首页 > 文献资料
-
重组伴侣蛋白60外膜蛋白免疫诱导抗脑膜炎奈瑟菌的杀菌抗体应答
得自脑膜炎球菌定植个体的血清以及得自脑膜炎球菌性疾病患者的血清都含有针对奈瑟球菌热休克蛋白/伴侣蛋白60( Chp60)蛋白的特异性抗体。在这项研究中，作者用含在生理盐水中的重组Chp60、与氢氧化铝吸附的Chp60、含在脂质体中的Chp60以及含在去污剂微粒中的Chp60免疫小鼠，加或者不加单磷酰类脂A 佐剂。结果表明能够诱导高度而且水平类似的(P>0.05)的抗体，这种抗体能够识别外膜上的Chp60。 FACS分析和免疫荧光试验测定表明Chp60是在脑膜炎球菌表面表达的。免疫印迹测定证实小鼠抗Chp60血清能够识别脑膜炎球菌菌体裂解物中的相对分子质量为60000的蛋白，然而，用人热休克蛋白60进行的交叉反应也能观察到这种结果。通过比较菌株的翻译蛋白序列，发现在细菌性分离物基因组序列库中脑膜炎球菌有40种不同的等位基因，其中作者选择的得自定植个体和病人的13株分离物就有另外的5种新的等位基因。通过对所有菌株的非丰腴翻译氨基酸序列进行比较，显示出在脑膜炎球菌Chp60蛋白之间有≥97%的同一性，在作者测定的13株菌株中，这种蛋白以高度的和类似的水平进行表达。抗同源性菌株MC58的杀菌性抗体(平均交互滴度32~64)则由接种含在脂质体中的Chp60、含在去污剂微粒中的Chp60以及吸附于氢氧化铝的Chp60而诱导出来。杀伤活性也受到加入单磷酰类脂A 以及所采用的投递配方的影响。抗 Chp60抗血清的生物学活性不能明显地延伸到异源性脑膜炎球菌菌株。因此，为了提供广谱的覆盖率，基于Chp60的疫苗还需鉴定多种蛋白和特异性杀菌性表位。
-
西部马脑炎病毒基因组序列的半套式RT-PCR检测
为进一步提高RT-PCR检测西部马脑炎病毒(WEE)病毒基因组方法的敏感性,采用半套式PCR扩增病毒基因组特异序列.首先采用逆转录法将病毒基因组RNA逆转录为cDNA,然后以此cDNA为模板,进行扩增.对扩增后电泳检查无可见DNA条带的产物进行半套式PCR;与此同时对扩增的循环数、Mg++浓度和退火温度等条件进行了优化,以进一步提高扩增的特异性.结果第一轮PCR未扩出特异性片段的WEE病毒稀释度,其半套式扩增出特定大小的DNA产物;同时优化的条件提高了扩增产物的特异性.扩增产物约为190bp的单一DNA片段,其大小与预期的相一致.结果表明采用半套式RT-PCR方法检测WEE病毒的基因组序列的敏感性可提高100倍以上.
-
人类基因组学研究概况及其在医学遗传学研究中的应用
1人类基因组学研究概况人类基因组计划(human genome project,HGP)、曼哈顿原子弹计划和阿波罗登月计划被称为20世纪三大科学工程,与后两者不同的是HGP无任何政治和军事目的,只是在科技全球化动力之下产生的大型贯穿于21世纪的科学研究项目.全球合作的HGP是1990年10月在美、英、日、法、德和中国6个国家的参与之下启动的,目的是找出所有人类基因,并研究其在DNA分布上的位置,绘制出完整的人类基因组图谱,破译出人类全部遗传信息,使得人类在分子水平上全面认识自我.在人类发现DNA双螺旋结构50年后的今天,6个国家科学家经13年的努力,用27亿美元,在2003年4月14日胜利完成了人类基因组序列"全书"的绘制工作,比原计划提前了2年,节省3亿美元.已完成的序列图覆盖人类基因组所含基因区域的99%,精确率达99.99%,"六国政府首脑关于完成人类基因序列图的联合声明"中明确指出:"全世界都可以通过因特网上的公共数据库不受限制地免费获取这些信息"[1].
-
中国与人类基因组计划
基因组是一个生命体遗传信息的总和.人类单倍体基因组序列含3×109碱基对,包括约4～10万个基因.以认识人类自身为目标的人类基因组计划(Human Genome Project,HGP),是人类科学史上一项伟大的科学工程.HGP自1990年正式启动以来,经过全球科学共同体的努力,提前完成了遗传和物理作图,于1998年转入大规模测序的阶段.
-
西藏地区广泛存在的乙肝病毒株系
目的：获得西藏地区的乙肝病毒全基因组序列。方法：从西藏地区收集的26个HBsAg阳性携带者血清样本，从中抽提HBV的DNA并对全基因组织进行了扩增、测序。结论：首次获得西藏地区特有的乙肝病毒全基因组序列。
