜刺激征和颈项强直的症状,临床症状和发病时间不呈现典型的聚集性.01111、01169和01130三例患者分别采集了两份标本,除了01169来源的两份标本间有一个碱基的差别,两份标本来源的VP1序列核苷酸和氨基酸相似性均为100%.15株毒株之间的核苷酸同源性为94.5% ~100%,氨基酸同源性为98.0% ~100%.15株毒株和原型株G10的核苷酸同源性为68.5% ~70.5%,氨基酸同源性为90.5% ~91.9%.系统进化分析显示,本研究15株序列全部属于B1b簇,又分属三小簇.结论 引起神经症状的15株CA16均为B1b基因型,深入开展CA16分子流行病学对我国HFMD的防控及疫苗的研发将提供重要参考.

  • 荧光RT-PCR同步检测肠道病毒71型和柯萨奇病毒A组16型方法的建立及应用

    作者:曾昭森

    目的 建立快速、灵敏、特异的肠道病毒71型和柯萨奇病毒A16型的荧光PCR检测及分型方法.方法 针对肠道病毒71型和柯萨奇病毒A16型的特异性保守基因vp1基因分别设计一对引物和对应的探针,对荧光RT-PCR反应体系进行优化,验证方法的特异性、灵敏度和重复性,并对临床样品进行检测分析.结果 该方法对肠道病毒71型和柯萨奇病毒A16型的检测有高度特异性,与甲肝、腮腺炎、风疹、乙型脑炎等病毒均无交叉反应,检测灵敏度可达10拷贝/μl;43例患儿肛拭子标本中肠道病毒71型和柯萨奇病毒A16型检测率分别为37.21%(16/43)和13.95%(6/43).结论 荧光RT-PCR法分型检测肠道病毒71型和柯萨奇病毒A16型的方法具有快速、便捷、特异、灵敏等特点,适用于肠道病毒的早期诊断.

  • 2010至2013年黄石市手足口病的流行特征及病原学分析

    作者:陈莹;陈维进

    目的:分析黄石市2010至2013年手足口病的流行病学和病原学特征,为手足口病的防控提供依据。方法利用国家疾病预防控制信息系统,采用描述流行病学方法对黄石市2010至2013年收治的18011例手足口病监测资料和病原学监测结果进行统计分析,采用实时荧光定量聚合酶链反应方法对3089例手足口病病例进行肠道病毒核酸检测。结果研究期间黄石市手足口病发病年龄主要集中在0~5岁,占95.40%以上,绝大多数为散居儿童;0~5岁手足口病发病儿童中,男女比例为2.03︰1(12061/5950),男孩显著高于女孩(χ2=10.91,P<0.01)。从各城区(县市)发病率曲线图看,城区高于农村县市;每年手足口病流行起于3月份开始,4、5、6月份急剧上升至高峰,随后逐月下降。2012年11~12月份、2013年11~12月份又出现一个轻微的抬升,呈现第二个高峰。实验室诊断病例病原学分析结果显示,2010年手足口病流行以EV71为主,占44.52%;2011年则以CoxA16为主,占76.24%;2012年、2013年再度以EV71为主导,分别占98.99%和91.49%。结论气温和适宜的湿度是手足口病发生与传播的主要原因,流行时间特征与当地气温和湿度密切相关,存在2年为一个流行周期的可能。EV71和CoxA16为黄石市手足口病流行的两种主要病原体,每年引起流行的病原体呈现交替主导的特征。

  • 黄石市2010至2012年手足口病的流行特征及病原学分析

    作者:陈莹;夏毓;李兰;褚智杰;张芊;李开为

    目的:了解黄石市手足口病流行期间的病原学特征及流行病学规律,为科学制定手足口病的防控策略提供依据。方法分析本市疾病控制中心2010至2012年手足口病的疫情资料。对2010年1月至2012年12月13734例手足口病病例资料分类统计分析,选取2466例实验室诊断病例进行了病原学分型。结果黄石市手足口病的流行从3月份开始增多,4、5月份急剧上升至高峰,随后逐月下降。2012年11~12月份又出现一个轻微的抬升。3岁以下发病人群中,男女比例为2.08︰1,男性显著性高于女性(χ2=8.36,P <0.01),且70%以上为散居儿童。实验室诊断病例病原学分析,2010年手足口病流行以EV71为主导,占44.52%;2011年则以CoxA16为主导,占76.24%;2012年再度以EV71为主导,占98.99%。结论气温和适宜的湿度是手足口病的发生与传播的主要原因,流行时间特征与当地气温和湿度密切相关。EV71和CoxA16为黄石市手足口病流行的两种主要病原体,每年引起流行的病原体呈现交替主导的特征。

  • 天门地区2014年手足口病病原学检测

    作者:朱名超;朱娅;韩利蓉;孙莉

    目的:了解天门地区手足口病(HFMD)疑似患儿CoxA16和EV71的感染情况,为其有效治疗和干预提供依据。方法收集住院及门诊HFMD疑似患儿血标本,应用ELISA法测定血清中CoxA16-IgM和EV71-IgM含量。结果共收集3009例HFMD疑似患儿,总阳性率13.2%(396/3009),CoxA16-IgM阳性率为10.77%(149/1384),EV71-IgM阳性率为15.2%(247/1625), CoxA16+ EV71混合感染阳性率为10.57%(146/1381)。单纯感染与混合感染男性患儿均显著多于女性患儿,差异均具有统计学意义(χ2EV71=4.60、P =0.017,χ2CoxA16=4.64、P =0.025,χ2EV71+ CoxA16=4.36、P =0.030);1岁患儿组阳性率高(较其他各年龄组,P均=0.000)。结论天门地区儿童HFMD感染率较高,病原以EV71为主,以CoxA16+ EV71混合感染较严重,疾控部门应引起足够重视,防止HFMD的暴发流行。

  • 合并脑炎的重症手足口病的临床特点

    作者:杨绿绿;梁世山;陈燕惠

    目的 分析合并脑炎的重症手足口病的临床特点.方法 回顾性分析2009年9月至2010年9月我院收治的手足口病病例的临床特点,其中合并脑炎患儿88例(脑炎组),普通病例235例(普通组),比较两组患儿的临床特点.结果 普通组80%以上的患儿出现多个或密集疱疹或溃疡,这一比例高于脑炎组,差异有统计学意义(P<0.05).两组的发热程度及天数的差异有统计学意义(P<0.05),但血常规WBC改变及分类比例差异无统计学意义(P>0.05).脑炎组和普通组血生化指标中CK、CK-MB、AST、GLU改变差异有统计学意义(P<0.05).不同病毒所致脑炎病例其脑脊液蛋白、糖、氯化物含量改变差异无统计学意义(P>0.05),但细胞总数改变差异有统计学意义(P<0.05);肠道病毒71型感染者脑脊液细胞数较柯萨奇病毒A组16型感染者明显升高(P<0.05).结论 对皮疹不多、口腔疱疹或溃疡较少者应密切观察,警惕重症病例的可能.重症手足口病多数发生中、高度发热,热程4d以上.CK 、CK-MB、GLU升高的手足口病病例,要密切观察神经系统症状、体征,警惕重症病例,脑脊液细胞数较高的患儿要警惕肠道病毒71型感染.

  • 2009至2010年昆明儿童手足口病病原及流行特点分析

    作者:吴茜;温柏平;杜曾庆;倪林仙

    目的 对2009至2010年昆明地区儿童手足口病(hand foot and mouth disease,HFMD)病原及流行病学特点进行回顾性总结分析.方法 选择昆明市儿童医院2009年1月至2010年12月门诊及住院诊治的13 286例HFMD患儿为研究对象,采集病程3d内的双份粪便标本于无菌采便杯内,应用荧光定量PCR进行人肠道病毒71型(EV71)、柯萨奇病毒A组16型(CoxA16)和肠道病毒通用型(EV)检测,并对阳性病例的年龄分布特点、季节分布情况进行分析.结果 13 286例HFMD患儿中,病原检出阳性病例8 125例,EV71、CoxA16、其他型肠道病毒阳性分别为18.2%(2 418/13 286)、32.8%(4 363/13 286)、10.1%(1 344/13 286),肠道病毒总阳性率为61.1%;EV71和CoxA16混合感染75例,混合感染率为0.9%.~1岁、~3岁、~6岁、>6岁年龄组病原检测阳性率分别为37.1% (311/889)、64.7%(5 290/8 178)、62.9%(2 300/3 657)、36.6%(224/612),~3岁、~6岁组病原阳性率高于~1岁、>6岁组.昆明地区两年中4~6月份均为HFMD发病高峰期,病原阳性检出率高,其中5月份为发病高月份,从7月份起病例数有减少趋势,但11月、12月又出现发病高峰趋势,四个季度间病原体阳性率比较差异有统计学意义(x2=1 000.446,P< 0.01).结论 2009至2010年昆明HFMD病原感染以CoxA16为主,其次为EV71;3~6岁患儿发病率高;本地区HFMD四季均可发病,夏季为发病高峰期.

  • 手足口病病原学检测及流行病学分析

    作者:吕惠荣;张蕾;张秀娟

    目的 分析信阳市手足口病实验室检测结果,掌握手足口病流行趋势,为本地区手足口病的综合防治提供参考资料.方法 采集临床880份诊断为手足口病病例的咽拭子、粪便和肛拭子、疱疹液,应用real time RTPCR技术检测肠道病毒71型(EV71)、柯萨奇病毒A组16型(CA16)、通用型肠道病毒(EV).结果 880份检测标本中,肠道病毒总体检出率为74.32%,其中肠道病毒EV71型、CA16型和其它肠道病毒阳性检出率分别为34.66%、17.27%和20.11%.不同病毒阳性检出率差异有统计学意义(x2=307.45,P<0.01).880份检测标本中,从发病至采样0 ~3d病毒核酸检测率高(83.54%),其次是4~7d(76.87%).咽拭子、粪便、肛拭和疱疹液阳性率分别为8.33%、78.01%、66.15%和75%.粪便与其它样本的阳性检出率差异有统计学意义(x2=27.05,P<0.01).病例发病集中在4~7月份,以EV71感染为主,病毒感染率以<1岁组高,男女病毒感染率差异无统计学意义(x2 =0.12,P=0.73).结论 信阳市手足口病的病原体主要是EV71,其流行具有明显的年龄、季节界限.

  • 2012年手足口病实验室检测及流行病学分析

    作者:卢艳玲;王军鹏

    目的 了解济源市手足口病病例肠道病毒的感染情况,为制定预防和控制策略提供依据.方法 对2012年1-12月济源市临床诊断为手足口病患者的862例标本,运用实时荧光RT-PCR技术检测样本中的肠道病毒核酸.结果 济源市2012年862例手足口病病例标本中检出阳性标本742例,阳性率为86.08%;其中肠道病毒71型(EV71) 502例,柯萨奇CoxA16 172例,其他肠道病毒68例.结论 济源市2012年1-12月EV71是手足口病病例的主要病原体,病例主要为5岁以下散居儿童为主.

  • 1073例儿童手足口病病原学检测结果及临床特征分析

    作者:李润青;何菡;赵秀英;孙桂珍;乔桂芳;吴昊;李俊红;金荣华

    目的 了解手足口病(HFMD)儿童病例中肠道病毒71型(EV71)和柯萨奇病毒A组16型(CA16)的感染状况及重症HFMD病例的临床特征和实验室检查结果.方法 采集HFMD患儿咽拭子标本,检测EV71和CA16感染情况,分析患儿性别、年龄分布情况并对重症患儿的临床特征和实验室检查结果进行回顾性分析.结果 1073例HFMD患儿中EV71阳性494例(46.04%),CA16阳性97例(9.04%),EV71阳性检出率明显高于CA16(P=0.001).494例EV71阳性患儿中,男299例(60.53%),女195例(39.47%);97例CA16阳性患儿中,男59例(60.82%),女38例(39.18%),男性患儿构成比显著高于女性.EV71或CA 16阳性患儿中"1~<2岁"组和"2~<3岁"组构成比明显高于其他年龄组.本组重症病例62例,其中重型50例(80.65%),危重型12例(19.35%).前者以神经系统表现为主,循环系统、呼吸系统轻度受累,无死亡病例;后者并发神经系统、循环系统、呼吸系统等多器官功能损害,5例死亡.结论 2010年北京地区HFMD流行的病原体的优势株可能为EV71;男性患儿高于女性,1~3岁儿童为易感人群.危重型可引起死亡,实验室指标的变化对协助诊断重型HFMD及提示重型向危重型进展有一定意义.

  • 2011-2013年手足口病病原谱及临床特征分析

    作者:田树萍;何菡;王文静;娄金丽

    目的:探讨2011-2013年手足口病(HFMD)病原体变化趋势。方法采集4064例在我院就诊的HFMD患者的咽拭子标本并提取核酸,采用实时荧光定量PCR方法检测肠道病毒通用型(EV),肠道病毒71型(EV71)及柯萨奇病毒A组16型(CA16)。结果3年间6岁以上患儿占96.0%;发病以5~7月份为主,占73.5%。2011-2013年HFMD 患者 EV71、CA16和未分型肠道病毒的检出率依次为42.6%、35.3%、18.5%,16.1%、22.6%、11.5%,41.3%、42.1%、70.0%,差异有统计学意义(掊2=343.3,P<0.05)。2013年EV71、CA16检出率明显低于2011、2012年,未分型病毒检出率明显增高(P均<0.017)。613例重症HFMD患儿中,EV71感染占59.2%、CA16感染占11.1%,未分型病毒感染占29.7%,且均以肺炎合并脑干脑炎为主。结论2011-2013年HFMD病原谱发生了变化,未分型肠道病毒增多,需引起重视。

  • 环介导等温扩增法快速检测手足口病病原体

    作者:戴颖;刘峰涛;何书;汪奇伟

    目的:建立逆转录(RT)-环介导等温扩增方法(LAMP),以快速检测手足口病重要的两种病原体:肠道病毒71型(EV71)和柯萨奇病毒A组16型(CA16)。方法:收集手足口病患儿咽拭子标本93份,针对EV71和CA16病毒的VP1基因特异性序列8个区域各设计6条LAMP引物,分别于63℃(EV71)、65℃(CA16A)扩增1 h,日光下观察结果,与实时荧光定量PCR比较检测特异性和敏感性。结果:EV71、CA16的LAMP低检测限均为500拷贝/管,与对照病毒无交叉反应。93份标本中,RT-PCR方法检测显示EV71阳性44例,CA16阳性36例;RT-LAMP方法检测显示EV71阳性46例,CA16阳性36例,两种方法间比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:应用RT-LAMP检测手足口病病原体EV71、CA16快速、灵敏、经济、特异性高,适合在基层医疗机构推广应用。

  • 托幼机构儿童手足口病发病影响因素研究

    作者:刘艺;姚亮清;戚艮有

    目的 探讨托幼机构儿童手足口病发病影响因素.方法 2013年4月~ 2016年1月共选择200例托幼机构儿童作为研究对象,调查问卷的方式进行研究,调查的因素包括:班级对手足口病防控的重视程度、相关制度的制定及落实、晨检午检情况、病例隔离情况、教职工、学生和家长对手足口病防控的态度、相关知识知晓率、预防行为的践行情况、教室等公共场所通风情况、消毒情况、教室每学生人均占有面积等.结果 31例儿童感染了EV71或CoxA 16.晨检午检情况、隔离情况、手足口病相关知识知晓率、预防行为的践行情况、教室等公共场所通风情况、消毒情况、教室每学生人均占有面积均为托幼机构儿童手足口病发病的影响因素(P<0.05).结论 社会及学校应加强力度宣传手足口病的相关知识及有效预防措施,使家长及托幼机构对幼儿的健康状况更加重视,积极践行预防行为,做好消毒工作,教室等公共场所保持通风换气,严格托幼机构的晨检午检,一旦手足口病的发生及时隔离,以降低手足口病的发生率.

  • 2010年乌鲁木齐市手足口病监测结果

    作者:薛娜;陈薇;韩志国

    目的 开展手足口病病原学检测,了解乌鲁本齐市2010年手足口病病原特点.方法 用逆转录聚合酶链反应(RTPCR)法,对208例手足口病患者的咽拭样本105份、粪便样本104份、肛拭样本27份共236份进行肠道病毒71型(EV71)和柯萨奇病毒A组(CA16)的检测.结果 实验室检测的208例样本中,EV71检出104例,CA16检出66例,其他肠道病毒检出14例.病原监测发现2010年以EV71和CA16病原流行为主,各月监测的病例均以EV71型较多,各区县均监测到EV71病原.结论 RT-PCE方法用于手足口病EV71和CA16病原的检测,可以快速、准确地扩增咽拭、粪便及肛拭中的病毒,是一种快速、特异的检测方法.2010年乌鲁木齐市手足口病疫情自5月以来有明显增高趋势,呈现散发为主、局部聚集性发病的特点,病原主要是EV71和CA16型病毒.

  • 肠道病毒71型和柯萨奇病毒A组16型实验室检测研究进展

    作者:金玉娟;甘莉萍;陈应坚;杨慧

    肠道病毒71型(Enterovirus, EV71)和柯萨奇病毒A组16型(Coxsackievirus, CoxA 16)是引起手足口病的主要病原体,因此,快速准确地检测这2种病原体对于手足口病治疗和控制有着至关重要的作用.该文介绍了这2种病原体实验室检测技术的研究进展,主要包括病毒分离培养、血清学检测、分子生物学方法 包括RT-PCR法、实时荧光RT-PCR法等.

  • 肠道病毒71型与柯萨奇病毒A组16型所致手足口病的临床特征与精细护理

    作者:黄儒;张慧敏

    目的:探讨肠道病毒71型(EV71)与柯萨奇病毒 A 组16型(CA16)所致的手足口病临床特征及护理方式。方法:回顾性选取2013年1月~2014年1月于我院儿科就诊的、经过使用 RT - PCR 进行肠道病毒检测可知肠道病毒71型(EV71)与柯萨奇病毒 A 组16型(CA16)患儿各50例为研究对象,之后对两组患者的临床特征以及生命特征进行统计分析,并进行精心细致护理。结果:肠道病毒71型(EV71)组患儿表现出呕吐、肢体抖动、抽搐、肺炎以及呼吸衰竭的比例明显高于柯萨奇病毒 A 组16型(CA16)患儿,各组统计结果比较差异有统计学意义(P <0.05);而在生命特征方面,EV71患儿的体温、高血压以及心率都明显高于 CA16患儿,差异有统计学意义(P <0.05)。经过针对性护理干预后,两组患儿的病情明显改善。结论:肠道病毒71型(EV71)患儿较柯萨奇病毒 A 组16型(CA16)在临床特征以及生命特征方面的临床表现更为明显,因此,应加强临床观察,尽早判断患儿感染病原体,及时针对性地进行治疗和护理。

  • 肠道病毒71型、柯萨奇病毒A组16型相关手足口病临床特征分析

    作者:毛莉萍;秦刚;徐明;李海波;朱勇根;章幼奕

    目的:分析肠道病毒71型(EV71)、柯萨奇病毒A组16型(CA16)相关手足口病(HFMD)的临床特征。方法回顾性分析209例EV71及CA16相关HFMD患儿临床资料,并进行比较。结果普通型HFMD患儿中, EV71感染患儿平均月龄偏大,体温高,呕吐及臀部出疹率高( P <0趑.05);CA16感染患儿男性偏多,发热天数长,心率快,AST、CRP显著升高( P <0.05)。重症HFMD患儿中,EV71所致病例多于CA16所致者( P <0.05),且嗜睡、肌震颤、易惊等临床表现的发生率高,易并发脑膜脑炎、脑干脑炎( P <0.05),实验室指标WBC、血糖(GLU)水平升高(P <0.05);CA16感染患儿男性较多,流涎、腹泻、口腔溃疡发生率高( P <0.05),实验室指标AST、CK、CRP水平显著升高( P <0.05)。结论 EV71及CA16相关HFMD临床特征有所不同,根据临床表现结合实验室指标WBC、GLU、AST及CRP等,有助于区分EV71或CA16感染。

  • 2013年崇左市手足口病实验室检测结果分析

    作者:黄涛;何咚林

    目的 对崇左市2013年手足口病实验室检查结果进行分析,了解手足口病病原学特征,为实验室诊断手足口病提供参考.方法 采集2013年全市各地送检的428例手足口病患者的肛拭子、咽拭子、疱疹液等标本432份,应用Real Time RT-PCR技术检测样本中的肠道病毒71型(Human enterovirus 71,EV 71)、柯萨奇病毒A组16型(Coxsachie virus A16,Cox A16).结果 428例手足口病患者的432份各类样本中,检测到EV 71病毒特异性基因片段阳性41份、Cox A16特异性基因片段阳性67份、无标本检测出EV 71和Cix A16混合感染.428例手足口病患者中,Cox A16的检出率较EV 71高,检出率分别为15.65% (67/428)和9.58% (41/428);13例手足口重症患者中4例均为EV 71感染患者、1例为Cox A16.患者人群男性高于女性(1.84∶1),差异无统计学意义(x2=0.001,P>0.05).肛拭子标本的病毒检出率与咽拭子标本差异无统计学意义(x2=1.344,P>0.05).结论 Cox A16是2013年崇左市手足口病的优势病原体,EV 71是手足口重症患者的主要毒株类型.

  • 2010年邢台市手足口病重症病例检测结果分析

    作者:陈风阳;郑艳红

    目的 对2010年邢台市手足口病重症病例进行病原体检测.方法 收集临床诊断为手足口病重症病例的疱疹液、咽拭子和肛拭子标本385份,采用实时荧光定量PCR对这些标本进行人肠道病毒71型、柯萨奇病毒A组16型和其它肠道病毒的分型检测.结果 人肠道病毒71型阳性率80.00%,柯萨奇病毒A组16型阳性率0.26%,其它肠道病毒阳性率7.53%;阳性率较高的地区为东南部平原人口密集区,发病率较高的年龄组为1~3岁,男性多子女性.结论 实时荧光定量PCR可用于手足口病的病原体分型检测,一旦发现手足口病患者感染的病原体为人肠道病毒71型,可提示临床医生警惕手足口病重症病例的发生,对减少手足口病重症病例发生及防止息儿死亡具有重要作用.

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