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多重耐药肺炎克雷伯菌发现一组gyrA、parC、qnrS基因新变异型
目的 研究多重耐药肺炎克雷伯菌(MDR-KPN)对喹诺酮类药物的耐药机制.方法 收集2008年8月至2010年5月浙江省杭州市和湖州市6所医院共47株MDR-KPN,采用聚合酶链反应(PCR)及序列分析方法分析喹诺酮类药物作用靶位编码基因gyrA、arC和可移动遗传元件介导的喹诺酮类耐药基因[qnrA、qnrB、qnrS、aac(6')-Ⅰ b-cr、qepA].结果 47株MDR-KPN中检出43株(91.5％)gyrA突变、40株(85.1％)parC突变、3株(6.4％)qnrB2、1株(2.1％)qnrB4、8株(17.0％)qnrS1、5株(10.6％) qnrS4、2株(4.3％)aac(6')-Ⅰ b-cr,发现5株gyrA基因新的变异型(GenBank登录号:JN811952、JN811953、JN811954、JN811955、JN811956),5株parC基因新的变异型(GenBank登录号:JN817432、JN817433、JN817434、JN817435、JN817436),qnrS4为首次发现的qnrS变异型(GenBank登录号:JN836269).结论 本组菌株喹诺酮类药物耐药主要与gyrA和parC基因的喹诺酮耐药决定区(QRDR)有义突变相关,部分菌株可检出qnrB2、qnrB4、qnrS1、qnrS4、aac(6')-Ⅰ b-cr等可移动遗传元件介导的喹诺酮类耐药基因.检出qnrS4为国内外首次报道.
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一组泛耐药鲍曼不动杆菌中发现拓普异构酶Ⅳ编码基因新的变异型
目的 调查一组泛耐药鲍曼不动杆菌中喹诺酮类耐药相关基因的存在与变化状况.方法 收集南通大学附属医院2011年1月-2011年4月患者标本中分离的泛耐药鲍曼不动杆菌共20株,采用聚合酶链反应(PCR)及序列分析的方法分析喹诺酮类药物作用靶位基因gyrA与parC,以及可移动遗传元件可介导的喹诺酮类耐药基因[ qnrA、qnrB、qnrS、qepA、aac( 6')-Ⅰ b-cr].结果 本组20株鲍曼不动杆菌均检出gyrA基因第83位密码子TCA→TTA有义突变(氨基酸序列Ser→Leu).parC基因第80位密码子TCG→TTG有义突变(氨基酸序列Ser→Leu),并同时存在3个同义突变(第40位密码子CCC→CCT同义突变;第41位密码子GTA→GTT同义突变;第44位密码子CGT→CGC 同义突变),且本组parC基因序列为新的变异型.可移动遗传元件可介导的喹诺酮类耐药基因qnrA、qnrB、qnrS、qepA、aac(6’)-Ⅰ b-cr均没有检出.结论 本组鲍曼不动杆菌耐喹诺酮类药物可认为主要与喹诺酮耐药决定区(QRDR)突变相关,发现parC基因新的变异型国内未见报道.
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泛耐药鲍氏不动杆菌中发现氨基糖苷类修饰酶aphA1基因新的变异型
目的 调查泛耐药鲍氏不动杆菌(PDRAB)临床分离菌株中氨基糖苷类修饰酶基因和16S rRNA甲基化酶基因的存在情况.方法 收集2010年3-5月临床标本中分离的PDRAB 20株,采用微量肉汤稀释法进行抗菌药物敏感性试验,聚合酶链反应(PCR)方法分析9种氨基糖苷类修饰酶基因和6种16S rRNA甲基化酶基因.结果 20株PDRAB均检出aac(6’)-Ⅰ b、ant(2")-Ⅰ、ant(3")-Ⅰ和aphA1,其余5种氨基糖苷类修饰酶基因和6种16S rRNA甲基化酶基因均未检出；鲍氏不动杆菌WA2859磷酸转移酶aphA1基因经测序为新的变异型.结论 20株PDRAB耐多种氨基糖苷类药物与细菌产aac(6’)-Ⅰb、ant(2")-Ⅰ、ant(3")-Ⅰ和aphA1等4种氨基糖苷类修饰酶相关；发现磷酸转移酶aphA1新的变异型为国内首次报道.
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新变异型耐药鲍氏不动杆菌β-内酰胺酶研究
目的 调查耐药鲍氏不动杆菌β-内酰胺酶基因的存在和变异情况,为临床资料提供参考依据.方法 收集2011年1月-2011年12月ICU患者痰液标本中分离的耐药鲍氏不动杆菌共25株,用聚合酶链反应(PCR)的方法分析34种β-内酰胺酶基因和ISaba1-OXA-23、ISaba1-OXA-66连锁检测.结果 25株耐药鲍氏不动杆菌共检出4种β-内酰胺酶基因:TEM、ADC、OXA-23群、OXA-51群,经进一步测序和比对,21株TEM基因阳性均为TEM-1型84.0％,23株OXA-23群阳性均为OXA-23型92.0％;25株OXA-51群阳性均为OXA-66型100.0％,24株ADC基因阳性中20株为ADC-30型80.0％,1株为新变异型ADC-6 34.0％,3株序列相同的为新变异型ADC-6412.0％,ISaba 1-OXA-23连锁检测结果与OXA-23检测结果相同,即OXA-23阳性菌株均由ISaba1介导;而ISaba1-OXA-66连锁检测均为阴性,提示OXA-66阳性菌株均非ISaba1介导.结论 鲍氏不动杆菌对β-内酰胺类药物耐药主要与产TEM-1、OXA-23型、OXA-66型、ADC-30型基因相关;ADC基因存在新变异型ADC-63和ADC-64是国内外首次报道.
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要重视新的感染性疾病
我们在这里所说的新的感染性疾病,是指在过去的20年左右时间内出现及(或)得到识别或认识的感染性疾病.新的感染性疾病可能包括两种情况.一种是在过去的20多年以前不存在,在近20多年才出现并得到识别和鉴定的感染性疾病,例如埃波拉出血热、艾滋病、新变异型克-雅病(new variant Creutzfeldt-Jakob disease)等.另一种则是多年以前即已存在,但直至近20年左右时间内才得到识别的感染性疾病,如丙型肝炎、幽门螺杆菌感染、莱姆病等.
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从耐药鲍曼不动杆菌中发现β-内酰胺酶ADC基因和膜孔蛋白carO基因新的变异型
目的 调查一组耐药鲍曼不动杆菌中β-内酰胺酶基因和膜孔蛋白基因的存在和变异情况.方法 收集2010年1月至2010年12月浙江某医院ICU患者痰液标本中分离的多耐药和泛耐药鲍曼不动杆菌各10株,用分子鉴定法鉴定菌种,再用聚合酶链反应(PCR)及序列分析的方法分析34种β-内酰胺酶基因与膜孔蛋白carO基因.结果 本组20株耐药鲍曼不动杆菌共检出TEM-1型20株(100％)、OXA-23型10株(50.0％)、ADC-30型12株(60.0％)、ADC基因新的变异型ADC-60型8株(40.0％)(GenBank登录号:JQ692087).10株PDR菌均检出OXA-23型β-内酰胺酶基因,而10株MDR菌则均未检出OXA-23型β-内酰胺酶基因.20株耐药鲍曼不动杆菌膜孔蛋白carO基因均存在有义突变,19株测得序列相同,翻译成氨基酸序列后与鲍曼不动杆菌敏感株(SDF)比较,一致率为76.0％.8号株carO基因序列与其他19株测得DNA序列不同,第351位缺失了12个碱基并导致过早出现终止密码子.结论 本组鲍曼不动杆菌对β-内酰胺类药物耐药主要与产TEM、ADC、OXA-23和carO基因存在有义突变相关.OXA-23型β-内酰胺酶基因阳性是PDR菌耐碳青霉烯类药物的原因.ADC基因存在新变异型:ADC-60是国内外首次报道.
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从耐药产气肠杆菌中首次发现DNA旋转酶A亚单位基因gyrA新的变异型
目的 全面了解2株耐药产气肠杆菌对β-内酰胺类、氨基糖苷类、喹诺酮类的耐药机制.方法 2株耐药产气肠杆菌:zjm001株和zjm002株,分离自2012年3月一家三级甲等医院住院患者送检的血液标本,做gyrA和parC基因扩增、测序、GenBank比对确认菌种,再用PCR法分析39种β-内酰胺类药物获得性耐药基因、14种氨基糖苷类药物获得性耐药基因、7种喹诺酮类耐药相关基因、11种可移动遗传元件标记.结果 zjm001株的β-内酰胺类耐药基因检出CTX-M-3,氨基糖苷类耐药基因检出ant(3”)-Ⅰ,喹诺酮类耐药基因检出gyrA突变,可移动遗传元件检出int Ⅰ 1、ISEcp1、IS26、IS903；zjm002株的β-内酰胺类耐药基因检出ACT-1、CMY-2,喹诺酮类耐药基因检出gyrA突变.2株耐药产气肠杆菌的gyrA基因序列均为新变异型,GenBank登录号分别为:JX268598,JX273641.结论 2株耐药产气肠杆菌的耐药基因与耐药表型相符.在耐药产气肠杆菌中发现DNA旋转酶A亚单位基因gyrA新变异型是国内首次报道.
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人朊蛋白病的研究概况
1重视朊蛋白病的临床研究自1996年3月20日英国海绵状脑病顾问委员会向世界公布英国已经发现10例新变异型Creutzfeldt-Jakob病(nvCJD)以来,立即引起英国、欧洲诸国以及全世界极大关注.1996年5月14～16日世界卫生组织召集世界20几个国家参加的关于nvCJD与动物海绵状脑病的关系的紧急会议.并要求各国成立国家CJD监测中心.尽管欧洲一些国家制定出一些政策和措施,可是新型CJD病例陆续增多.迄今已有近百人因吃了疯牛病的牛肉而感染nvCJD.中国农业部于2001年2月14日发布的《中国疯牛病风险分析与评估》报告中称疯牛病传入中国的风险极小.但是1983年四川省从英国进口的羊中发现了羊海绵状脑病.疯牛病在西欧的蔓延势头仍然有增无减,除英国发现的180 000头外,法国、爱尔兰、西班牙、葡萄牙、荷兰、丹麦等11个国家发现了疯牛病.远离欧洲的日本、韩国也发现了可能与动物海绵状脑病有关的人海绵状脑病,即nvCJD.其实亚洲许多国家都从英国进口过种牛种羊以及相关的饲料,从欧洲进口奶粉、炼乳等.
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Creutzfeldt-Jakob 病的诊断新进展
Creutzfeldt-Jakob病(CJD)为1920年和1921年由Creutzfeldt和Jakob先后报道的,是以迅速进展的痴呆为特征,伴有共济失调、肌阵挛、视力障碍、锥体系及锥体外系受损的症状和体征的一组病例.其发病率为1/100万,是人类常见的朊蛋白病之一,为异常的朊蛋白(PrPSc)在脑内沉积所致.该病主要分为4型,即散发型、家族型、医源型和新变异型.目前只有神经病理检查或用免疫组化方法证实在人脑组织中有异常PrPSc沉积才能确诊[1].
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重视朊蛋白病的临床诊断与防治
自1996年3月20日英国海绵状脑病顾问委员会向世界公布英国已经发现10例新变异型Creutzfeldt-Jakob病(nvCJD)以来,立即引起英国、欧洲诸国以及全世界极大关注.1996年5月14～16日世界卫生组织召集世界20多个国家参加的关于nvCJD与动物海绵状脑病的关系的紧急会议.并要求各国成立国家CJD监测中心.尽管欧洲一些国家制定出一些政策和措施来防止疯牛病的蔓延,可是新型CJD病例数陆续增多.迄今已有近百人可能因吃了疯牛病的牛肉而感染nvCJD.中国农业部于2001年2月14日发布的<中国疯牛病风险分析与评估>报告中称疯牛病传入中国的风险极小.但是1983年四川省从英国进口的羊中发现了羊海绵状脑病.疯牛病在西欧的蔓延势头仍然有增无减,除英国发现的180000头外,法国、爱尔兰、西班牙、葡萄牙、荷兰、丹麦等11个国家同样发现了疯牛病.
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泛耐药鲍曼不动杆菌中发现β-内酰胺酶基因新的变异型ADC-65、ADC-66
目的 调查一组泛耐药鲍曼不动杆菌(PDR-ABA)中β-内酰胺酶基因存在和变异情况.方法 收集2010年7月至2010年12月某医院住院患者之痰液标本中分离的泛耐药鲍曼不动杆菌共20株,用分子鉴定法鉴定菌种,再用聚合酶链反应(PCR)及序列分析的方法分析A类～D类共34种β-内酰胺酶基因.结果 本组20株泛耐药鲍曼不动杆菌共检出TEM-1型20株(100.0％)、PER-1型16株(80.0％)、OXA-23型20株(100.0％)、OXA-66型20株(100.0％)、ADC-30型16株(80.0％)、ADC基因新的变异型ADC-65型3株(15.0％)(GenBank登录号:JX109941)、ADC-66型1株(5.0％)(GenBank登录号:JX109942).结论 本组鲍曼不动杆菌对β-内酰胺类药物耐药主要与产TEM-1、PER-1、OXA-23型、OXA-66型、ADC等β-内酰胺酶基因相关,OXA-23型β-内酰胺酶基因阳性是泛耐药菌耐碳青霉烯类药物的原因.发现ADC基因存在新变异型:ADC-65、ADC-66是国内外首次报道.
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散发型克雅病6例的MRI诊断
与疯牛病有关的人类疾病称为新变异型人克雅病(Creutzfeldt-Jakob diease,CJD),是一种慢性、退行性、致死性的中枢神经系统疾病.该病是由具有传染性的朊蛋白(prion protein,PrP)感染所引起的以海绵样变性为病理特征的亚急性或慢性海绵样脑病.
