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中国土拉弗朗西斯菌holarctica亚种的遗传多样性
目的 研究国内外土拉弗朗西斯菌的遗传进化关系.方法 选择17个单核苷酸多态性、4个插入/缺失和12个可变数目串联重复,采用单核苷酸多态性和插入/缺失、多位点可变数目串联重复分析方法单独和组合起来对39株土拉菌(10株中国土拉菌和29株已公布测序的土拉菌)进行系统进化分析.结果 组合分析显示,3株中国土拉菌和日本的FSC022被分配到B5;剩余3株中国土拉菌和瑞典的FSC200被分配到B1;3株和美国的OSU18被分配到B2;1株和法国的FTNF002-00、德国的F92与美国的OR96246一起被分配到B4.10株中国土拉菌分为4种亚型,研究表明中国土拉菌具有广泛的遗传多样性.结论 本研究针对土拉菌B型建立了一套简易高效的分型方法,并以此为基础得出土拉菌B型的起源可能是亚洲地区.
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中国土拉弗朗西斯菌B型亚种新亚型的发现与溯源分析
目的 对于北京市1例疑似土拉热病例,进行实验室诊断和溯源分析.方法 2012年7月19日北京市报告1例疑似土拉热病例.从病例血液样本中提取基因组DNA后,采用土拉弗朗西斯菌(土拉菌)3种特异基因(fopA,tul4和16S rRNA)和两种基因分型引物(C1C4和RD1),进行PCR检测并对扩增子测序.另外两个实验室分别平行进行了fopA的PCR扩增和测序.同时采用4个靶位点(fopA、ISFtul2、23kDa和tul4)进行荧光定量PCR检测,并采用11个规范的SNP和4个插入/缺失进行系统进化分析.结果 3种特异基因均得到阳性扩增,测序后得到的片段大小分别为409、407和1 053 bp,经序列比对,显示病例感染的是土拉菌.两种基因分型引物扩增后分别得到了151和924 bp的序列,根据片段长度可判定病例感染的土拉菌为B型亚种.另外两个实验室对于opA的PCR扩增和测序,均得到了阳性结果.4个靶位点的荧光定量PCR检测也均得到了阳性结果,fopA、ISFtul2、23kDa和tul4位点的Ct值分别为30、25、28和30.系统进化分析显示,本研究中土拉菌和俄罗斯来源的土拉菌聚在一个分支上,为B3亚型.结论 该病例确定为土拉热病例,本研究在中国发现了土拉菌B型亚种的一个新亚型.
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中国土拉弗朗西斯菌数目可变串联重复多态性位点特有重复数的研究
目的 采用多位点可变数目串联重复分析(MLVA)方法研究中国土拉弗朗西斯菌(土拉菌)的遗传特征.方法 根据以往文献,选取对B型土拉菌分辨力较高的12个数目可变串联重复多态性(VNTR),对10株中国土拉菌和29株已公布测序的参考菌株进行MLVA分型研究.结果 MLVA分析显示,中国菌株在4个VNTR位点具有特有的重复数:Ft-M3重复数是5,Ft-M18重复数是1,Ft-M20重复数是2,Ft-M21重复数是2.12个VNTR位点组合分析,得出重复数比较接近的是:410108和日本FSC022;410112、410113和德国F92;410116、410117和美国OSU18、俄罗斯LVS.结论 根据特有的重复数,通过检测Ft-M3、Ft-M18、Ft-M20和Ft-M21位点,可以把中国本土土拉菌和国外土拉菌区分开.另外,相对于欧美国家和日本,中国土拉菌具有更多的遗传多样性.
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糖尿病足合并土拉菌感染患者行截肢术的护理
报告5例糖尿病足合并土拉菌感染患者行截肢术的护理.护理要点包括:术前重视患者的心理疏导,冲洗患肢感染创面、监测体温和控制血糖.术后重点观察并保持封闭式负压引流(VSD)的密闭和通畅,通过VSD引流管行臭氧治疗液密闭式灌洗,严密监测控制血糖；同时加强基础护理,协助患者康复,指导糖尿病饮食和按时复查.本组4例康复,1例死于肺栓塞.
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西北4省区蜱虫自然感染3种病原体的分子流行病学研究
目的 了解西北4省区蜱虫自然感染莱姆病螺旋体、土拉弗氏菌和Q热立克次体的情况.方法 采用布旗法收集西北地区内的蜱标本进行分子生物学检测.结果 文献调研显示:西北地区已报道的虫媒疾病共有15种.西北地区内共采集蜱标本2 460只,涉及11个不同蜱种.共有304只蜱标本检测发现莱姆病螺旋体,75只感染土拉弗菌,200只感染Q热立克次体,3种病原体在4个调查点内均存在.共采集到西北地区内当地人群血清725份,共有183份血清存在目标抗体,进一步证实调查疾病的存在.结论 证实西北四省区存在3种蜱媒疾病在,对预防控制具有重要意义.
