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分子诊断技术在分支杆菌菌种鉴定中的应用价值
在微生物分类中,分支杆菌属于裂殖菌纲、放线菌目、分支杆菌科、分支杆菌属.分支杆菌种类繁多,<伯杰系统细菌学手册>(第九版)所确认的分支杆菌有54种,临床可见能引起人类疾病的主要是结核分支杆菌(MTB),此外还有堪萨斯、鸟、胞内、猿猴、蟾蜍、海、溃疡、瘰疬、马尔摩、苏加、偶然、龟、脓肿等10余种非结核分支杆菌(NTM).NTM病具有与结核病临床表现相似的全身中毒症状和局部损害,在无菌种鉴定结果的情况下,与结核病难以鉴别.NTM与MTB药物敏感性大不相同,许多NTM对抗结核药物天然耐药,不同NTM菌种对药物敏感性亦不相同,化疗方案应根据不同菌种有所不同,因此,分支杆菌菌种鉴定不仅在流行病学上,而且在临床诊断和治疗上均有重要意义.而目前传统的分支杆菌菌种鉴定方法依据生物学表型特征及细胞化学反应多项指标综合分析,方法复杂,费时,急需建立快速、简便、准确的分支杆菌菌种鉴定方法.近年来,随着分子生物学理论及技术,特别是以聚合酶链反应(PCR)为基础的各种分子诊断技术的快速发展,分子诊断技术已在分支杆菌菌种鉴定中得以研究应用,文中就此做一概述.
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结核分支杆菌L型
结核分支杆菌属于容易发生细胞壁缺陷变异的细菌,其不但能够被多种因素诱导发生细胞壁缺陷变异,而且在其生长繁殖的过程常常可自发形成细胞壁缺陷细菌. 细胞壁缺陷结核分支杆菌(cell wall deficient M. tuberculosis)存在的现象早已在临床标本或人工培养基内发现,曾将其称为"Much颗粒"或认为是结核分支杆菌生长繁殖周期的一个环节[1].近年来的研究证实结核分支杆菌丧失细胞壁成为L型后仍然能够生长繁殖,其生物学特性、致病性、药物敏感性或染色体DNA结构等特性可发生改变.
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结核杆菌embB基因突变与临床治疗的关系
目的:了解结核菌耐乙胺丁醇药敏实验和embB基因突变情况,研究其临床应用价值.方法:通过聚合酶链反应(PCR)-单链构象多态性(SSCP)技术初步鉴定 96 株分支杆菌临床分离株的菌种,并进一步分析其embB基因.结果:分析 56 株分支杆菌临床分离株的 16 S rDNA SSCP电泳图谱均与结核分支杆菌标准株相同.21 株药物敏感株的embB基因SSCP均泳动正常;35 株耐乙胺丁醇分离株中,17 株(48.6%)embB基因SSCP泳动异常.结论: 部分结核分支杆菌耐乙胺丁醇是由于其embB基因突变所致.且embB基因突变均发生在药敏实验高浓度区.
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女性生殖器结核的治疗进展
结核菌属放线菌目、分支杆菌科、分支杆菌属,分人型、牛型、非洲型和鼠型四类.使人类致病的主要是人型结核菌.
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儿童非结核分支杆菌脑膜炎1例误诊分析
非结核性分枝杆菌(NTM)是指在分枝杆菌属中,除了结核分枝杆菌复合群(人型、牛型、非洲型和田鼠型结核分枝杆菌)和麻风分枝杆菌以外的分枝杆菌。非结核分支杆菌脑膜炎是由 NTM 引起。由于非结核分支杆菌与结核分支杆菌同为分支杆菌属,故非结核分支杆菌脑膜炎与结核分支杆菌脑膜炎的临床症状、X 线胸片特点极为相似,单纯靠胸片和痰液结核分枝杆菌抗酸染色涂片是无法区分的。临床上往往在没有进行抗酸杆菌菌型鉴定的情况下,就给予充分抗结核治疗是造成本病误诊的重要原因。现将1例儿童非结核分支杆菌脑膜炎误诊病例报道如下。
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PCR直接检测皮肤分枝杆菌感染的研究
目的 探讨PCR直接检测皮肤分枝杆菌感染作为诊断的可能性.方法 PCR检测方法及培养方法(L(o)wenstein-Jensen培养基)比较分枝杆菌纯菌悬液、模拟皮肤分枝杆菌感染标本前处理前后、疑似皮肤分枝杆菌感染的临床标本前处理前后的检测结果.结果 分枝杆菌纯菌悬液的PCR法和培养法敏感性皆为1×102个菌细胞/mL.模拟临床标本在经过前处理后在浓度为1×102个菌细胞/mL的数量级上PCR检测阳性率为60%,而未经过前处理的模拟临床标本在此数量级上PCR检测阳性率为0,培养方法的阳性率为100%,但在浓度为1×103个菌细胞/mL数量级上PCR检测阳性率为100%.37例临床疑似皮肤分枝杆菌感染标本经前处理后,PCR检测7例阳性,而未经前处理的标本同法检测2例阳性,但培养方法可检出9例阳性.结论 临床皮肤标本经前处理后,PCR检测的敏感性已接近80%,但能明显缩短检测时间.
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用聚合酶链反应检测结节病皮损中分支杆菌16S rRNA基因和结核杆菌DNA
目的探讨分支杆菌感染在结节病发病中的可能作用.方法用聚合酶链反应(PCR)检测了12例结节病患者皮损中分支杆菌16S rRNA基因片段和特异性结核分支杆菌复合物IS6110 DNA片段.结果12例结节病患者中,6例皮损中检出了分支杆菌16S rRNA基因,其中5例证实为结核分支杆菌,另1例为非结核分支杆菌.PCR扩增所得到的IS6110 DNA片段经进一步测序证实.结论分支杆菌特别是结核杆菌感染可能是结节病的病因之一.
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抗酸菌及其L型感染与慢性前列腺炎和不育的关系
目的:探讨抗酸菌及其L型感染与原因不明的慢性前列腺炎和不育的关系.方法:普通细菌培养阴性的前列腺液和不育者精液作涂片,抗酸染色;并以健康、有生育力男性的前列腺液与精液作对照.结果:50例慢性前列腺炎患者中32%检出抗酸菌或其L型,不育患者精液中28.5%检出抗酸菌或L型,有时可见数个抗酸染色阳性圆球体粘附于精子头部.两组检出率均高于正常对照组(P<0.05和P<0.05).结论:抗酸菌及其L型感染可能是引起慢性前列腺炎及不育的重要原因之一.
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非结核分支杆菌的研究现状
非结核分支杆菌系由结核分支杆菌(包括结核分支杆菌、牛分支杆菌、非洲分支杆菌、田鼠分支杆菌)和麻风分支杆菌以外的非结核分支杆菌(Nontuberculous Mycobacterium,NTM ),其中部分是致病菌或条件致病菌.近年来NTM呈上升趋势,成为人们关注的重要课题.
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分支杆菌分子分型及鉴定的研究进展
分支杆菌属于裂殖菌纲、放线菌目、分支杆菌科、分支杆菌属.分支杆菌种类繁多,有报道分支杆菌已达150种以上.分支杆菌属分为结核分支杆菌复合群[(mycobacteria tuberculosis complex,MTC),包括结核分支杆菌、牛分支杆菌、非洲分支杆菌、田鼠分支杆菌]、麻风分支杆菌以及非结核分支杆菌(nontuberculosis mycobacteria,NTM).
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浅谈基层结核病实验室的安全防护建设
结核病是由分支杆菌属引起的一种慢性传染性疾病,临床上以肺结核病人为多见,传染源主要是排菌的肺结核病人.近年全球结核病死灰复燃,为有效控制结核病疫情,我国政府不断加大对结核病的控制力度,结核病实验室检查,尤其是细菌学检查是发现传染源的主要手段,是确诊结核病和选择治疗方案的主要依据,也是考核疗效、评价防治效果的可靠标准.因此,做好实验室人员的安全防护工作显得尤为重要.九师医院及九师各团场医院也都设置了结核病实验室,开展结核病痰涂片染色显微镜检查,但基层医疗机构的条件有限,如何在现有的条件下正常开展工作并做好实验室安全防护,笔者认为应做好以下几点.