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补肾中药对雄激素致不孕大鼠基质金属蛋白酶-9的影响
目的:观察补肾中药治疗前后雄激素致不孕大鼠模型(ASR)基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的变化.方法:建立雄激素致不孕大鼠模型,通过阴道涂片筛选各组大鼠.进行MMP-9原位杂交,显微镜检并电脑摄像,图像分析卵巢MMP-9RNA信号表达强度.结果:MMP-9mRNA的表达面积和表达强度:模型组＜正常组＜阳性组＜中药组(P＜0.01).结论:卵巢基质金属蛋白酶-9mRNA在雄激素致不孕大鼠表达水平较其它组为低,而中药促排卵方对其有一定的调节功能.
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补肾中药天癸方对雄激素致不孕大鼠胰腺及卵巢雄激素受体的影响
目的:探讨补肾中药天癸方对雄激素致不孕大鼠(ASR)促排卵的作用机制.方法:新生SD雌性大鼠随机分为3组,ASR模型组:9d龄SD雌性大鼠皮下注射丙酸睾丸酮;中药组:ASR模型在81d龄起每日灌服天癸方;对照组:9d龄SD雌性大鼠皮下注射中性茶油.在106d龄左右(动情前期),放免法测定血△4-雄烯二酮(△4-A)、总睾酮(TT)、游离睾酮(FT)、雌二醇(E2)、胰岛素(Ins)和C-肽(C-P),RT-PCR方法检测胰腺及卵巢雄激素受体(AR)mRNA表达水平,并观察中药治疗前后上述指标的变化.结果:ASR模型血△4-A、TT、FT、E2、Ins、C-P均显著高于对照组(P<0.05,P<0.01),胰腺、卵巢的AR mRNA表达水平明显升高(P<0.01);中药天癸方治疗后,排卵率为58%.各项血激素及胰腺AR mRNA表达水平明显下降,与模型组比较有显著性差异(P<0.05,P<0.01),卵巢AR mRNA水平与治疗前相比无明显改变.结论:ASR模型血雄激素水平升高,上调胰腺、卵巢的AR mRNA表达,引起高胰岛素血症和无排卵.天癸方可降低血雄激素和胰岛素,使胰腺AR mRNA表达水平下降,纠正ASR模型的内分泌-代谢失调状态,虽然卵巢的AR mRNA表达水平仍较高,但在正常的激素环境下仍出现了排卵.
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补肾调经方对雄激素致不孕大鼠卵巢组织抗氧化的实验研究
无排卵是不孕症、闭经、功血、多囊卵巢综合征等多种妇科疾病共同的病理现象,其发病机制不明.虽有众多学者从多方面进行了研究,但目前尚未查见无排卵与氧化损伤、抗氧化能力方面的研究报道.本实验旨在通过研究雄激素致不孕大鼠(ASR)、正常大鼠及应用补肾调经方后ASR卵巢组织丙二醛(MDA)水平、总抗氧化能力(T-AOC)的变化情况,探讨排卵障碍时卵巢氧化损伤、抗氧化损伤能力情况及补肾调经方对其的影响.
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补肾活络中药对雄激素致不孕大鼠卵泡数、子宫内膜面积和内分泌的影响
目的 观察补肾活络中药用药前后雄激素致不孕大鼠(ASR)卵巢卵泡数、子宫内膜面积和内分泌的变化.方法 建立雄激素致高胰岛素、高雄激素不孕大鼠模型,通过阴道涂片筛选各组大鼠;卵巢、子宫重量采用电子天平称重法,血清促卵泡刺激素(FSH)和促黄体生成素(LH)的测定采用放免法,卵泡数的测定采用免疫组化法.结果 卵巢、子宫重量分析:正常组＞中药组＞阳性组＞模型组;卵泡数、子宫内膜面积免疫组化定量分析:正常组＞中药组＞阳性组＞模型组;血清FSH和LH水平:阳性组＞正常组＞中药组＞模型组.结论 中药补肾活络方能增加ASR卵巢重量,增加卵巢各级卵泡总数,使卵巢激素的靶器官子宫明显增重,内膜明显增厚,能增强垂体的内分泌功能,促进促性腺激素的合成和释放,提高垂体促性腺激素水平,以促进卵泡的发育和卵巢的排卵.
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中药天癸方对雄激素致不孕大鼠下丘脑前阿黑皮原mRNA的影响
目的：探讨中药天癸方对雄激素致不孕大鼠(ASR)的作用机理。方法：取新生SD雌性大鼠随机分为3组，于9日龄时注射丙酸睾丸酮，制成ASR模型，用中药天癸方治疗14天，于106日龄左右(动情前期)处死，并取血清，用放免法测定总睾酮(TT)、游离睾酮(FT)，下丘脑前阿黑皮原mRNA(POMC mRNA)。结果：模型组大鼠均无排卵，对照组(未造模)大鼠均排卵，中药组大鼠排卵率为58%。TT和FT模型组均明显高于对照组和中药组(P＜0.01)。3组大鼠在下丘脑弓状核神经元雄激素受体(AR)和β-内啡肽(β-EP)共存。下丘脑POMCmRNA水平模型组高于对照组(P＜0.01)，中药组降至基本正常。结论：ASR模型的血清雄激素水平升高，有可能通过下丘脑β-EP神经元上的AR引起POMCmRNA表达增加，中药天癸方可使血清雄激素水平和下丘脑POMCmRNA下降。
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中药天癸方对雄激素致不孕大鼠下丘脑Leptin 受体及神经肽Y mRNA的影响
目的:从基因转录水平探讨中药天癸方对雄激素致不孕大鼠(ASR)肥胖及无排卵的影响.方法:采用α-32 P标记瘦素(leptin)受体(OB-R)及神经肽Y(NPY)寡核苷酸探针原位杂交、放射自显影技术结合图像分析,观察中药治疗前后下丘脑弓状核(ARC)两种物质mRNA的表达变化.结果:ASR中ARC的NPY基因表达水平明显增加(P＜0.01),OB-R基因表达水平明显降低(P＜0.01),ASR呈肥胖、无排卵状态.用中药天癸方治疗后,NPY基因表达下降,OB-R基因表达上升至正常大鼠水平.结论:ASR肥胖及无排卵可能与NPY mRNA过度表达、OB-R mRNA数目异常有关,中药可调节NPY和OB-R mRNA表达而发挥减肥及促排卵作用.
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重组人促卵泡激素对雄激素致不孕大鼠局灶性脑缺血脑皮质RAS相关基因表达的影响
目的:探讨体内性激素的改变对局灶性脑缺血脑皮质肾素-血管紧张素(RAS)相关基因表达的影响.方法:建立雄激素致不孕大鼠(ASR)模型,给予果纳芬(rhFSH)后应用线栓法建立大鼠大脑中动脉阻塞 (MCAo)模型.大鼠随机分为AsR+假手术(sham)组、ASR+rhFSH+sham组、ASR+MCAO组及ASR+rhFSH+MCAO组,每组12只.2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)法检测大脑的缺血面积}逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测脑皮质血管紧张素原(AGT)、血管紧张素转换酶(ACE)、血管紧张素受体1(AT1)和血管紧张素受体2(AT2)的mRNA表达.结果:TTC染色显示,ASR+MCA0组及ASR+rhFSH+MCAO组大鼠大脑均可见苍白色的缺血区域.ASR+MCAO组及ASR+rhFSH+MCAO组脑梗死面积均明显大于ASR+sham组及ASR+rhFSH+sham组(P<0.05),但ASR+rhFSH+MCAO组脑组织梗死面积明显小于ASR+MCAO组(P<0.05).与ASR+sham组比较,ASR+rhFSH+sham组的AGT、ACE、AT1及AT2 mRNA表达均无明显改变(P>0.05),而ASR+MCAO组大脑皮质缺血侧ACE、ATl及AT2 mRNA的表达均明显增高(P<0.05),但AGT未见明显改变.与ASR+rhFSH+sham组比较,ASR+rhFSH+MCAO组缺血侧大脑皮质AGT、ACE、AT1及AT2 mRNA的表达均无明显改变(P>0.05).结论:雄激素的增高通过激活RAS系统参与了缺血性神经细胞的损伤,而rhFSH通过下调RAS系统减轻脑缺血损伤.
关键词： 梗死 大脑中动脉 雄激素致不孕大鼠 肾素-血管紧张素系统 -
中药天癸方对雄激素致不孕大鼠下丘脑Leptin受体及神经肽Y mRNA的影响(摘要)
目的 从基因转录水平探讨中药天癸方对雄激素致不孕大鼠(ASR)肥胖及无排卵的影响。方法 采用α-32P标记瘦素(leptin)受体(OB-R)及神经肽Y(NPY)寡核苷酸探针原位杂交、放射自显影技术结合图像分析，观察中药治疗前后下丘脑弓状核(ARC)两种物质tRNA的表达变化。结果 ASR中ARC的NPY基因表达水平明显增加(P＜0.01)，OB-R基因表达水平明显降低(P＜0.01)，ASR呈肥胖、无排卵状态。用中药天癸方治疗后，NPY基因表达下降，OB-R基因表达上升至正常大鼠水平。结论 ADR肥胖及无排卵可能与NPY mRNA过度表达、OB-R tRNA数目异常有关，中药可调节NPY和O1B-RmRNA表达而发挥减肥及促排卵作用。 [全文刊登于中国中西医结合杂志2000.20(5)：362]
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饮食和养阴药对雄激素致不孕大鼠排卵及能量状态、血脂的影响
目的探讨饮食和养阴药对雄激素致不孕大鼠(ASR)排卵及能量状态、血脂的影响及其相互关系.方法给出生9日龄SD雌性大鼠丙酸睾酮1.25 mg皮下注射,建立ASR模型,将其随机分为①模型组;②中药组(80日龄起灌服滋肾阴药"天癸方");③节食组(80日龄开始饲料减为自由进食时的70%);④中药+节食组;⑤设立对照组.每组14只.各组于110日龄称重,断头处死,测定各组血总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、三酰甘油、血糖的变化;同时对能量状态指标(每日摄食量、腹膜后脂肪垫、体重)进行评估;卵巢苏木精-伊红染色作形态学观察.结果雄激素致不孕大鼠呈高代谢、能量失衡肥胖状态,其低密度脂蛋白胆固醇、葡萄糖较对照组增加(P＜0.05),而高密度脂蛋白胆固醇、总胆固醇、三酰甘油无明显改变(P＞0.05),镜下见卵巢卵泡囊性扩张;分别予滋肾阴中药、节食、滋肾阴+节食治疗后,能量失衡肥胖状态改善,低密度脂蛋白胆固醇、葡萄糖恢复正常,卵巢排卵功能不同程度地恢复,以中药+节食组治疗效果佳(排卵率达71.43%),而中药组、节食组排卵率分别为42.86%,28.57%.结论雄激素致不孕大鼠有肥胖、脂质代谢紊乱及不排卵特点.养阴药+节食能改善能量代谢紊乱,促进排卵,且两者有协同作用.
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调节食欲-生殖的信号肽在雄激素致不孕大鼠中的表达及滋肾阴药的作用
目的探讨雄激素不孕大鼠(ASR)肥胖及无排卵的中枢机制及滋肾阴药的作用。方法给出生9日龄SD雌性大鼠一次性皮下注射丙酸睾丸酮，建立ASR模型。用原位杂交、双标原位杂交的方法检测与肥胖发生有关的几种信号肽/激素如神经肽Y(NPY)、瘦素(leptin)受体长体(OB-Rb)、前阿黑皮素原(POMC)mRNA在ASR下丘脑弓状核(ARC)的表达含量和其关系，以及灌服滋肾阴药后上述指标的变化。结果 ASR呈肥胖、无排卵状态。ASR的ARC中NPY mRNA神经元上有OB-Rb mRNA表达，NPY mRNA神经元与POMC mRNA神经元有突触联系。NPY和POMC基因表达水平明显增加(P<0.01)，OB-Rb基因表达水平明显降低(P<0.01)。中药治疗ASR后，大鼠出现减肥和排卵现象，ARC中NPY、POMC基因表达下降，OB-Rb基因表达上升至正常大鼠水平(P>0.05)。结论 ASR肥胖及无排卵可能与NPY、POMC基因过表达、OB-Rb mRNA数目减少有关，中药可能有调控这些信号肽的表达而发挥减肥及促排卵作用。
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雄激素致不孕大鼠胰岛素样生长因子-1及其受体的变化
目的观察雄激素致高胰岛素高雄激素不孕大鼠胰岛素样生长因子-1/胰岛素样生长因子-1受体(IGF-l/IGF-1R)的变化.方法建立雄激素致高胰岛素高雄激素不孕大鼠模型,通过阴道涂片筛选各组大鼠;血清IGF-1测定采用放免法,IGF-lR的检测采用免疫组化法.结果(1)血清IGF-1水平:两组间无统计学差异;(2)胰腺、肝脏、卵巢和肾上腺IGF-1R免疫组化定量分析:模型组＜正常组.结论雄激素致不孕大鼠存在着主要靶器官低水平IGF-1R.
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调经赞育丸对雄激素致不孕大鼠的影响
目的:观察调经赞育丸对雄激素致不孕大鼠的影响.方法:给9日龄雌性大鼠皮下注射外源性雄激素,制造雄激素致不孕大鼠模型;给予药物后观察大鼠的阴道上皮细胞、血清中性激素、卵巢及子宫等脏器指数和病理形态学.结果:雄激素致不孕大鼠模型成功率为83.33%.调经赞育丸能明显增加模型大鼠卵巢中各级卵泡总数和黄体数,但对大鼠子宫内膜厚度没有明显影响;能明显恢复雄激素致不孕大鼠的动情周期和排卵功能;降低大鼠血清中的总睾丸酮含量,还能明显升高大鼠血清中雌二醇和促卵泡激素含量.结论:调经赞育丸对雄激素致不孕大鼠生育功能有明显的恢复作用.
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雄激素致不孕大鼠胰腺、下丘脑及卵巢雄激素受体mRNA表达
目的:研究雄激素致不孕大鼠(ASR)胰腺、下丘脑及卵巢组织中雄激素受体(AR)mRNA的含量变化.方法: 9日龄SD雌性大鼠皮下注射丙酸睾丸酮制备ASR模型,于106日龄左右(动情前期)处死,取血放免法测定△4-雄烯二酮(△4-A)、总睾酮(TT)、游离睾酮(FT)、胰岛素(Ins)和C-肽(C-P),提取胰腺、下丘脑及卵巢总RNA,以单碱基突变模板为内对照的RT-PCR方法对ARmRNA进行定量分析.结果:ASR模型血△4-A、TT、FT、Ins、C-P均显著高于对照组(P＜0.05,P＜0.01),胰腺、下丘脑及卵巢的AR mRNA表达水平明显升高,与对照组相比差异有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01).结论:ASR模型血雄激素水平升高,上调胰腺、下丘脑及卵巢AR mRNA的表达,引起该模型的高胰岛素血症和无排卵.
