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E2F3a在U251胶质瘤细胞中的功能研究
背景与目的:E2F3a是一种重要的转录激活因子,在多种肿瘤组织中均呈现表达上调.E2F3a在恶性化程度较高的神经胶质瘤中表达较高,目前它在胶质瘤细胞中的功能尚不清楚.本文的目的是研究E2F3a对U251胶质瘤细胞周期和凋亡的影响.方法:通过脂质体介导质粒转染在U251细胞中过表达E2F3a;用Westernblotting检测细胞内E2F3a蛋白质的表达水平;用PI-核DNA染色结合流式细胞术分析细胞周期分布;用Annexin V-PE和7-AAD染色结合流式细胞术分析细胞凋亡比例;用实时荧光定量PCR方法测定细胞内A2、B1、D1和E细胞周期素mRNA的相对表达水平.结果:与空载体转染对照组相比,E2F3a过表达可将位于S期的细胞比例提高28％(P＜0.01),将位于G0/G1期和G2/M的细胞比例分别降低15％和13％(P＜0.01).E2F3a过表达对细胞凋亡无明显影响.进一步研究发现,E2F3a可显著上调细胞周期素D1和E的mRNA表达,而不影响周期素A2和B1的mRNA表达.结论:E2F3a是胶质瘤细胞增殖的促进因子,它可通过上调细胞周期素D1和E的表达加速细胞由G1期进入S期.
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p73基因在肺腺癌组织中的表达
目的:p73基因在肺腺癌与癌旁正常组织中表达情况及突变的研究.方法:采用竞争性定量RT-PCR和PCR-SSCP方法检测62例肺腺癌及其癌旁非癌组织中p73基因突变情况.结果:①通过定量PCR分析,肺腺癌组织中p73的表达量与正常对照组织表达量存在显著差异(P＜0.01);②在21例中高分化标本中检出9例呈中高表达,在41例低分化标本中检出32例呈中高表达,两者之间存在显著差异(P＜0.01);③p73基因表达程度在29例I-II期标本中检出14例呈中高表达,33例III-IV期标本中检出18例呈中高表达,两者之间无显著差异(P＞0.05);④PCR-SSCP未检测出基因突变.结论:p73基因mRNA的表达可能与肺腺癌发生,发展和分化程度有关,与临床分期无关.
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长链非编码RNA MIR100HG对乳腺癌细胞迁移的影响
长链非编码RNA MIR100HG是小RNA(microRNA)的宿主基因,在其内含子中编码了三个小RNA,包括miR-100,miR-125b-1,let-7a-2.根据文献报道,MIR100HG在肿瘤进程中扮演重要的角色.本实验通过RNA敲降及过表达等实验手段研究MIR100HG在乳腺癌中的作用.本研究发现MIR100HG在乳腺癌细胞系中通过促进细胞迁移进而影响肿瘤发生发展进程.
