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蚁龙通痹汤对兔膝骨关节炎软骨细胞凋亡调控基因表达的影响
目的:观察蚁龙通痹汤对兔膝骨关节炎病理形态及软骨细胞凋亡和凋亡调控基因Bcl-2及其抑制基因Bax的影响,探讨其治疗骨关节炎可能的作用机制.方法:将40只日本雄性大耳白兔按体重分为4组,即正常组,模型组、蚁龙通痹汤组、葡立胶囊组,每组10只.除正常组外,其余各组均行右侧膝关节前交叉韧带切断建立骨关节炎病变模型.造模后第2天开始给药(葡立胶囊0.1g·kg-1· d-1,蚁龙通痹汤生药0.6 g·kg-1.d-1,溶于10 mL生理盐水中灌胃,每日1次),连续4周.观察各组兔膝关节软骨及滑膜组织病理形态学改变,测定关节液中肿瘤坏死因子(TNF)-α和白介素(IL)-1β含量,并用TUNEL法检测软骨细胞凋亡,分析软骨中凋亡调控基因Bcl-2及其抑制基因Bax表达情况.结果:与正常组比较,模型组动物关节液IL-1β和TNF-α含量、软骨细胞凋亡率、Bcl-2、Bax及Bcl-2/Bax、关节外在表现和软骨病理组织学均出现明显变化;与模型组比较,蚁龙通痹汤组、葡立胶囊组各项指标均有明显改善,差异有统计学意义(P<0.05).蚁龙通痹汤组、葡立胶囊组组间差异有统计学意义(P<0.05).结论:蚁龙通痹汤能够减少兔膝骨关节炎关节液IL-1β和TNF-α的分泌,显著降低软骨细胞凋亡率,提高Bcl-2/Bax而达到对软骨组织保护的作用.
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孕鼠肝内胆汁淤积症致胎鼠心肌细胞凋亡
妊娠肝内胆汁淤积症(intrahepatic cholestasis of pregnancy,ICP)是妊娠期特有的并发症,临床表现为妊娠中、晚期出现皮肤瘙痒和/或黄疸;孕妇血液中胆汁酸水平明显增加;并可经胎盘转运至胎儿,致胎儿脐静脉血和羊水中胆汁酸浓度也异常增高.大量临床研究显示,ICP孕妇血液中胆汁酸水平愈高,胎儿窘迫发生率亦愈高[1].药理学和毒理学基础研究表明,胆汁酸对动物组织和细胞具有明显的毒性作用,可以引起细胞凋亡和/或死亡.本研究应用雌、孕激素建立ICP孕鼠模型,探讨ICP时胎鼠心肌细胞凋亡及凋亡调控基因BCI2-和BAX的表达.
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Tet基因表达调控系统及其应用
基因治疗中导入基因表达时间和水平的调控极其重要.哺乳动物细胞中用到的诱导型载体主要与启动子有关,如热休克蛋白(Hsp)启动子可在高温下被诱导,还有重金属、糖皮质激素诱导的启动子等,但这些系统均存在着诱导表达不具备特异性、系统处于关闭状态时表达有遗漏以及诱导剂本身具有毒性会对细胞造成损伤等缺陷.如果设置一种导入基因的"开关",能调控基因的表达,则有望大幅度提高基因治疗在临床应用的安全性.1992年,Gossen和Bujard[1]首次成功地利用原核基因调控元件构建了真核细胞基因表达调控系统--四环素基因表达调控系统(Tet系统),该系统能通过在培养基中加入或者去除四环素或其衍生物(如强力霉素)诱导或抑制所感兴趣基因的表达,故被广泛应用于基因表达调控、蛋白质功能和基因功能研究以及基因治疗研究中.本文就近年来Tet系统的研究进展等做一综述.
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变形链球菌耐酸性缺陷株的构建
变形链球菌(简称变链菌)是主要的致龋菌,耐酸性是其关键的毒力因子,但对其基因调控机制并未明了.本实验欲用转座子Tn917随机诱变变链菌野生株UA159,筛选耐酸性变异的突变株,以便于找到一个与耐酸性相关的调控基因.
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临床常见产AmpC β-内酰胺酶菌株中染色质ampD基因的测定与分析
AmpC β-内酰胺酶(简称AmpC酶)的产生由其产酶基因所控制.细菌染色质上AmpC酶的基因包括结构基因ampC和多种调控基因ampR、ampD和ampG等.
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有丝分裂纺锤体检验点基因在肿瘤中的作用研究进展
细胞分裂周期是一个受到严格调控、保守有序的过程.在细胞有丝分裂过程中纺锤体微管从两极发出分别和姐妹染色单体动粒相连,牵引将两套姐妹染色单体分别进入子代细胞,这一过程被高度保守的信号机制所调控,这些起关键作用的调控基因称为有丝分裂纺锤体检验点基因(the mitotic spindle assembly checkpoint,SAC).研究发现SAC基因和肿瘤的发生、发展密切相关.本文就队SAC基因的分子生物学特点,SAC基因与肿瘤的关系的研究进展进行介绍.
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造血发育调控基因在白血病中的研究进展
正常造血干细胞(HSC)具有自我更新和多向分化的潜能,能在体内重建造血系统.而在病理状态下,当HSC不断地增殖但分化受阻时,就会形成白血病干细胞(LSC),从而促进和维持了白血病的发生[1-2].
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细胞凋亡及其调控基因与萎缩性胃炎
细胞凋亡是指在一定生理或病理条件下,由基因编程控制下的细胞主动死亡过程.本文从细胞凋亡的基本概念、形态学特征、生物学标志,细胞凋亡调控基因(Bcl-2基因、ICE酶系家族、TNF受体家族、myc、p53)以及细胞凋亡及其调控基因与萎缩性胃炎的关系等诸多方面加以阐述,以期对胃癌前病变发生机制的进一步了解及对胃癌的预防提供理论依据.
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Bcl-2基因的研究进展
Bcl-2作为一种重要的凋亡调控基因,他不仅能够抑制细胞凋亡,延长细胞寿命,而且参与细胞增生的调控,他可以调控细胞由G0期向S期转换的时间,其过表达可以延长静止细胞的细胞周期进程,但不影响细胞的生长.据研究显示,Bcl-2的磷酸化亦能影响细胞周期进程,此外,Bcl-2在肿瘤的形成及肿瘤多药耐药的形成中也起着重要的作用.因此通过对Bcl-2基因不断深入的研究,可为肿瘤治疗提供新的思路和启示.
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生长抑素和生长激素对急性重症胰腺炎胰腺细胞凋亡的影响
目的:探讨生长抑素联合生长激素治疗大鼠急性坏死性胰腺炎对胰腺细胞调亡和调控基因Bax和Bcl-2的影响.方法:以牛胆酸钠诱导SD大鼠急性坏死性胰腺炎模型,并应用TUNEL染色,免疫组化SABC法检测胰腺组织中基因Bax、Bcl-2蛋白表达以及生长抑素联合生长激素治疗后对胰腺细胞凋亡及凋亡调控基因Bax、Bcl-2蛋白表达的影响.结果:TUNEL染色显示生理盐水治疗组胰腺细胞凋亡指数显著低于生长抑素治疗组和生长抑素联合生长激素治疗组.免疫组化SABC法生长抑素联合生长激素治疗组胰腺细胞Bax染色阳性率明显高于生理盐水组,而生长抑素治疗组Bax染色阳性率虽高于生理盐水组,但无统计学意义;生理盐水组胰腺细胞Bcl-2染色阳性率明显高于生长抑素治疗组及生长抑素联合生长激素治疗组.结论:生长抑素治疗急性坏死性胰腺炎的机制之一可能是诱导损伤的胰腺细胞凋亡以减轻胰腺炎症反应,细胞凋亡机制可能与抑制Bcl-2的表达有关而与促进Bax的表达无关;生长抑素和生长激素联合治疗急性坏死性胰腺炎的机制之一可能是诱导损伤的胰腺细胞凋亡,这机制可能与促进Bax的表达及抑制Bcl-2的表达有关.
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核因子-KB与大肠肿瘤细胞凋亡及增生的关系
目的:通过观察大肠腺瘤、腺癌和正常大肠组织中的细胞凋亡、细胞增生及其调控基因Bcl-2,BcI-Xl,C-myc和核因子-κB的表达状态,探讨核因子-κB在大肠癌发病过程中的作用.方法:利用DNA缺口末端标记技术和NF-кB,Bcl-2,Bcl-Xl,C-myc,PCNA蛋白免疫组化染色,原位检测30例大肠腺瘤和30例大肠腺癌中凋亡细胞、细胞增生和NF-кB,Bcl-2,Bel-Xl,C-myc阳性表达细胞的密度和分布,以10例正常大肠组织作对照.结果:NF-fcB,Bcl-2,Bcl-Xl,C-myc蛋白的表达率和表达强度腺癌和腺瘤高于正常组织(70.9±7.2vs 54.0±4.5 vs 30.6±2.4;78.2±8.3 vs 55.6±6.5 vs 11.0±1.9;77.3±6.5 vs 56.4±4.7vs 9.3±1.1;70.3±6.7 vs 50.1±4.2vs14.2±1.7,P<0.01),腺癌高于腺瘤(70.9±7.2vs54.0±4.5;78.2±8.3vs 55.6±6.5;77.3±6.5 vs 56.4±4.7;70.3±6.7vs 50.1±4.2,P<0.01).腺瘤和腺癌中的凋亡细胞指数均高于正常组织(105.9±6.1 vs31.5±3.7vs 10.0±1.5,P<0.01),腺瘤高于腺癌(105.9±6.1vs 31.5±3.7,P<0.01).腺癌和腺瘤中的细胞增生高于正常组织(75.4±5.6 vs 50.7±4.9vs 29.6±3.0,P<0.01),腺癌高于腺瘤(75.4±5.6 vs 50.7±4.9,P<0.01).结论:NF-κB在大肠肿瘤中促进细胞增生、抑制细胞凋亡,在其发病过程中发挥重要作用.
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miR-146b-5p异常表达对胰腺癌细胞生物学特性的影响
MicroRNAs( miRNAs)是由一类内源性的非编码RNA组成,长度大约20 ~24 nt,来源于长的前体pri-miRNA和pre-miRNA[1-3].在多细胞生物体中,它通过不完全碱基互补配对的方式识别靶位点,转录后调控基因的表达[4-5].尽管过去的几年中通过基因芯片筛查肿瘤特异性miRNA有很大的进展[6],但miRNA影响肿瘤形成和发展的机制仍不清楚.本研究检测6株胰腺癌细胞miR-146b-5p的表达,观察其对胰腺癌细胞生物学特性的影响.一、材料与方法1.细胞培养和转染:人胰腺癌细胞系MIA PaCa-2、BxPC-3、AsPC-1、PANC1、5W1990、PC-3为同济医院胆胰外科实验室保存,3例正常胰腺组织为胆管肿瘤行胰十二指肠切除术的手术标本.取对数生长期miR-146b-5p表达低的MIAPaCa-2细胞,采用lipofectamineTM 2000将miR-146b-5p mimics和阴性对照miRNA(广州锐博公司)分别转染细胞,按照lipo2000转染试剂盒说明书操作.
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EGFR/PI3 K/Akt信号通路在结直肠癌中的研究进展
结直肠癌作为消化道常见的恶性肿瘤之一,对人类的健康威胁巨大,在世界范围内男性高发肿瘤中占第三位,女性中占第二位,世界上每年约超过一百万新发结直肠癌患者[2]。结直肠癌一般高发于经济发达的国家和地区,近年来我国经济发展和城市化加快,居民生活习惯及饮食习惯较以前有明显改变,结直肠癌的发病率及死亡率均出现明显上升趋势,且高于世界平均水平[1-2]。 EGFR/PI3K/Akt信号传导通路在肿瘤的发生发展、肿瘤增殖、转移、化疗耐受、抗细胞凋亡方面发挥重要的作用。随着近年来有关PI3K-Akt信号传导通路在调控基因的表达、细胞增殖和抗细胞凋亡等方面的生理作用逐渐引起人们的重视。针对PI3K-Akt信号通路的肿瘤靶向治疗亦成为研究的新的着重点,本文着重于该信号通路在结直肠癌中的研究做一综述。
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薯蓣皂苷对血管内皮细胞凋亡及凋亡调控基因的影响
近年来,有关细胞凋亡的研究飞速发展,并不断有所突破。
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老年宫颈癌患者癌组织中转化生长因子β1和P53的表达
近年,随着分子生物学的发展,人们逐渐认识到转化生长因子(TGF)β1、P53在调节宫颈肿瘤的发生、发展及预后中起到重要作用[1-3],而作为细胞周期调控基因TGFβ1、P53间的相关性的研究报道较少.我们对P53和TGFβ1在宫颈肿瘤组织中的表达情况进行了联合分析,旨在探讨P53和TGFβ1作为宫颈癌诊断指标的可行性,为临床诊断提供理论依据.
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线粒体DNA与肿瘤的相关性研究
肿瘤细胞中存在许多生长调控基因的突变.从临床医学的角度而言,如果能确定肿瘤细胞的特征性基因变化,通过基因技术发现之,并明确所产生的生物学功能上的改变,那么对于肿瘤的早期诊断以及治疗都有重要意义[1].近年来,人们把目光投向了线粒体DNA(mtDNA),它与肿瘤之间的相关性成为新的研究热点.
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房颤病人心房肌浆网钙调控基因mRNA表达变化的研究
心房颤动(房颤)的发生机制十分复杂,我们主要研究房颤病人心房肌肌浆网钙调控基因Ca2+-ATP 酶(SERCA)、尼兰丁受体(RyR) 及三磷酸肌醇受体(IP3R)mRNA表达的变化,探讨房颤时心肌细胞内Ca2+超负荷的原因.
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胰腺癌组织STAT3的表达及其与细胞增殖和凋亡的相关性研究
STAT3是信号传导和转录激活因子(signal transducer and activator of transcription,STAT)家族的成员之一,在肿瘤的发生发展过程中起重要的作用.本研究用免疫组化方法检测胰腺癌组织中PSTAT3和其调控基因Bcl-xL的蛋白表达情况,分析胰腺癌组织中PSTAT3与胰腺癌临床病理特征及凋亡、增殖的关系,从而探讨STAT3这一细胞信号传导通路中的关键环节在胰腺癌发生发展过程中的重要作用.
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凋亡相关基因bcl-2和bax在小儿神经母细胞瘤中的表达及其意义
神经母细胞瘤(neuroblastoma,NB)是一种发展迅速、恶性程度及死亡率高、预后极差的小儿常见的恶性肿瘤.为探讨细胞凋亡调控基因bax、bcl-2蛋白及bcl-2mRNA在小儿神经母细胞瘤中的表达,我们进行了以下研究.
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胃肠道平滑肌肿瘤中血管形成与细胞凋亡的关系
通过检测胃肠道平滑肌肿瘤(gastrointestinal smooth muscle tumors,GISMT)中微血管密度(MVD)、血管内皮细胞生长因子(VEGF)和细胞凋亡指数(API)、凋亡调控基因bcl-2,以探讨血管生成、细胞凋亡及调控基因在GISMT发生发展过程中的作用及相互关系.