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重庆市结核患者耐药结核杆菌embB306分子突变特征研究
目的 了解重庆结核杆菌的embB306突变特征,评价其作为诊断乙胺丁醇(ethambutol,EMB)耐药结核杆菌分子标记物的临床应用价值.方法 采用DNA测序方法分析重庆市结核患者痰中分离的51株EMB耐药结核杆菌和50株EMB敏感株的embB基因突变特征,与传统药敏实验进行诊断学试验评价embB306突变作为EMB耐药株分子标记物的临床应用价值.结果 embB306突变率在51株EMB耐药和50株敏感结核杆菌中分别为75.5%、6%;其中来自复治病例的EMB耐药菌株的embB306突变率是87.5%,高于来自初治病例的48.1%;embB306突变率随菌株耐药数量增加而升高,embB306在EMB耐药的耐多药菌株(Multidrug-Resistant Tuberculosis,MDR-TB)中的突变率高于EMB耐药的非MDR-TB和EMB敏感的MDR-TB的突变率;以embB306突变诊断EMB耐药菌株的诊断学试验评价主要指标为:灵敏度为66.7%;特异度为94.0%;准确度为80.2%;Youden指数为60.7%.结论embB306突变是重庆地区结核杆菌产生EMB耐药性的主要分子机制,且与耐药数量和治疗时间有关,其作为EMB耐药菌株诊断的分子标记物具有一定临床应用价值.
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结核杆菌embB基因突变与临床治疗的关系
目的:了解结核菌耐乙胺丁醇药敏实验和embB基因突变情况,研究其临床应用价值.方法:通过聚合酶链反应(PCR)-单链构象多态性(SSCP)技术初步鉴定 96 株分支杆菌临床分离株的菌种,并进一步分析其embB基因.结果:分析 56 株分支杆菌临床分离株的 16 S rDNA SSCP电泳图谱均与结核分支杆菌标准株相同.21 株药物敏感株的embB基因SSCP均泳动正常;35 株耐乙胺丁醇分离株中,17 株(48.6%)embB基因SSCP泳动异常.结论: 部分结核分支杆菌耐乙胺丁醇是由于其embB基因突变所致.且embB基因突变均发生在药敏实验高浓度区.
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生物信息资源在耻垢分枝杆菌EmbB多克隆抗体制备中的应用
目的 建立通过生物信息学手段制备耻垢分枝杆菌(M.smegamatis)EmbB (Sm EmbB)多克隆抗体的方法.方法 应用生物信息资源在Sm EmbB的N端寻找一段18个氨基酸的特异短肽,合成后将其与白喉类毒素分子相连,以所形成的复合物免疫动物制备抗Sm EmbB的多克隆抗体.结果 Western blot结果显示获得的抗体可特异地作用于Sm EmbB.结论 通过生物信息学手段制备多克隆抗体方法的建立解决了对蛋白质功能研究中缺乏抗体的困扰,为特殊蛋白质的抗体制备提供了借鉴.
