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鼠疫耶尔森菌Ⅲ型分泌系统相关基因的功能研究
目的 研究鼠疫耶尔森菌pCD1质粒上编码的假定蛋白YpCD1.08、YpCD1.09、YpCD1.16与pCD1质粒编码的Ⅲ型分泌系统(T3SS)在功能上的相关性.方法 采用λ-Red重组系统构建鼠疫耶尔森菌YpCD1.08、YpCD1.09、YpCD1.16基因的突变株,通过测定分别培养于26℃下有钙、37℃下无钙和有钙TMH培养基中的以上3种突变菌株及野生菌株的生长曲线,分析突变菌株的低钙响应情况；在26℃和37℃条件下分别培养鼠疫菌突变菌株,并提取总RNA,采用定量PCR分析3种基因的转录水平及其对温度的依赖性；用β-内酰胺酶报告分子的方法分析3种基因的突变对效应蛋白转运的影响.结果 在26℃和37℃低钙培养条件下,突变菌株△YpCD1.08、△YpCD1.09、△YpCD1.16的生长曲线与野生型菌株一致,表明其低钙响应正常.YpCD1.08、YpCD1.09、YpCD1.16基因在37 ℃与26℃转录水平的比值分别为2.3±0.3、2.3±0.5、3.2±0.7,表明这3个基因在鼠疫菌中均有转录,且其转录水平受温度调控,与T3SS基因转录水平的温度依赖性一致.β-内酰胺酶报告分子实验结果表明,突变菌株△YpCD1.08在140 min时477与520 nm波长的发光强度的比值为2.5,而野生型菌株仅为1.8,表明△YpCD1.08菌株对YopE的转运能力要高于野生株,而其他两个突变株与野生株类似.结论 YpCD1.08、YpCD1.09、YpCD1.16基因有可能是T3SS的新成员,假定蛋白YpCD1.08可能参与效应蛋白YopE的转运及其调控.
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衣原体致病机制研究进展
衣原体是一种专性胞内寄生的病原微生物,种间组织嗜性有差异,有些还是人兽共患病病原菌;其感染部位广泛、途径多,临床以沙眼、肺炎和泌尿生殖道感染多见;鹦鹉热衣原体还曾作为经典的生物战剂;衣原体由于胞内寄生,致病机制复杂,本文从三型分泌系统、衣原体质粒、脂多糖、新发现毒力因子CT135和CPAF蛋白这五个方面简要综述了衣原体的致病机制,提出以鹦鹉热衣原体为模型研究衣原体属致病机制的优越性,为进一步深入分析衣原体的致病机制提供参考.
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肠出血性大肠杆菌O157:H7 z0986-z1444双缺失突变株构建
目的 采用Red重组方法敲除肠出血性大肠杆菌(EHEC)O157:H7 z0986和z1444基因,构建双缺失突变株.方法 首先构建z0986、z1444打靶片段;其次以电击法转化感受态细胞,之后通过PCR鉴定所得菌株;终所得阳性单克隆测定生长曲线.结果 z1444单基因缺失突变株(Δz1444/933)及z0986-z1444双基因缺失突变株(Δz0986/Δz1444/933)构建成功,其生长曲线与野生型EHEC O157:H7差异均无统计学意义.结论 z0986与z1444基因缺失对EHEC的生长无影响.构建Δz1444/933及Δz0986/Δz1444/933为深入研究z1444基因的功能及作用机制奠定了基础.
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鼠疫耶尔森氏菌逃避机体天然免疫作用研究进展
鼠疫是由鼠疫耶尔森氏菌(鼠疫菌)引起的A类烈性传染病,历史上发生的三次世界性大流行带来了巨大灾害.鼠疫菌是一种特殊的胞内菌,可突破皮肤黏膜屏障结构产生皮下感染,侵入机体的细菌在感染部位遭遇具吞噬作用的中性粒细胞和单核-巨噬细胞等.
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鹦鹉热衣原体致病机制研究进展
鹦鹉热衣原体（Cps）是一种专性真核细胞内寄生，有独特的二相型发育周期，可形成具有感染能力的原体（EB）和具有繁殖能力的网状体（RB），革兰染色阴性的细菌。 Cps 归类于衣原体科中的衣原体属，早期 Everett 等［1］将其归类为嗜衣原体属，国内虽一直沿用这样的分类体系，但国际衣原体委员会已明确 Cps 属于衣原体属，同时取消嗜衣原体属分类。 Cps 可感染人和畜，产生多种临床特征。 Cps 因为其致病性强，且作为生物战剂的特殊性，少有实验室能进行深入研究，对 Cps 致病机制的阐述更是鲜有报道，本文结合衣原体属其他种的毒力因子，综述了 Cps 可能毒力因子的致病机制。
