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多重实时PCR快速同时检测沙门菌和志贺菌
目的 建立改良分子信标-多重实时PCR同时检测沙门菌和志贺菌的快速方法,应用于食源性致病菌的快速诊断.方法 根据GenBank公布的沙门菌侵袭性基因invA和ssaR基因,分别设计一对引物和改良分子信标探针,用同色荧光标记,用于同体系检测沙门菌.志贺菌根据ipaH基因的保守序列,设计引物和改良分子信标探针,加入沙门菌检测体系中,建立三重实时PCR-改良分子信标检测体系,应用于同时对沙门菌、志贺菌食物中毒的快速诊断和门诊肠道致病菌的检测.结果 改良分子信标-多重实时PCR反应体系DNA灵敏度为69~93fg/μl,菌液灵敏度为32~64 CFU/ml或1~2 CFU/PCR反应体系,无交叉反应.该反应体系同时检测134株沙门菌和67株志贺菌,均出现特异的荧光信号,两种细菌检测互不干扰.对细菌性食物中毒样本等共1100份同时进行沙门菌和志贺菌检测,569份沙门菌实时PCR阳性,其中551份沙门菌培养阳性;42份志贺菌实时PCR阳性,其中41份志贺菌培养阳性.从样品处理到检测结果仅需时间2 h至1 d.结论 改良分子信标-多重实时PCR检测体系快速、灵敏度高,特异性强,可用于沙门菌和志贺菌食物中毒的快速诊断,伤寒、痢疾等肠道传染病的初筛及预防医学门诊的健康人群体检,为食源性疾病的分子流行病学调查提供新的检测手段.
关键词: 沙门菌 志贺菌 多重实时聚合酶链反应 同步检测 -
学功者练功程度的检测评估技术及设备研制
对教功者在练功过程中的鼻部呼吸、心电I、顶部中央区左右侧脑电进行四信号的同步检测与32K点的FFT处理。在其存在已知气功态生理共性的条件下,着重不同功种的功率谱分布规律与同步规律的个性特征,建立教功者的气功态综合生理模型。对相应学功者以同样的检测处理所获得的功率谱,以教功者模型为标准,并根据模型中所定义的特征频段群、相关运算参数群、权系数群,进行二者间各功率谱段的相似程度求算,进行三个层次上的权系数分配,从而对学功者目前的练功掌握程度进行计算机评估。本文在介绍该检测评估技术与设备的同时,还简单介绍了不同组别的90个样本的初步实验。结果:评估分数与二者有关功率谱的相似程度对应且线性匹配。表明:运用这一技术与设备,只要能对教功者准确建模,完全可以对相应学功者进行练功程度的检测与客观评估。
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急性呼吸道感染患儿巨细胞病毒感染的研究
巨细胞病毒(HCMV)在人群中感染非常普遍,但大多数呈亚临床不显性感染或潜伏感染,在宿主特殊的状态下,这种潜伏感染可被激活为其重要的生物学特征[1,2]。为研究小儿急性呼吸道HCMV感染,根据1994年全国小儿巨细胞病毒感染学术会议上拟定的诊断标准[3,4],选用HCMV-IgM为HCMV活动感染指标,对250例冬春季急性呼吸道感染(ARI)患儿和50名同期健康儿童进行了HCMV-lgM、呼吸道合胞病毒IgM(RSV-IgM),腺病毒IgM(AdV-IgM)特异抗体同步检测和部分临床资料分析。 1 材料和方法 1.1 病例选择 1996年11月~1997年3月、1997年11月~1998年3月两个冬春季节期间在开封市儿童医院门诊及呼吸病房住院,临床诊断为病毒性呼吸道感染的患儿250例。男158例,女92例,年龄40~12岁。对照组系同期在市儿童医院健康体检的健康儿童50例,男40例,女10例,年龄7个月~12岁。
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双重实时PCR快速同时检测霍乱弧菌和副溶血弧菌
目的建立改良分子信标-双重实时PCR同时检测霍乱弧菌和副溶血弧菌的快速方法,应用于霍乱监测、副溶血弧菌食物中毒的快速诊断和海产品检验. 方法根据GenBank公布的霍乱弧菌肠毒素基因A亚单位(ctxA)和副溶血弧菌的耐热直接溶血毒素基因(TDH)的保守序列,分别设计引物和改良分子信标探针,以10种细菌作对照,建立双重实时PCR-改良分子信标检测体系,应用于副溶血弧菌食物中毒快速诊断和霍乱监测. 结果改良分子信标-双重实时PCR反应体系DNA灵敏度为102.4~166.6fg/μl,菌液灵敏度为32~64CFU/ml或3~6CFU/PCR反应体系,无交叉反应.此反应体系同时检测40株副溶血弧菌和50株霍乱弧菌,均出现特异的荧光信号,两种细菌检测互不干扰.对3起细菌性食物中毒共48份样品和100份海产品进行检测,9份副溶血弧菌实时PCR阳性,其中7份副溶血弧菌细菌培养阳性,其余样品都为阴性.从样品处理到检测结果仅需1天时间. 结论改良分子信标-双重实时PCR检测体系快速、灵敏度高、特异性强,可用于霍乱和副溶血弧菌食物中毒的快速诊断,为食源性疾病的分子流行病学调查提供新的检测手段.
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老年脂肪肝超声诊断与血脂代谢分析
目的:探讨老年人中脂肪肝患者的二维声像图特点与血脂代谢的关系,从而进一步了解老年脂肪肝的临床特点.方法:应用超声诊断标准对2000年在我院健康体检和住院的60岁以上老干部中查出的170例老年脂肪肝患者与同期参加体检的123例确定无脂肪肝的老年人的声像图表现及同步检测的血脂结果进行回顾性总结.结果:①老干部体检中脂肪肝检出率高占37.76%;②170例老年脂肪肝患者中,符合轻度脂肪肝50例(58.14%),中度脂肪肝31例(36.05%),重度脂肪肝5例(5.82%);③血脂统计,主要为甘油三脂(TG)增高82.35%(140/170),胆固醇(TC)增高占37.65%(64/170),与对照组比较差异非常显著(P<0.01);④按年龄段统计老年人年龄越低检出率越高.结论:老年脂肪肝的发生、发展、转归等过程以及血脂、血糖的代谢是变化的、相互关联和影响的.临床治疗前后和健康体检时B超检查是非常重要的.
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荧光偏振技术同步检测沙眼衣原体解脲脲原体方法的研究
沙眼衣原体(CT)、解脲脲原体(UU)是常见泌尿生殖系感染等病原体,其早期检测对临床诊断治疗十分重要[1].传统的单一检测这两种病原体工作繁琐、费用高.本研究建立了荧光偏振与模板指导的末端延伸反应检测技术(TDI-FP),在同一反应体系应用多重引物,检测CT、UU感染,大大提高了检测时效.
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荧光偏振技术同步检测肺炎支原体肺炎衣原体方法的研究
肺炎支原体(Mycoplasma pneumoniae,MP)、肺炎衣原体(Chlamydophila pneumoniae,CP)是呼吸道感染的常见病因,及早准确地检测,对预防控制相关疾病非常重要[1].本研究采用荧光偏振检测与模板指导的末端延伸反应检测技术相结合(TDI -FP)的方法,建立了在同一反应体系中同步检测肺炎支原体、肺炎衣原体感染的方法.
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胃黏膜超微结构、微量元素、环磷酸腺苷和细胞免疫研究慢性胃炎的分类
目的:探索有消化道症状患者未必都有胃黏膜病理学改变与无任何临床症状者未必均无胃黏膜病理学改变的病理生理学渊由.方法:经检测排除心肺肝胆胰肾肠等器质性疾病188例患者和胃黏膜无明显病理学改变者(F)的胃黏膜,应用扫描电镜、能谱仪与放射免疫法等现代科学技术手段同步检测胃黏膜超微结构、微量元素和环磷酸腺苷,以及3H掺入淋巴细胞转化试验.结果:胃黏膜Zn、Cu、cAMP和3H-TdR LCT含量,健康对照组(4.1±1.0,5.2±0.8,15.9±1.5,1079.7±227.4),无症CSG组(3.7±1.2,5.1±1.8,15.6±0.9,924.5±234.9);无症CAG组(3.3±1.0,4.8±0.9,14.9±0.7,887.7±243.6);有症F型组(3.5±1.4,4.5±1.0,15.7±1.4,932.1±2449.3);有症CSG组(2.8±1.9,4.0±1.5,14.2±1.8,867.3±240.5);有症CAG组(2.0±1.8,3.4±1.5,13.4±1.8,800.9±221.8);非病灶区胃黏膜内"背景病变(灶性萎缩性炎变,灶性肠腺化生,微小溃疡)",组间均有显著性差异(P<0.05~0.001).结论:有病有症、有病无症、无病有症都发生在胃黏膜Zn、Cu、cAMP和3H-TdR LGT的量变基础上.
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胃黏膜超微结构、DNA、Zn、Cu和LP0研究慢性胃炎分类
目的:探索慢性胃炎中无症CSG、无症CAG、有症F型、有症CSG和有症CAG的病理生理学渊由.方法:对188例患者,应用透射电镜、能谱仪、图像分析仪与化学发光法等现代科学技术手段,同步检测胃黏膜上皮细胞超微结构、微量元素、DNA和SOD,以及LPO.结果:胃黏膜上皮细胞核Zn、Cu、DNA和血清LPO含量,健康对照组(7.6±0.4,58.4±0.3,12.6±2.7,2.6±0.6),无症CSG组(7.8±0.3,58.6±0.4,13.0±3.1,2.9±0.4),无症CAG组(7.8±0.3,58.7±0.3,14.3±2.8,3.1±0.4),有症F型组(7.9±0.4,58.7±0.5,13.5±4.6,2.9±0.7),有症CSG组(8.1±0.5,58.9±0.5,15.2±3.2,4.2±0.7),有症CAG组(8.6±0.4,59.3±0.5,16.5±3.1,4.5±0.6);而线粒体Zn、Cu和胃黏膜SOD含量,健康对照组(9.2±0.5,58.3±0.3,170.5±6.1),无症CSC组(8.9±0.5,58.2±0.3,167.2±5.3),无症CAG组(8.8±0.4,57.5±0.2,166.1±4.2),有症F型组(8.9±0.5,58.0±0.3,167.9±5.7),有症CSG组(8.6±0.5,57.8±0.3,163.3±5.6),有症CAG组(8.3±0.4,57.5±0.3,161.2±4.3),组间均有显著性差异,P<0.05~0.001.胃黏膜上皮细胞超微结构与此发生同步变化.结论:有病有症、有病无症、无病有症都发生在胃黏膜上皮细胞超微结构及其相关的生物活性物质的质量变化的基础上.
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胆囊癌多种癌基因表达及其与细胞增殖关系的研究
本研究采用免疫组化方法,同步检测20例胆囊癌C-erbB-2 ras癌基因和抗癌基因P53蛋白产物的表达,结合增殖指标PCNA,旨在探讨3种基因在胆囊癌形成中的变化规律,及其与细胞增殖关系.
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四种胃癌标志物同步检测的意义
我们用针对4种胃癌标志物(p53、c-erbB-2、 PCNA和Rb)的抗体进行免疫组化染色同步检测以分析不同蛋白产物在胃癌及肠化生组织中表达的差异.
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血小板参数及D-二聚体与儿童过敏性紫癜肾损害
小儿过敏性紫癜(HSP)是儿科常见的出疹性疾病,是一种主要累及毛细血管和小动脉的变态反应性疾病.近年许多研究认为HSP患儿会出现血液高凝状态.随着血细胞分析仪的不断更新,血小板(PLT)、血小板体积分布宽度(PDW)、平均血小板体积(MPV)等血小板参数引起大家关注,现就HSP患儿同步检测血小板参数,D-二聚体,并与健康儿童比较,观察其变化及其与肾脏受累的关系.
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乙肝病毒前S1抗原与乙肝"两对半"同步检测的临床意义
目的 观察并分析乙肝病毒前S1抗原(PreSl-Ag)与HBV血清标志物乙肝"两对半"的关系,以评价同步检测的临床意义.方法 采用酶联免疫法(ELISA)对1236例乙肝患者及180例健康体检者进行Pre-S1及乙肝两对半检测,测定结果并对其比较分析.结果 PreS1-Ag与HBeAg的阳性率具有一致性,PreS1-Ag敏感性优于HBeAg,差异有统计学意义(P<0.01).结论 PreSl-Ag与乙型肝炎两对半联合检测,可弥补两对半的缺陷,在乙型肝炎诊断、治疗及疗效考核中将互为补充.
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CRP和CEA联检对结核性和恶性胸腔积液鉴别诊断价值的探讨
胸腔积液是胸膜疾病常见的表现,结核性与恶性肿瘤性胸腔积液之间诊断与鉴别诊断对疾病治疗与预后尤为重要.可是由于常规诊断方法的敏感性与特异性不高,使部分病例难以获得快速明确的诊断.为探讨癌胚抗原(CEA)和C反应蛋白(CRP)对结核性和恶性胸腔积液的鉴别诊断价值,我们对胸腔积液患者常规同步检测胸水和血清中CEA和CRP,现将检测结果报道如下.
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乙肝病毒前S1抗原与乙肝两对半及HBV-DNA同步检测的临床意义
目的 探讨前S1抗原在乙型肝炎检测中的临床价值.方法 用乙肝两对半不同模式的病人血清,同步进行前S1抗原及HBV-DNA检测.结果 在HBsAg(+)血清的检测中,前S1阳性率为66.67%;HBV-DNA阳性率为70.96%;其中大三阳的前S1的阳性率为91.80%;HBV幽DNA阳性率为93.90%;小三阳的前S1的阳性率为43.66%;HBV-DNA阳性丰为44.94%.结论 前S1抗原.HBV-DNA和HBeAg的临床相关性良好,适于在临床上推广利用.
关键词: 乙肝病毒前S1抗原(Pre-s1) 乙型肝炎 同步检测 -
大庆地区小儿急性呼吸道感染的病原学研究
小儿急性呼吸道感染(ARI)是儿童常见病、多发病,在发展中国家占儿童死亡率的30%,严重影响小儿健康.因而,探讨ARI致病微生物的构成特点,合理用药,对提高儿童的健康水平尤为重要.据此,2001年112月对我院儿科门诊及住院的197例ARI患儿进行肺炎支原体(MP)、沙眼衣原体(CT)、呼吸道合胞病毒(RSV)、腺病毒(ADV)进行同步检测,报告如下.
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双侧脑导纳环同步检测健康人脑血流初探
脑导纳环(Admittence Encephaloloop,AEL)亦称脑导纳微分环,是近十余年研究开展的一项无创性检测脑血流变化的新技术[1].它是以脑阻抗血流图为基础,经过动物实验、理论推导及临床验证,显示电导纳法与原有医学检测所运用的电阻抗法相比,可消除人体基础阻抗(Z0)影响,从而使检测结果的准确性、稳定性明显提高[2~4].我国学者李志明等人受他人心导纳环(ADL)成功合成及其在临床广泛应用的启示[5~8],创新性研制成功的双侧脑导纳环自动检测仪器,采用头部左、右两侧同步描记导纳图与导纳微分图及所形成的闭合向量环--脑导纳环,可以更全面和更准确地分析脑血管功能和血管容积在心动周期的改变,将传统的脑血流技术向前大大推进了一步[9、10].为更好地开展这项无创伤性定量分析脑血流量的技术,现将214例健康成人脑导纳环检测结果报告如下.
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视频脑电图在儿童非癫痫性发作诊断中的价值
儿童癫痫(epilepsy)与非癫痫发作(nonepileptic seizures,NES)的鉴别一直是困扰临床医生的一个难题,极易造成误诊误治,随着视频脑电图同步检测检查的逐渐普及,已成为鉴别二者的金标准.
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宫颈鳞状细胞癌和食管鳞状细胞癌中高危HPV感染的对比分析
现有研究已证实人乳头状瘤病毒(HPV)与生殖道肿瘤的发生密切相关,国内外有少量文献报道了食管癌中的HPV感染.本研究旨在使用原位杂交(ISH)的方法同步检测宫颈鳞状细胞癌(SCC)和食管鳞状细胞癌(ESCC)组织中HPV感染状况,比较其生物学意义.
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4种病原抗体液相芯片同步检测方法建立
全球经济化的发展、贸易的开通,交通的便捷,无不为各国旅行、探亲、交易打开了方便之门,人口流动速度加快,与此同时传染病的传播也随之蔓延[1].为保障居民生命健康安全,进行国境口岸传染病病原抗体的快速筛查,为传染病的传入与传出建立一道屏障有重要意义[2].本研究建立针对登革病毒、土拉菌、禽流感病毒、西尼罗病毒4种病原抗体高通量快速筛查的液相芯片检测方法.结果报告如下.