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前列腺结石患者结石中纳米细菌的分离和16S rRNA基因的鉴定
目的 检测纳米细菌在前列腺结石中的分布情况,探讨其在前列腺结石发病中的作用.方法 采集前列腺结石患者的前列腺结石标本,分离培养纳米细菌,采用PCR法对纳米细菌16S rRNA基因进行扩增,电泳分析结果并测序.结果 将PCR得到的特异性片段的测序结果与已知纳米细菌16S rRNA序列进行比较,相似度为98%:分值=2 480 bits(1290),期望值=0.0;相似度=1387/1409(98%),缺失=4/1409(0%);链=正/正.结论 PCR法和测序可以作为纳米细菌16S rRNA基因的检测手段;前列腺结石患者的结石中存在着纳米细菌的感染.
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非整倍体患者及其双亲染色体着丝粒点(Cd)结构和核仁组织区(NOR)rRNA基因活性研究
目的研究非整倍体患者及部分患者双亲染色体着丝粒点(Cd)结构变异、核仁组织区(NOR)rRNA基因活性变化和银染近端着丝粒染色体联合( Ag-AA )频率,探讨非整倍体畸变的细胞遗传学机理.方法应用外周血淋巴细胞染色体常规及C、G显带技术和改良的着丝粒点-核仁组织区(Cd-NOR)同步银染方法.结果患者组与对照组相比,C组Cd各项变异频率、G组多数Cd变异频率、Ag-NOR及G组Ag-AA频率、D组Cd-NOR融合频率均明显升高,差异极显著(P＜0.01);患者组分别与其双亲组及父、母亲组相比,多数染色体组Cd变异频率均无显著性差异(P＞0.05);患者组与对照组及其它各组相比,Cd变异频率在A、B、E、F各染色体组均无显著性差异(P＞0.05) .结论非整倍体的形成与染色体着丝粒点Cd变异和NOR rRNA基因活性变化密切相关;各染色体组Cd变异频率及NOR rRNA基因活性变化具有一定差异,且C、D、G组染色体Cd变异在患者与其双亲间存在相似性.这在一定程度上表明人类染色体着丝粒点变异具有某种遗传倾向.
关键词： 非整倍体 着丝粒点 核仁组织区 rRNA基因 近端着丝粒染色体联合 -
基因测序技术在中药质量研究中的应用(Ⅰ)——山东郓城猴头半夏基原的DNA测序鉴别
目的:分析半夏Pinellia ternata(Thunb.)Breit.及其伪品虎掌南星Pinellia pedatisecta Schott的核基因组序列,为半夏正品基原鉴别提供分子依据.方法:采用PCR直接测序技术测定半夏及其伪品的18S rRNA基因核苷酸序列并作序列变异和选择性内切酶谱(PCR-SR)分析.结果:半夏和伪品的18S rRNA序列长度均为1805 bp,根据排序比较,半夏原植物与商品药材间的序列完全相同,虎掌南星亦如此.而半夏与其伪品虎掌南星间则存在序列差异(有 4个变异位点).在半夏18S rRNA序列中有一个限制性内切酶Ase Ⅰ识别位点,通过PCR-SR图谱显示800 bp和900 bp 2个酶切片断,而虎掌南星则无此位点,PCR-SR图谱显示1个未消化的1800 bp片断.结论:通过核基因组序列和PCR-SR图谱差异, DNA测序技术可成为半夏正品基原鉴别准确而有效的分子方法.
