首页 > 文献资料
-
肥胖大鼠下丘脑前增食欲素原表达降低
肥胖对人体的健康已构成严重威胁.增食欲素(orexins)A和B是2种主要由下丘脑分泌的神经肽,均来源于同一前体--前增食欲素原(prepro-orexin)的蛋白水解产物,通过功能性受体增食欲素受体-1和2(orexin receptor-1 OX1R;orexin receptor-2 OX2R)参与摄食和能量代谢调节.
-
血管紧张素对雄性大鼠下丘脑g-谷氨酰转肽酶活性与GnRH 含量的影响
近年来的研究表明,血管紧张素II(AngII)能促进下丘脑促性腺激素释放激素(GnRH)的分泌.在人和动物的下丘脑组织中含有丰富的g-谷氨酰转肽酶(GGT),其作用是促进氨基酸转运至细胞内,参与肽类或蛋白质的合成.本实验旨在观察雄性大鼠侧脑室注射不同剂量的AngII,下丘脑组织GGT活性与GnRH含量的变化,以探讨两者间的关系.
-
Smad 4在去势大鼠下丘脑、垂体中的表达和意义
目的::研究Smad 4 mRNA在去卵巢大鼠下丘脑、垂体中的表达水平和意义。方法:SD大鼠分为3组(每组10只):对照组(月龄<24周雌性大鼠)、去势组(手术切除双侧卵巢大鼠)、治疗组(去势后雌激素治疗雌性大鼠30天),动物处死后迅速取材,提取各组大鼠下丘脑、垂体组织RNA,反转录成cDNA,下丘脑,采用实时定量PCR方法( Real-time quantitative reverse transcriPtion Polymerase chain reaction;qRT-PCR),检测各组大鼠Smad4 mRNA在下丘脑及垂体中的表达。结果:去势组大鼠下丘脑Smad4 mRNA水平是正常组0.4±0.22倍(P<0.05),雌激素治疗组大鼠下丘脑Smad4 mRNA水平是正常组2.5±0.79倍(P<0.05);去势组大鼠垂体Smad4 mRNA水平是正常组0.2±0.12倍(P<0.05),垂体中Smad4 mRNA水平是正常组8.8±0.16倍(P<0.05)。结论:去卵巢大鼠下丘脑、垂体表达Smad 4基因,并与雌激素水平变化相关。
-
针刺足三里穴对大鼠冷应激性溃疡下丘脑NOS表达的影响
目的:本实验采用冷应激的方法,研究针刺足三里穴对急性胃溃疡的保护作用,以及应激大鼠下丘脑与应激有关的NOS的表达情况.方法:应用胃黏膜溃疡指数的计算和RT-PCR的方法研究针刺足三里对大鼠的冷应激性溃疡的保护和下丘脑-氧化氮合成酶(NOS)的表达情况,经图像分析系统照相并进行半定量.结果:针刺足三里穴可以明显减少冷应激造成的溃疡指数(正常对照组为0,单纯应激组为26.25±4.40,针刺预防溃疡组为9.75±1.91,针刺预防溃疡组与单纯应激组相比P<0.01).下丘脑NOS1不参与冷应激溃疡病理过程,针刺足三里穴可以在生理范围内上调下丘脑的NOS1的表达过程(正常对照组为0.69±0.05,单纯应激组为0.77±0.09,针刺预防应激组为1.87±0.1 5,针刺预防应激组与正常对照组相比P<0.01);下丘脑NOS2参与了冷应激溃疡病理过程,针刺足三里穴可以下调其表达(正常对照组为0.06±0.02,单纯应激组为0.24±0.05,针刺预防应激组为0.12±0.06,P<0.01),减少病理损害程度;NOS3也参与了冷应激溃疡这一病理过程,针刺可以下调其表达作用(正常对照组为0.30±0.08,单纯应激组为0.63±0.14,针刺预防应激组为0.45±0.14,针刺预防应激组与单纯应激组与正常对照组相比P<0.05,单纯应激组与正常对照组相比P<0.001).结论:针刺对冷应激溃疡具有保护作用,该种保护作用是通过对生理性上调NOS1的生理性表达,下调NOS2、NOS3的病理性表达而实现的.
-
烫伤对大鼠下丘脑视上核、室旁核、垂体和血浆内皮素-1含量的影响
内皮素(endothelin,ET)在下丘脑含量很高,大鼠下丘脑ET主要形式是ET-1,也含有E T-3。Yoshizawa及蒋应明等报道下丘脑神经元能自身合成和表达ET-1,主要集中在视上核 (Supraoptic nucleus,SON)和室旁核(paraventricular nucleus,PVN)部位,但其功能意 义尚不清楚。ET对下丘脑-垂体-肾上腺轴具有调节作用,可促进应激情况下AVP的释放。 烫伤是一种强烈的应激刺激,同时又可引起体内渗透压的升高,因此推测重度烫伤可能影响 下丘脑ET-1合成和分泌。本实验应用放射免疫测定法,观察大鼠烫伤后不同时间下丘脑SON 和PVN、神经垂体、腺垂体和血浆中ir-ET-1含量的动态变化,以了解烫伤对下丘脑和垂体 中ET-1含量影响和下丘脑ET-1的功能。1 材料和方法 雄性Sprague-Dawley大鼠96只,体重280~320 g,随机均分为烫伤后即刻、15 min、60 min、180 min四组及相应的4个对照组。经20%尿酯腹腔麻醉(5 ml/kg)后,背部剃毛,实 验组用沸水烫背部7 s,造成20%体表面积的Ⅱ度烫伤,对照组动物背部浸入37℃水中假烫7 s。各组动物分别按上述烫后不同时间断头,收集躯干血于预冷的含抑肽酶(每ml血加500 k IU)和Na2 EDTA(每ml血加10 mg)的指形管中,4℃离心(3 000 r/min,10 min),取血浆 置 于-40℃冰箱保存待测;同时迅速取全脑和垂体,置沸生理盐水中煮10 min,分离神经垂体 和腺垂体;自前连合平面至乳头体尾端取下丘脑,双侧包括下丘脑外侧部。用4%多聚甲醛 溶液固定24 h。用震动切片机行下丘脑冠状切片,片厚200μm,依据大鼠脑立体定位图谱 ,用不锈钢针管行打孔法取下丘脑SON和PVN组织,称重,将SON和PVN组织混在一起,加1 mo l/L醋酸匀浆提取,2 h后加入1 mol/L NaoH中和,低温离心取上清液行放射免疫测定。ET- 1放免测定试剂盒由北京解放军总医院放免研究所提供,小检出量为0.5pg。
-
生后发育过程中大鼠下丘脑NMDA受体各亚单位mRNA基因表达
中枢NMDA受体通道具有一种独特的门控方式,既受配基门控又受电压门控,而这种独特的门控通道又必须由各种亚单位形成的多样化的异寡聚体才具有一定的活性和功能.从胚胎形成到生后发育,中枢NMDA受体各亚单位及其所组成的异寡聚体具有各自不同的时空特性,其功能以及药理学特性也随发育过程而变化.本研究应用RT-PCR技术,研究在生后发育过程中听觉中枢神经系统下丘NMDA受体NR1、NR2A、NR2B和NR2CmRNA基因的表达,以期为在分子水平上揭示其在生后发育过程中的规律.
-
热适应诱导大鼠下丘脑基因的差异显示
机体经过一段时间的热环境锻炼后均能获得一定的热适应能力,但它的形成机制目前还不清楚.细胞水平的研究表明热休克蛋白的表达增加是细胞热适应(cellular heat adaptation)的重要原因和标志,但是人体在实现热适应的过程中是否有基因表达方面的改变以及是否存在一种方法可以促使相关基因的表达以帮助机体快速实现热适应等问题尚无明确答案.差异显示技术自从1992年创立以来,就不断被用于基因差异表达方面的研究,陆续发现了如苯丙胺调控转录的大鼠脑基因,人胚胎癌细胞分化为神经细胞所诱导表达的MAL基因等诸多重要基因.本实验旨在运用差异显示技术探求热适应大鼠下丘脑的差异表达基因,希望初步解决上述问题.
-
抗早熟中药对青春期大鼠下丘脑相关基因的作用与影响
目的抗早熟中药对青春期大鼠下丘脑相关基因的影响.方法设立对照组,采用荧光定量PCR法,检测小、中、大三组不同剂量中药对于青春期大鼠下丘脑相关基因的影响.
-
发育不同时期大鼠下丘脑视前区前胸腺素α1-mRNA表达水平变化及基因序列分析
目的研究胸腺素在大鼠发育不同时期在下丘脑的表达和下丘脑胸腺素的基因序列.方法运用 RT-PCR定量检测和基因序列分析技术,分别检测胚胎12天、14天、16天、19天、出生当天、生后30天、60天SD大鼠下丘脑前胸腺素α1- mRNA的表达.结果从SD大鼠下丘脑视前区扩增出的前胸腺素α1- mRNA的特异性条带,序列分析结果表明,其PCR产物的基因序列与文献报道大鼠胸腺来源的完全一致;大鼠下丘脑视前区前胸腺素α1-mRNA的表达水平随大鼠发育的成熟而呈递减趋势.结论胚胎12天到生后60天大鼠下丘脑视前区表达与胸腺来源完全一致的前胸腺素α1 mRNA, 随着大鼠发育成熟而逐渐减少,提示胸腺素α1在个体发育过程中可能参与大鼠下丘脑的功能调节.
关键词: 前胸腺素α1-mRNA 大鼠下丘脑 RT-PCR 序列分析 发育 -
损毁大鼠下丘脑弓状核对NK细胞活性及IL-2影响的研究
弓状核是下丘脑重要的神经核团,内含多种神经元胞体和几十种化学物质,其神经纤维联系也十分广泛,并参与垂体前叶内分泌、痛觉调制、免疫、情感活动、摄食等多种重要生理活动的调节过程,是神经-内分泌学研究的重要神经核团.我们已往的实验研究表明,弓状核对T、B淋巴细胞、RBC免疫功能均有调节作用[1],但对NK细胞活性的影响未见报道.为了探讨下丘脑弓状核对NK细胞活性和IL-2的影响,实验利用化学损毁的方法[2],建立了下丘脑弓状核损毁的大鼠模型.然后在成年期,观察了NK细胞和白细胞介素-2的活性[3],结果显示:在弓状核损毁组其NK活性细胞为26.39±1.49(U/ml),对照组为42.50±2.91(U/ml,P<0.01),IL-2在弓状核损毁组为13.30±1.49 (U/ml),而对照组为23.40±2.91 (U/ml,P<0.01),表明弓状核对机体的NK细胞活性和IL-2水平有明显的影响.
-
脑室注射L-Asp对大鼠下丘脑NOS和GGT活性的影响
目的观察脑室注射L天门冬氨酸(L-Asp)对成年雄性Wistar大鼠下丘脑一氧化氮合酶(NOS)和γ-谷氨酰转移酶(GGT)活性的影响.方法在530 nm波长下测定NO与亲核物质生成的有色化合物吸光度大小并计算NOS活性.GGT活性用速率法检测.结果脑室注射L-Asp(30ng/20μl/只)后60分钟,NOS和GGT活性与生理盐水组相比明显增高(P<0.05).结论脑室注射L-Asp可使雄性大鼠下丘脑GGT和NOS活性均增加,说明L-Asp对GnRH神经元活动有一定的调节作用,且这种调节是有NO参与的.
-
血管紧张素Ⅱ对雄性大鼠下丘脑GGT活性的影响
目的观察雄性大鼠脑室微量注射不同剂量血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对下丘脑内侧基底部组织(MBH)γ谷氨酰转肽酶(GGT)活性变化的影响.方法应用速率法分析测定MBH处GGT活性.结果脑室微量注射不同剂量0.03.0.06、0.12μg AngⅡ 20μl,60分钟后使MBH处GGT活性分别为1.62±0.16、1.68±0.17、2.84±0.23(IU×10-3/10mg湿重组织),脑室注射0.12 μg Ang Ⅱ GGT活性与盐水对照组[1.41±0 14(IU×10-3/10 mg湿重组织)]相比差异显著(P<0.05),而0.03μg和0.06 μg Ang Ⅱ对下丘脑GGT活性无明显影响.此作用可被AngII的AT1受体拮抗剂Sar-alasin所阻断.结论 Ang Ⅱ使MBH处GGT活性增强,并存在剂量依从性关系,说明AngⅡ可能通过增加下丘脑组织GGT的活性,促进氮基酸转运至下丘脑促性腺激素释放激素(GnRH)神经元内,参与GnRH蛋白质的合成,从而使下丘脑GnRH肽含量增加,促进GnRH神经元的分泌.Saralasin可翻转AngⅡ使GGT活性增加的作用,提示AT1受体可能参与介导AngII与GGT之间的相互作用.
-
中药天癸方对雄激素致不孕大鼠下丘脑Leptin受体及神经肽Y mRNA的影响(摘要)
目的 从基因转录水平探讨中药天癸方对雄激素致不孕大鼠(ASR)肥胖及无排卵的影响。方法 采用α-32P标记瘦素(leptin)受体(OB-R)及神经肽Y(NPY)寡核苷酸探针原位杂交、放射自显影技术结合图像分析,观察中药治疗前后下丘脑弓状核(ARC)两种物质tRNA的表达变化。结果 ASR中ARC的NPY基因表达水平明显增加(P<0.01),OB-R基因表达水平明显降低(P<0.01),ASR呈肥胖、无排卵状态。用中药天癸方治疗后,NPY基因表达下降,OB-R基因表达上升至正常大鼠水平。结论 ADR肥胖及无排卵可能与NPY mRNA过度表达、OB-R tRNA数目异常有关,中药可调节NPY和O1B-RmRNA表达而发挥减肥及促排卵作用。 [全文刊登于中国中西医结合杂志2000.20(5):362]
-
"一肾一夹"高血压大鼠下丘脑钠泵α亚单位的基因表达
目的:拟探讨"一肾一夹(1K1C)"高血压大鼠下丘脑(对水盐代谢的调节起着重要的作用)钠泵α亚单位(催化亚单位)各异构体基因表达的改变,为高血压发病机制的深入研究提供理论及实验依据.方法:选择雄性Sprague-Dawley大鼠制备1K1C高血压模型,设立假手术对照组,术后4周处死动物采集下丘脑,进行以下实验:(1)应用相应计算机软件,设计并合成针对钠泵α1、α2、α3亚单位及G3PDH(内参照)的4对特异性引物,应用分子生物学RT-PCR及图像分析方法探讨1K1C高血压大鼠及假手术组下丘脑钠泵α1、α2及α3亚单位mRNA水平的改变;(2)应用针对钠泵三种α亚单位的特异性单克隆抗体及免疫组化技术,在蛋白水平探讨该模型及假手术组下丘脑钠泵α1、α2及α3亚单位基因表达的改变.结果:术后四周1K1C大鼠血压明显升高(与术前比较,164.7±16.9 mmHg vs 104.3±12.3 mmHg, P<0.001),而假手术组大鼠血压变化不明显.与假手术组比较,无论在mRNA或蛋白水平,1K1C高血压大鼠下丘脑钠泵α3亚单位表达均减弱,而α1与α2亚单位表达无改变.结论:1K1C高血压大鼠作为高血压研究的重要模型之一,水盐平衡紊乱及血容量扩张是其血压升高的主要原因,而细胞膜上钠泵(Na+-K+-ATP酶)对水盐代谢的调节及机体的多种生理与病理过程起着重要的作用,与多种疾病的发生有关.引起1K1C高血压大鼠钠泵α亚单位基因表达异常改变的分子生物学机制可能是因为该模型体内存在着明显的水盐代谢紊乱以及血浆血管紧张素Ⅱ、醛固酮等体液因素的改变.钠泵α亚单位基因表达的改变可能具有重要的病理意义,研究表明,钠泵α亚单位各异构体与Na+、K+等离子以及强心甙类物质的亲和力不同,其功能各异,因此,这种基因表达的改变可能会直接或间接地引起相关组织细胞生物学效应的改变,并参与了高血压的发病机制.
-
电针对大鼠颅脑伤SS-mRNA表达的影响
目的:探讨电针对颅脑伤的作用机理.采用颅脑伤模型,电针治伤,用原位杂交免疫组化法观察电针对颅脑伤时生长抑素(SS-mRNA)表达的改变.方法: 雄性SD大鼠30只 ,随机分为:(1)颅脑伤组,(2)颅脑伤+电针组,(3)对照组.分别于8 h、18 h、24 h、 3 d、5 d、和7 d取材.电针选用督脉经穴-百汇和大椎,疏密波,时间15 min,每日一次共 7 d .所有标本经10%甲醛灌注固定,蔗糖脱水过夜,下丘脑、海马冰冻切片,用漂浮法进行SS- mRNA原位杂交免疫组化显色,镜下以测微尺对SS-mRNA杂交阳性细胞数进行计数测定.实验数据采用Origin统计软件进行处理,组间比较用t检验.结果:大鼠下丘脑SS-mRNA阳性神经元主要分布在室周核.在颅脑伤早期(8 h),在下丘脑室周核SS-mRNA阳性神经元数目出现下降,尤其伤侧减少明显.在针刺治疗后可见SS-mRNA阳性神经元数目恢复.在海马SS-mRNA 阳性神经元主要分布于CA4区.颅脑伤时SS-mRNA阳性神经元在海马各区均有分布,且数目及密度有所增加,尤其在CA1区.针刺治疗组可见SS-mRNA阳性神经元分布较颅脑伤组减少.[ HTH〗讨论:颅脑伤早期(2-72 h)SS免疫反应阳性神经元在下丘脑室周核分布明显减少.结合资料分析,SS对颅脑伤可能起类似阿片肽的镇痛作用.而在海马SS-mRNA基因表达有所增加,尤其表现在CA1.该结果提示海马SS神经元所能通过增加SS-mRNA基因表达,释放SS兴奋海马的锥体细胞和对GABA抑制,发挥与兴奋性氨基酸相类似的作用而参与颅脑伤的发病机理.经针刺治疗颅脑伤后,下丘脑室周核SS-mRNA阳性神经元数目逐渐恢复,而在海马SS-mRNA阳性神经元分布较颅脑伤组减少,表明电针可能通过调整中枢神经系统中SS紊乱而发挥治疗作用. 结论:1.针刺对SS在颅脑伤中的缓解作用起协同效应;2.针刺对海马神经元保护作用机制可能与电针降低SS-mRNA表达有关.
-
桂枝汤对发热及低温大鼠下丘脑PGE2含量及COX活性的影响
目的与方法:采用放免法及下丘脑中PGE2含量及COX活性进行同步检测,以期探明桂枝汤对体温双向调节作用与下丘脑组织中PGE2含量及COX活性的关系.结果:在酵母诱导发热大鼠中,桂枝汤对大鼠体温升高有显著的降低作用,在安痛定诱致的低体温大鼠中,桂枝汤对大鼠体温降低有显著的回升作用,给药后体温及体温变化差值与模型组比较均有显著差异,表明桂枝汤可使高、低体温动物分别向正常水平方向进行调节.在对不同体温状态大鼠发挥解热或抗低温作用的同时,桂枝汤对酶母诱导发热大鼠下丘脑中异常增高的PGE2含量有显著的降低作用,而对安痛定诱致的低体温大鼠下丘脑中异常降低的PGE2含量又有显著升高的作用.但桂枝汤对两种模型大鼠下丘脑细胞中COX活性影响不明显.结论:桂枝汤双向调节体温的作用机理可能部分是通过影响下丘脑组织中PGE2含量来实现的.但PGE2含量增减不依赖于下丘脑细胞中的COX,由于COX是PGE2生成中重要的限速酶,因此我们认为下丘脑中刺激体温变化的PGE2,来自自分泌(下丘脑细胞自身合成后分泌至胞外,再刺激分泌细胞)的可能性相对较小.
-
一氧化氮合酶阳性结构在大鼠下丘脑的分布-NADPH-d组织化学与免疫组织化学方法比较
-
大鼠下丘脑对淋巴结免疫功能神经调控的形态学研究--假狂犬病毒(PRV)跨神经元追踪研究
-
外源性GSH镇静催眠作用及其作用机制初探
还原型谷胱甘肽(reduced glutathione,GSH)是生物体内一种重要的抗氧化剂,其对细胞的保护作用已得到公认.近年来,GSH在中枢神经系统中的作用越来越受到重视,文献报道GSH可能作为一种神经递质或调质,可作用于N-甲基-D-在冬氨酸(NMDA)、海人藻酸(KA )、P物质及μ阿片等受体,产生抗兴奋性氨基酸作用.中枢去甲肾上腺素(NA)、多巴胺(DA) 及5-羟色胺(5-HT)能神经对机体运动、睡眠等行为进行广泛而复杂的调节,而这些神经的相应的递质又受到自由基及兴奋性递质如谷氨酸等的影响.GSH作为抗氧化剂及可能的中枢递质或调质,可能参与这些单胺类递质的代谢并产生中枢作用.因此,本研究观察外源性GS H灌胃给药对阈下剂量(25mg/kg,iv)戊巴比妥钠小鼠行为的影响,同时用高效液相色谱电化学法测定了外源性GSH灌胃给药后大鼠不同脑区NA、5-HIAA和HVA的含量变化.结果表明, 分别灌胃NS、1.5%和3% GSH 20ml/kg,2小时后腹腔注射戊巴比妥钠25mg/kg,外源性GSH灌胃给药可提高阈下剂量戊巴比妥钠所致的小鼠"睡眠”发生率,并使大鼠下丘脑NA下降,皮层及脑干5-HIAA上升.结果提示,GSH可协同戊巴比妥钠的镇静催眠作用,其作用与下丘脑 NA下降,皮层及脑干5-HIAA上升有关.
-
GSH口服对小鼠耐缺氧能力和大鼠脑内GSH、LPO、SOD及单胺类递质代谢的影响
目的:研究口服还原型谷光甘肽(reduced gluathione,GSH)对脑组织的保护作用及对神经中枢单胺类递质代谢的影响,并探讨其在肠道的吸收机制.方法:观察口服GSH对小鼠耐缺氧能力的影响,并测定大鼠皮层、下丘脑、纹状体、海马及脑干五个脑区的GSH水平、SOD活性、LPO含量和单胺类递质的变化,以及γ-谷胺酰转肽酶抑制剂(Acivicin)预处理大鼠口服GSH后五个脑区的GSH水平变化.结果:(1)口服GSH可明显提高小鼠的耐缺氧能力;(2)口服GSH后大鼠皮层、下丘脑、纹状体、脑干和海马五个脑区的GSH水平明显提高,LPO下降,在皮层、下丘脑、纹状体、脑干四个脑区的SOD活性均上升.(3)口服GSH可使大鼠下丘脑NA含量下降,皮层及脑干的5一羟吲哚乙酸(5-HIAA)升高.(4)Acivicin预处理大鼠后,口服GSH仍能使大鼠下丘脑、纹状体、脑干的GSH水平明显提高.结论:口服外源性GSH对脑组织有保护作用,其保护作用升高脑内GSH含量提高,SOD活性升高及LPO含量下降有关;GSH也可能通过调节某些脑区单胺类递质代谢参予其中枢保护作用.外源性GSH在肠道的吸收有整分子GSH吸收参与.