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寒冷地区部队指战员精液质量的调查
目的探讨在寒冷地区作业是否对精液质量产生影响.方法通过现况调查,采用分子水平实验技术即单细胞凝胶电泳和染色质结构分析与精液常规检查相结合的方法,评估寒冷地区部队指战员精液质量和精子亚临床损伤.结果寒冷地区作业人员精液常规化验均在正常范围,但单细胞凝胶电泳Ⅰ级彗星率高达4.4%,与对照组(1.9%)比较差异有显著性;精子染色质结构分析中compαt增高,平均值为22.26%,两种实验结果均反映了精子DNA单双链不同程度的损伤.结论长期工作在寒冷地区的人员可见精子DNA单双链损伤增加,但不足以影响精液质量.提示加强寒冷地区男性作业人员的生殖健康保健十分必要.
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组蛋白ADP-核糖基化及其生物学效应
与原核生物不同,绝大多数真核生物DNA以结构复杂、高度折叠的染色质为载体,这使得两者在基因表达上具有很大的差异。染色质以核小体为基本组成单位,每个核小体包括一个八聚体的组蛋白(两分子的H2 A-H2 B二聚体,两分子的H3和两分子的H4)以及缠绕其上1.75圈的长约146 bp的DNA,核小体之间以40~60 bp的DNA连接,组蛋白H1与之结合。八聚体的三维结构为球状,而组蛋白亚基的氨基端则游离出来,称为氨基端尾巴(或组蛋白尾巴)。氨基端尾巴上的许多残基可以被共价修饰,不同位点上的不同修饰可形成大量特殊信号。组蛋白的翻译后修饰不仅与染色体的重塑和功能状态紧密相关,而且在决定细胞命运、细胞生长以及致癌作用的过程中发挥着重要的作用,如组蛋白磷酸化就在有丝分裂、细胞死亡、DNA 损伤修复、DNA 复制和重组过程中发挥着直接的作用。
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腺苷二磷酸核糖基化及其生物学效应
真核生物体内蛋白质表达后均需经过一系列的修饰过程才能发挥作用,主要包括腺苷二磷酸(ADP)核糖基化、乙酰化、磷酸化、糖基化等.ADP-核糖基化是蛋白质翻译后的重要修饰方式之一,分为单-ADP-核糖基化,聚-ADP-核糖基化2种,其与染色质的功能与调节、肿瘤的发生、细胞死亡、细胞分化与信号转导、程序性细胞死亡等很多重要的生命活动相关[1-2].笔者将重点介绍哺乳动物细胞中的酶促的单-ADP-核糖基化反应和聚-ADP-核糖基化反应,以及这些反应的主要生物学效应.
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动物病毒诱导的细胞凋亡及其生理意义
细胞凋亡是指细胞受到内外信号刺激时发生的一种由细胞内部基因控制的主动性死亡行为,是细胞内在的机制,也是决定生物个体发育和组织平衡的一个重要机制,对于抵御外界各种因素干扰起着非常关键的作用.它呈现一系列典型的生化和形态学特征,如染色质凝集、趋边化以及凋亡小体(apoptotic body)的产生.伴随着形态学上的变化,凋亡细胞的染色质在核小体间被活化的DNase特异水解,形成大约为180~200bp或其多聚体组成的寡核苷酸片段,被包裹在凋亡小体内,琼脂糖凝胶电泳表现为DNA"梯带"(DNA ladder)[1].大量的研究证实,很多病毒在其感染周期过程中可诱导细胞凋亡[2,3],病毒感染诱发的细胞凋亡也常与一些疾病的发生密切相关.所以,研究病毒诱导细胞调亡及其生理意义对于阐明细胞凋亡分子机制和病毒与宿主的相互作用具有重要的意义.
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卡配因在大鼠脑缺血后细胞凋亡中的作用
脑缺血时,因可引起神经元碎裂和崩溃,以往一直认为卡配因引起的神经元死亡为坏死,但近来研究证明卡配因可导致神经元凋亡.卡配因能引起血影蛋白和染色质溶解,而脑缺血细胞凋亡时这些结构变化都有不同程度的发生.本实验旨在应用原位TUNEL、原位杂交技术,研究卡配因在大鼠脑缺血细胞凋亡中的作用.
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什么在控制遗传改组?
有没有想过,为什么你的侄子看起来更像你而不太像他的父母?这是因为大自然通过基因洗牌来保证群体的多样性.我们将这种遗传颠换称为重组(recombination),它具有非常重要的作用.但它如何受调控的,我们全然不知.近,美国卡内基研究所的Judith Yanowitz在研究线虫时发现,染色质的结构是调控重组的基础.染色质是一种复杂的物质,含有DNA、RNA和蛋白质,它们构成了染色体.Judith Yanowitz还研究了环境因素和年龄是如何改变重组的.
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HE染色细胞核发灰的处理方法
常规石蜡切片及细胞学涂片时,HE染色镜检出现细胞核发灰,即细胞核内染色质及核仁显示不清,呈一片淡兰色云雾状,此现象严重时影响病理诊断.细胞核发灰的原因,一是石蜡切片的组织固定不及时,或组织块取材太厚,影响组织固定、脱水、透明和浸蜡所致.二是细胞学涂片中细胞脱落时间过久,或在制片过程中人为造成涂片干涸.
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有弥漫丛栅状结构的高度富细胞子宫平滑肌瘤一例
患者 女,63岁.因阴道口肿物增大并脱出半年就诊.妇科检查:子宫脱垂Ⅱ度,子宫多发性平滑肌瘤,阴道前后壁膨出.B超检查提示子宫脱垂伴子宫多发性平滑肌瘤,子宫前壁有一囊实性肿块(可能为子宫肌瘤液化),遂于2011年2月15日收入院行全子宫切除术.病理检查:送检组织为子宫全切除标本,子宫大小9.5 cm×7.5cm×4.0cm,宫颈管3.0 cm ×2.5 cm ×2.2 cm,附(0.2 ~3.5)cm ×6.0 cm阴道壁组织.子宫前壁近宫底处有一囊实性结节,大小6 cm×5 cm×4 cm,囊内壁尚平滑、润泽,黄褐色,不附凝血,质中等,囊壁厚(0.2~4.0) cm;切面黄褐色,质地较细.宫底右侧和后壁中部浆膜下各见一结节,直径约3 cm,切面呈灰白色编织状,质硬韧.右侧宫壁内有3个灰白色质硬小结节,直径(0.6~1.0)cm.镜下观察:大的肿瘤境界清楚,边缘整齐,囊壁厚薄处实性部分瘤组织结构均相同,在密集而弥漫的小短梭形细胞背景中有均匀散在分布的丛栅状长条细胞索,无坏死灶.囊内壁无衬覆上皮,为裸露的瘤组织.瘤细胞有两种类型,一类为核呈长杆状且两头圆钝、胞质少的梭形细胞,核染色较深,染色质分布均匀,几乎无核分裂象,也无明显核仁,胞质呈淡嗜伊红色.另一类瘤细胞核小,呈卵圆形或短梭形,染色亦较深,染色质分布均匀,无明显核仁,也未见明确核分裂象;其胞质较少且胞界不清,均匀而弥漫分布于上述丛栅状长条索之间,细胞密度高.这类细胞互相紧挤在一起,参差不齐且胞界不清,形成稍起伏不平的丛栅状长条索,细胞核的长轴与长条索的长轴相垂直.瘤细胞间有粗细不一的血管,多数为毛细血管和壁较薄的小口径血管,部分血管壁厚且有透明变性.其他浆膜下和肌壁间结节由分化好的平滑肌细胞排列为纵横交错的细胞束,细胞密度中等.
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胸膜外孤立性纤维性肿瘤
例1男,68岁.进行性排尿困难4个月余,于2004年12月12日入院.入院检查会阴部可触及分叶状肿块12 cm×10 cm×5 cm,质硬且固定;术中发现肿块来源于前列腺.病理检查:分叶、结节状组织11.5 cm×10.0 cm×4.0cm,部分似有包膜,部分已切开,切面鱼肉状,质嫩.显微镜下肿瘤境界清,有较厚的纤维性包膜,肿瘤由富细胞区和细胞稀疏区组成.富细胞区肿瘤细胞呈束状或成簇状的小圆形、卵圆形细胞,部分区杂乱无章(图1).瘤细胞胞质少,核染色质均匀,核仁不明显,无核分裂象,部分区肿瘤血管丰富;细胞稀疏区含多量胶原纤维.
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输卵管平滑肌肉瘤一例
患者女,28岁。因要求绝育手术于1997年9月6日入院。在行输卵管结扎术时发现左侧输卵管伞端有一核桃大肿物。肿物与输卵管相连,表面光滑,与卵巢、子宫及周围组织分界清楚。子宫、左侧卵巢及阔韧带内均未见明显异常。行左侧输卵管连肿物切除术。 病理检查:左侧输卵管长6.0 cm,横径0.5 cm,伞端见一圆形肿物,肿物位于输卵管浆膜下(图1),直径2.1 cm,表面较光滑,切面实性,灰红,鱼肉状,质稍韧。镜下观察:密集的瘤细胞呈编织状排列,分化较好的区域主要由梭形细胞构成,细胞束纵横交错排列,胞质丰富,红染。核大,长形,两端钝圆,深染,染色质粗。分化较差的区域瘤细胞弥漫成片,细胞大小形态不一,核异型性明显,核分裂象多,可见1~5个/HPF,常见病理性核分裂象(图2)。可见单核及多核瘤巨细胞,胞核相互重叠。肿瘤位于浆膜下,有假包膜,周围组织未见明显浸润。
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组蛋白乙酰化及其与肿瘤的关系
真核细胞中染色质的基本单位核小体,由核心组蛋白(H2A、H2B、H3和H4)、H1及DNA组成.核小体组装过程中,(H3/H4)2四聚体首先与DNA结合,随后两个H2A/H2B异二聚体,结合到(H3/H4)2结合处的5′和3′DNA上形成核小体.核小体结构修饰是DNA复制、转录、修复过程中的关键步骤.早在30多年前,Allfrey等已发现核心组蛋白N-端乙酰化能调节多种反式作用因子与核小体结合,从而影响基因转录.此后研究不断深入,发现组蛋白可有多种修饰方式:泛素化、磷酸化[1]、乙酰化[2]、甲基化等,它们单独(协同)调节基因转录[3].其中组蛋白乙酰化是解除核小体抑制作用的主要机制,受组蛋白乙酰基转移酶(histone acetyltransferases,HATs)和组蛋白去乙酰化酶(histone deacetylases,HDACs)的调控.本文就组蛋白乙酰化与基因转录及其在肿瘤发生、发展中的作用作一综述.
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细胞凋亡检测方法的研究进展
研究细胞凋亡的方法不断涌现,分析手段日趋完善和成熟。按方法学可将细胞凋亡的检测方法分为形态学、生物化学、免疫化学和分子生物学测定法。现就这方面的进展作一简述。 一、DNA降解分析 细胞凋亡过程中有一系列特征性的形态学、生物化学、细胞学及分子生物学改变。其中重要和特征性的改变是Ca2+/Mg2+依赖性核酸内切酶的激活导致染色质DNA在核小体连接部位断裂,形成以180~200 bp为小单位的单体或寡聚体片段。因而细胞凋亡过程中DNA降解所产生的DNA片段大小具有独特的性质,常作为细胞凋亡特异性生化指标而被广泛应用。检测细胞凋亡DNA降解除可通过流式细胞术,还有其他检测手段(表1)。
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小脑髓母细胞瘤与幕上原始神经外胚叶肿瘤的分子生物学改变
髓母细胞瘤是一种小脑神经上皮性肿瘤,是常见的儿童中枢神经系统肿瘤,好发年龄高峰为8岁,多数发生在20岁以前.2000年的WHO神经系统肿瘤病理分类中强调髓母细胞瘤的病理组织学分型,除了经典的髓母细胞瘤以外,还有促纤维增生型、大细胞型/间变型、髓肌母细胞型和黑色素型等.其中经典的髓母细胞瘤占大多数,镜下观察由致密成群、核染色质丰富并缺乏胞质的肿瘤细胞组成.可见假菊形团结构,核分裂象及凋亡小体多见[1].
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一种提高冷冻切片染色效率的苏木精加热组件
临床病理工作中,冷冻切片质量的优劣直接影响到术中病理诊断的快速性和准确性。冷冻切片制片速度与质量受多种因素的影响,其中苏木精染色是非常关键的环节。细胞核内的染色质主要是去氧核糖核酸(DNA),DNA带负电荷,呈酸性,很容易与苏木精碱性染料结合而被染色,苏木精在碱性溶液中呈蓝色,所以细胞核被染成蓝色[1],易与被伊红染成红色的细胞质区分。我们设计了一种病理冷冻切片的染色加热组件(专利证书号:ZL 201320589148.4),对150例冷冻切片进行染色,比较该组件处理下与其他4种苏木精染色条件下,HE染色的速度与质量。
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软组织肿瘤病理诊断中的一些疑难问题
一、高分化血管肉瘤与乳头状血管内皮细胞增生在软组织病理诊断中,血管肿瘤没有完整包膜,良性的血管瘤也可以侵袭性生长,因此血管肉瘤和良性血管病变的鉴别依赖于内皮细胞的异型性和组织结构的异型性,如核染色质深染,靴钉样核,内皮细胞层次增多,核分裂象增多等.更重要的一点是血管腔隙间的相互吻合沟通.在一些特殊情况下,还需要结合部位、病史和其他临床情况一起考虑,不能仅凭镜下形态进行判断.
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涎腺嗜酸细胞癌伴神经内分泌分化
1.病例简介:患者男,64岁.无意中发现左颌下一花生米大包块3个月,无疼痛.近10余天内增大至核桃大小,于2001年3月入院.体检:左颌下可扪及一3 cm×2 cm大小肿物,质中,无压痛,可活动,界限清楚.术中见肿物为2个,大小均约1.5 cm×1.0 cm,包膜完整,与颌下腺粘连.于2001年3月7日行肿物手术切除.2.病理检查:切除肿物与部分涎腺组织一块,大小5 cm×4 cm×2 cm,表面灰红色,有部分包膜,切面可见一3.8 cm×1.5 cm×1.0 cm大小肿物,与周围分界尚清楚,灰红灰黄色,略呈分叶结节状,实性质中.镜下观察:肿物呈实体团状生长,并有梁索状、腺样结构形成,瘤组织有少量纤维组织分隔.瘤细胞较大,细胞大小较为一致;胞质丰富,内含大量嗜酸性颗粒,部分细胞胞质有透明变;细胞核偏位或居中,圆形或卵圆形,空泡状,染色质细少,核仁清晰可见(图1,2);罕见核分裂象.肿瘤浸润颌下腺组织,颌下腺周围淋巴结可见瘤组织转移,并于脉管中形成瘤栓(图3).
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氧化砷诱导食管癌细胞凋亡细胞骨架的改变
我们过去用氧化砷(As2O3)诱导食管癌细胞凋亡[1],发现在凋亡早期,细胞核未见明显改变之前有线粒体增生反应,并首先描述了As2O3诱导食管癌细胞的线粒体的形态改变[2].细胞凋亡的形态有细胞变小,皱缩,细胞核变圆,染色质凝集、靠边.我们发现在羊膜上皮细胞自发凋亡过程中张力微丝的消失[3],因此使我们考虑到细胞凋亡时,细胞形态的改变与细胞骨架的改变的关系.我们以As2O3诱导食管癌细胞凋亡,观察细胞形态和细胞张力微丝,肌动蛋白F(F-actin)的变化,以阐明细胞骨架的改变在细胞凋亡形态改变的意义.
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乙型肝炎病毒感染对精子DNA完整性影响的研究
目的 探讨HBV感染对精子DNA完整性的影响及其应用意义.方法 对12例乙型肝炎病毒感染男性患者(患者组)和11例血清乙肝表面抗原阴性健康男性(对照组)同时进行精子染色质扩散试验与精液常规参数检测.结果 患者组的精子DNA碎片化指数DFI为(23.4±10.2)%,对照组精子DFI为(11.6±5.9)%,两组差异有统计学意义,P<0.01.患者组精子浓度、前向活动率(a+b)明显低于对照组,P<0.01.患者组精子正常形态率、活动率明显低于对照组,P<0.05.结论 乙型病毒感染不仅对精液的常规参数造成不同程度的影响,对精子DNA也会造成严重的损伤.
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临床常见产AmpC β-内酰胺酶菌株中染色质ampD基因的测定与分析
AmpC β-内酰胺酶(简称AmpC酶)的产生由其产酶基因所控制.细菌染色质上AmpC酶的基因包括结构基因ampC和多种调控基因ampR、ampD和ampG等.
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阴道宫颈乳头状瘤的分子生物学与超微结构的研究
以往的研究工作证明人乳头状病毒(HPV)与中国妇女宫颈乳头状瘤的生长有密切关系.为深入研究其发病机制,我们对外阴痒、白带多就诊体检发现阴道下1/3及宫颈有异常突起者病理及核酸分子杂交技术证实为HPV感染的16例标本进行了PCR检测及超微结构的观察,结果如下:1 材料与方法16例来自门诊新鲜标本,以2.5%戊二醛和1%锇酸双固定,Epon-812包埋,超薄切片,铀-铅双重染色,PHILPS-CM10透射电镜观察.2 结果与讨论2.1 PCR检测用PCA技术检测标本16例,14例标本HPV阳性,占87.5%.2.2 超微结构观察在14例HPV阳性标本中发现了基底细胞核分裂相、基底细胞内存在成对中心粒,基底细胞和棘细胞层增厚,伴核增大,核仁增多,可见凹空细胞,核有明显改变,早期核增大,核仁增多.此后72.3%的核仁消失,常染色质丰富.82.18%染色质疏松,72.3%的阴道尖锐湿疣病例中发现了染色质之间颗粒及染色质周围颗粒、染色质之间颗粒呈棱角状,直径约15~35nm.PCA检测阳性者还可见核小体,阴性者未发现.随着核染色质的浓集并周边化,核固缩,在此类细胞中可见大量密集的染色质之间颗粒和染色质周围颗粒,胞质空化明显,形成典型的凹突细胞,凹突细胞中可见线粒体及内质网肿胀,脊消失,后融合成一些外围有包膜的大泡,充斥于胞质内,使胞质明显空化,成为典型的凹突细胞,典型的胞质空化在中表层细胞中常见.14例阴道尖锐湿疣标本中46%可见棘细胞质空化,另外在5例宫颈尖锐湿疣基底细胞和1例阴道尖锐湿疣副基底细胞中发现了大量直径在45~55nm边缘锐利但大小不规则的病毒样颗粒.