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速眠新Ⅱ、戊巴比妥钠联合地西泮对新西兰大白兔麻醉效果的比较
目的:制对比研究速眠新Ⅱ、戊巴比妥钠分别与地西泮联合使用的麻醉效果研究.方法:根据不同的麻醉剂选择,将30只新西兰大白兔分成两组(A、B),每组15只,其中A、B均为联合组.结果:两组麻醉诱导时间A组为平均3分钟,B组为平均10分钟.而麻醉维持时间B组为平均3h,A组为平均1.5h.苏醒时间A组为平均1.8h,B组为平均3.5h.结论:进行新西兰大白兔实验的麻醉方法较多,地西泮与麻醉药品的联合使用麻醉效果好,并能够缩短诱导时间,延长麻醉时间,能达到实验中实验兔耐受时间长的要求.
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常用动物实验麻醉药对离体蟾蜍心脏作用的比较
目的：观察氯胺酮、水合氯醛、氨基甲酸乙酯与戊巴比妥钠对离体蟾蜍心脏作用。方法：选用氯胺酮（40mg/kg）、水合氯醛（400mg/kg）、氨基甲酸乙酯（2000mg/kg）、戊巴比妥钠（40mg/kg）分别作用于离体蟾蜍心脏，观察不同实验动物麻醉药对离体蟾蜍心脏心率及心肌收缩力的影响。结果：组内比较时四种麻醉药均对心率有明显的抑制作用（P<0.05），且氨基甲酸乙酯具有显著统计学意义（P<0.01）；四种麻醉药均对心肌收缩力有明显的抑制作用（P<0.05），且氯胺酮和戊巴比妥钠具有显著统计学意义（P<0.01）。结论：四种实验动物麻醉药对离体蟾蜍心脏均有抑制作用，以氨基甲酸乙酯的心脏影响大。
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藤茶总黄酮对戊巴比妥钠催眠作用的影响
目的:探讨藤茶总黄酮对戊巴比妥钠致小鼠催眠作用的影响及其作用机制.方法:取昆明小鼠(雌雄各半),随机分为5组,每组12只,分为藤茶总黄酮高、中、低剂量组、生理盐水组、酸枣仁汤组,连续给药7d,观察藤茶总黄酮对戊巴比妥钠致小鼠催眠作用的影响,并考察藤茶总黄酮对小鼠中枢的直接作用及对小鼠自主活动的影响.结果:藤茶总黄酮各剂量组均能缩短戊巴比妥钠致小鼠睡眠潜伏期并延长小鼠睡眠时间,其中藤茶总黄酮高剂量组对协同戊巴比妥钠缩短小鼠睡眠潜伏期和延长睡眠时间作用显著,且其延长小鼠睡眠时间作用较酸枣仁汤组明显;藤茶总黄酮对小鼠中枢作用不明显.结论:藤茶总黄酮具有协同戊巴比妥钠的作用,作用机制可能与其抑制肝药酶活性,减慢戊巴比妥钠代谢有关.
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美泰宁对睡眠作用的影响研究
目的观察美泰宁对小鼠睡眠的影响.方法按<中药药理研究方法学>中改善睡眠检验方法进行测定.结果中、高剂量组能明显延长戊巴比妥钠诱导的睡眠时间及增加戊巴比妥钠诱导的睡眠发生率(P＜0.01).结论美泰宁具有改善小鼠睡眠的作用.
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天麻成分B小鼠灌胃给药的急性毒性与催眠作用研究
目的 了解天麻成分B小鼠灌胃给药的急性毒性,观察其对戊巴比妥钠致小鼠催眠作用的影响.方法 选择SPF级昆明种小鼠为受试对象,采用急性经口毒性试验测定半数致死量(LD50)和大耐受量(MTD);采用对阈上剂量和阈下剂量戊巴比妥钠所致催眠作用的影响试验,评价药物对中枢神经系统的作用.结果 天麻成分B小鼠灌胃给药的LD50为1.2069g/kg体重,LD5为0.93464g/kg,MTD为0.8717g/kg;天麻成分B小鼠灌胃给药,单独使用并不能引起小鼠睡眠,但可以使戊巴比妥钠腹腔注射引起的小鼠睡眠作用增强,睡眠潜伏期缩短,睡眠持续时间延长.结论 天麻成分B小鼠灌胃给药有一定毒性;天麻成分B小鼠灌胃给药对中枢神经系统可能有一定的抑制作用,不能直接引起小鼠睡眠,但可增强戊巴比妥钠对小鼠的催眠作用.
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调和肝脾方治疗失眠的实验研究
目的 研究中药复方制剂调和肝脾方对失眠作用的影响.方法 通过记录小鼠睡眠时间及入睡率等来观察调和肝脾方对小鼠戊巴比妥钠阈剂量及阈下剂量作用下睡眠的影响;通过注射对氯苯丙氨酸(PCPA)诱导失眠大鼠模型,并观察给药后对5-羟色胺(5-HT)含量的影响.结果 调和肝脾方能显著延长阈剂量小鼠的睡眠时间(P＜0.01),对小鼠睡眠持续时间具有延长作用(P＜0.01);能增加阈下剂量小鼠的入睡率(P＜0.01);能显著升高失眠大鼠脑内5-HT含量(P＜0.05).结论 调和肝脾方治疗失眠有一定疗效.
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电针对侧脑室注射孤啡肽实验性RA痛阈和皮肤FOS表达的影响
目的:观察电针对大鼠实验性关节炎痛阈和皮肤c-fos表达的作用及侧脑室注射孤啡肽(OFQ)对电针效应的影响.方法:将福氏完全佐剂(FCA)注入SD大鼠踝关节腔造成类风湿性关节炎的模型.44只SD大鼠随机分为A[模型+侧脑室注射生理盐水(NS)+电针,n=8],B(模型+侧脑室注射OFQ+电针,n=8),C(正常对照,n=8),D(模型,n=10)和E(模型+电针,n=10)组.大鼠麻醉(戊巴比妥钠30 mg/kg,I.p.)后,参照Noble方法定位,将OFQ(20 μL,50 μg/mL)或NS(20 μL)注入侧脑室(30 min内注完,保留1 min).右侧"太溪"和"足三里"针刺后连接WQ-10C多用途电子穴位测定治疗仪,用疏密波形,频率20/100Hz交替,电压2～4 V,波宽0.2～0.6 ms,持续20 min,电针每天1次,连续5天.痛阈用气压弹簧棒测定右后足掌心皮肤加压时动物的缩腿反应,每天1次,共测5天.取大鼠右后足垫部皮肤及皮下组织,采用免疫组织化学ABC法测定RA模型建立后各组c-fos表达.结果与结论:①电针对实验性RA关节痛具有明显的镇痛效应;②电针明显提高实验性RA大鼠痛阈,具有明显的后效应,注射OFQ对抗电针提高实验性RA大鼠痛阈,而且对抗电针的后效应;③电针抑制实验性RA诱导的FOS表达,注射OFQ对抗电针抑制FOS的表达.
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不脱钙骨超薄切片的制备
对于骨折和骨病的深入研究，要求建立不脱钙骨超薄切片技术。在超微结构水平观察骨组织内钙盐的沉积、构筑及其变化，有助于阐明骨病、骨吸收和骨修复过程中，钙盐的代谢活动；运用脱钙骨制备的标本，不能提供相应的资料。1 材料和方法1.1 动物和取材 试验用成年雄性Wistar大鼠，在戊巴比妥钠腹腔麻醉下，迅速取出股骨头、股骨颈和腰椎椎体。1.2 依次按以下步骤制备超薄切片：（1）立即投入2％多聚甲醛-3％戊二醛溶液内固定2小时，4℃；（2）4℃0.1M磷酸缓冲液冲洗2小时；（3）4℃1％锇酸溶液后固定2小时；（4）梯度丙酮脱水；（5）浸渗Spurr：用丙酮-Spurr混合液分3步浸渗，每步2小时。丙酮：Spurr的比例依次为3∶1，1∶1和1∶3；（6）Spurr包埋液包埋；（7）LKB-V超薄切片机和钻石刀切片，厚度500埃；（8）醋酸铀-枸橼酸铅双重复染。
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川芎嗪衍生物liguzinediol对戊巴比妥钠致急性心力衰竭大鼠血流动力学的影响
目的:观察liguzinediol(2,5-二羟甲基-3,6-二甲基吡嗪)对戊巴比妥钠致急性心力衰竭大鼠血流动力学的影响.方法:40只雄性SD大鼠右侧股静脉恒速注射戊巴比妥钠制备急性心衰模型,造模后随机分为5组:模型组(给予NS),阳性对照组(地高辛,22.5 μg· kg -1),liguzinediol(5,10,20 mg·kg-1)3个剂量组,每组8只,稳定后经恒速注射泵右侧股静脉单次给药,多道生理记录仪记录全过程中大鼠血流动力学指标的变化.结果:静脉给药后,liguzinediol 3个剂量组均使大鼠左心室收缩压(LVSP)、左心室内压力大上升速度(+dp/dtmax)、左心室内压力大下降速度(- dp/dtmax)、收缩压(SAP)、舒张压(DAP)在1min内开始显著增加,并且对心率影响不大,心肌收缩力增强.结论:liguzinediol对急性心衰大鼠心脏具有正性肌力作用.
关键词： liguzinediol 急性心力衰竭 戊巴比妥钠 血流动力学 -
基于催眠药效筛选考察参苓颗粒的提取纯化工艺
目的:通过主要催眠药效研究对参苓颗粒提取纯化工艺进行筛选,为确定该制剂的制备工艺提供实验依据.方法:自制单提油醇沉、单提油不醇沉、合提油醇沉及合提油不醇沉4组不同工艺路线的参苓颗粒浸膏,采用翻正反射睡眠试验考察各组浸膏对小鼠阈下、阈剂量戊巴比妥钠协同作用的影响;采用环磷酰胺、氢化可的松致阴血亏虚及水平台法剥夺睡眠48 h,建立阴血亏虚失眠证候大鼠复合模型,通过HPLC测定各组浸膏大鼠脑组织中氨基酸类神经递质谷氨酸(Glu),甘氨酸(Gly),牛磺酸(Tau)及γ-氨基丁酸(GABA)的含量变化.结果:4组浸膏对小鼠阈下、阈剂量戊巴比妥钠均表现不同程度的协同作用,尤以单提油醇沉组显著缩短小鼠睡眠潜伏期、显著延长小鼠睡眠时间;与空白组比较,模型组大鼠脑组织Glu,Tau及GABA含量均明显升高,Glu/(Tau+ GABA)比例增高,经各浸膏组干预后含量均不同程度下降,其中单提油醇沉组表现更为显著,Glu/(Tau+ GABA)比例也在下调.结论:参苓颗粒的制备工艺优选单独提取挥发油合并醇沉的纯化工艺路线.
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独活香豆素组分对戊巴比妥钠及巴比妥钠催眠作用的影响
目的 观察独活香豆素组分(TCA)对戊巴比妥钠及巴比妥钠催眠作用的影响.方法 将小鼠随机分为溶媒(5%吐温-80,20 mL/kg)、氯霉素(25 mg/kg)及 TCA(50、100 mg/kg)组,等容灌胃给药 1h 后,再腹腔注射戊巴比妥钠40 mg/kg 或巴比妥钠 200 mg/kg,观察催眠潜伏期和催眠时间.结果 氯霉素和高、低剂量的TCA使戊巴比妥钠的催眠时间延长 249.8%、171.1%和 78.7%,均 P<0.01;对巴比妥钠的催眠作用无明显影响.结论 TCA对小鼠肝微粒体细胞色素P450具有一定的抑制作用.
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茶氨酸对戊巴比妥钠镇静作用的影响
目的:观察茶氨酸对戊巴比妥钠诱导的自发活动的双向影响.方法:采用自发活动视频分析系统(Dig BehvLA)观察戊巴比妥钠(5,10 mg·kg~(-1))、茶氨酸(0.25,0.5,1.0,2.0,4.0 g·kg~(-1))及其合用后的镇静作用.以翻正反射消失为指标,观察两者对催眠作用的影响.结果:与生理盐水组比较,单用茶氨酸呈剂量依赖性的抑制边上活动时间占比,除0.25g·kg~(-1)组无显著性差异外,其他剂量组分别为P＜0.05,P＜0.01,P＜0.01和P＜0.01,总路程、边上活动时间也有同样的趋势,占比与总路程有良好的线性关系(r=0.999 4,P＜0.01).戊巴比妥钠(5 mg·kg~(-1))合用茶氨酸(≤2.0 g·kg~(-1))时,占比出现先降后升现象,与生理盐水组比较,合用茶氨酸(≤1.0 g·kg~(-1))显著抑制占比(均为P＜0.01),而2.0 g·kg~(-1)茶氨酸则无作用;与戊巴比妥钠组比较,合用茶氨酸(≤1.0 g·kg~(-1))显著加强其作用(均为P＜0.01),2.0 g·kg~(-1)茶氨酸与之相近,无显著性差异;总路程、边上活动时间呈现同样的趋势.戊巴比妥钠(10 mg·kg~(-1))合用茶氨酸(≤1.0 g·kg~(-1))时,则出现先升后降现象;与生理盐水组比较,各组显著抑制占比(均P＜0.01);与戊巴比妥钠组比较,合用0.25 g·kg~(-1)4茶氨酸时明显回升(P＜0.01),而后随剂量增加逐步回落,无显著性差异;总路程、边上活动时间呈现同样的趋势.茶氨酸剂量依赖性加强戊巴比妥钠(25 mg·kg~(-1))的催眠作用.结论:茶氨酸对戊巴比妥钠的镇静作用具有复杂的双向影响,而对催眠则具有加强作用.
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槐定碱致癫痫样作用研究
目的:观察槐定碱(sophoridine)致痫大鼠清醒核团脑电(IEEG)变化特点;研究痫样特征分类和致痫作用机制.方法:采用慢性埋藏电极记录清醒大鼠核团脑电(intracranial electroencepholography,IEEG)的方法,观察槐定碱对大鼠产生痫样放电的特点,并判断致痫原发部位;采用小鼠模型实施工具药拮抗实验,探讨槐定碱所致癫痫样发作的作用机制及类型.结果:海马齿状回(DG)内颗粒细胞对于槐定碱致病作用敏感,其次是内侧穿行通路(PP)和颞叶皮层(TC).阈下催眠剂量的地西泮、催眠剂量的巴比妥钠可以对抗槐定碱引起的痫样惊厥的发生;对抗大电休克剂量的苯妥英钠不能对抗槐定碱引起的痫样惊厥的发生,但可以减缓惊厥的发生时间和小鼠的死亡时间.结论:海马内部异常放电在槐定碱致痫作用中可能起到重要作用,海马部位可能是痫样发作的原发部位;槐定碱的致动物癫痫样发作属于临床小发作类型,地西泮是较理想的预防药物.
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RP-HPLC测定石菖蒲、水菖蒲药材中β-细辛醚、α-细辛醚的含量
石菖蒲具有开窍豁痰、化湿和胃、醒神益智等多种功效.其主要活性成分为β-细辛醚、α-细辛醚,具有解痉、抗惊厥和对戊巴比妥钠有协同等作用[1].关于石菖蒲β-细辛醚、α-细辛醚成分的测定已有报道[2],本研究在此基础上,采用RP-HPLC法测定石菖蒲、水菖蒲药材中β-细辛醚、α-细辛醚的含量.
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乌拉坦和戊巴比妥钠对手术后长期饲养动物的影响
目的:探讨麻醉药乌拉坦的副作用及手术造模后需长期饲养的动物麻醉用药的选择.方法:将大鼠用乌拉坦(n=90)及戊巴比妥钠(n=48)分别进行麻醉,观察较长期的生存及死亡状态,并对乌拉坦对动物脏器的影响做了肉眼观察,度量比较,扫描电子显微镜下观察肠内壁绒毛,腺体以及微绒毛的形态特征.结果:使用乌拉坦的动物死亡率非常高,达33.3-40.0%,死亡动物的内脏严重受损.使用戊巴比妥钠的大鼠死亡率在假手术组为8.3%,在手术组为6.25%.假手术组以及手术组与正常组比较,脾系数极度减小(0.78±0.38,0.77±0.21 vs 3.44±1.16,P＜0.01),盲肠与回肠直径极度增加(3.20±0.79,2.23±0.34 vs 1.26±0.24,P＜0.01;1.68±0.44,1.46±0.36 vs 0.46±0.07,P＜0.01),细胞变性严重.透射电镜下观察到用乌拉坦19 wk的大鼠,小肠黏膜上皮细胞明显水肿,表面有的微绒毛已脱落,整体数量减少.结论:乌拉坦不适用于对手术后需长期饲养的动物进行麻醉,而戊巴比妥钠可作为术后需长期饲养动物的手术麻醉用药.
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致敏大鼠肺内细胞增殖与凋亡的研究
为探讨支气管哮喘时气道重塑的特点及细胞增殖与凋亡机制对气道重塑的调节，我们检测了卵蛋白(OVA)致敏不同时间大鼠气道粘膜下细胞增殖及凋亡指数的变化、增殖细胞核抗原（PCNA）表达的变化以及气道基底膜Ⅲ型胶原表达的变化，并对与细胞增殖、凋亡密切相关的Fas/Fas L抗原表达进行研究。 材料与方法雄性SD大鼠24只，随机分为4组，每组各6只。对照1周组和对照3周组：以生理盐水代替抗原进行注射和雾化吸入；致敏1周组和致敏3周组：参照文献［1］方法给予OVA致敏和激发。雾化后分别于第7、21d经0.3%戊巴比妥钠麻醉，取肺组织。
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健康犬和急性肺损伤犬的压力容积曲线与"佳"呼气末正压的关系
材料与方法杂种犬10只,体重为8～13 kg,雌雄不拘.用3%的戊巴比妥钠30mg/kg麻醉后置于仰卧位固定,实验期间则给予1～3 mg.kg-1.h-1维持麻醉,静脉滴注林格液7ml.kg-1.h-1.经口气管插管后,用Evita-2型呼吸机机械通气,用辅助/控制模式,潮气量10～12 ml/kg,呼吸频率20次/min,吸呼气时间比为1:1.5,通气过程中维持吸入气氧浓度(FiO2)24%,动脉血二氧化碳分压(PaCO2)在正常范围.在呼吸稳定的状态下,测定气道峰压(Ppeak)、平台压(Pplat)、平均气道压(Pmean)、胸肺总顺应性(C).分离右侧股动脉、股静脉.将动脉穿刺套管针插入股动脉后,通过三通开关与压力换能器相连,供监测动脉血压(BP)、心率(HR)和采集动脉血气标本.将7F Swan-Ganz导管插入股静脉,其末端连接压力换能器监测肺动脉平均压(PAP)、肺毛细血管楔压(PCWP)、中心静脉压(CVP),用热稀释法测定心输出量(CO),以上指标均测定3次,取平均值.计算肺循环阻力(PVR)、体循环阻力(SVR)、动脉血氧运输量(DO2).然后分别升高呼气末正压(PEEP)至5 cm H2O和10 cm H2O,间隔30min后重复测定上述指标.
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木瓜蛋白酶致大鼠肺气肿中碱性成纤维细胞生长因子mRNA的表达
碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）是一种具有促进细胞生长增殖作用的多肽类生长因子，在维持机体的生长发育及促进多种组织的损伤修复中起着十分重要的作用。我们通过对木瓜蛋白酶（Papain）致大鼠肺气肿模型肺组织和肺泡巨噬细胞bFGF mRNA表达的研究，来探讨其在肺气肿形成过程中与肺组织Ⅰ、Ⅲ型胶原增长的关系。 材料与方法（1）肺气肿动物模型的制备与分组：健康Wistar大鼠42只，体重200～250 g，雌雄不拘（由同济医科大学实验动物中心提供），随机分为肺气肿模型1，3，5，7，15，30天组和正常对照组，每组6只。以2%戊巴比妥钠（50 mg/kg）腹腔注射麻醉动物后，实验组气管内注射8%木瓜蛋白酶(美国Sigma公司)0.05 ml/100 g，对照组以同样方法注入相应量的生理盐水。（2）组织细胞标本制作：以2%戊巴比妥钠（50 mg/kg）腹腔注射麻醉大鼠后，行气管插管，向肺内灌注生理盐水，每次5～10 ml，共8次，回收支气管肺泡灌洗液，离心，弃上清，同法用RPMI1640（美国Gibco产品）培养液洗涤细胞1次，用含10%新生小牛血清（Gibco产品）的RPMI1640调细胞浓度至1×106/ml，加入铺有盖玻片的6孔培养板中，置37℃，5% CO2培养箱（Hera Cell德国产）培养24 h后，肺泡巨噬细胞贴壁，取出长有细胞的盖玻片，用4%多聚甲醛固定20～30 min，再用酒精梯度脱水后，置-70℃冰箱保存备用。灌洗肺后取下双肺，向肺内注入4%多聚甲醛，直至肺膨胀边缘变锐、胸膜展平，结扎气管，浸泡于4%多聚甲醛中固定10 h。取左下肺叶常规石蜡包埋、切片、HE染色。（3）免疫组织化学染色：用即用型链酶亲和素-生物素-过氧化物酶复合物(Strept Avidin-Biotin-enzyme Complex，SABC)免疫组织化学染色试剂盒和兔抗鼠collagen Ⅰ及collagen Ⅲ多克隆抗体及DAB显色试剂盒（武汉博士德生物工程有限公司）进行免疫组织化学染色。（4）bFGFmRNA原位杂交：用bFGF寡核苷酸探针和敏感加强型原位杂交检测试剂盒（武汉博士德生物工程有限公司）对组织细胞标本原位杂交。
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急性缺氧时内源性一氧化碳的变化及外源性一氧化碳对肺动脉高压的影响
内源性一氧化碳(CO)作为一种新型的血管扩张剂可通过激活平滑肌细胞的鸟苷酸环化酶,增加环磷酸鸟苷(cGMP)水平, 维持正常血管张力[1].我们的实验观察了急性缺氧时CO的变化及外源性CO对肺动脉高压的影响.材料与方法雄性Wistar大鼠60只,体重220～250 g,实验分为两部分:第一部分30只,用于观察急性缺氧时内源性一氧化碳的变化;第二部分30只,用于观察外源性一氧化碳对肺动脉高压的影响.3%戊巴比妥钠50 mg/kg腹腔注射麻醉后,向右颈外静脉和左颈总动脉分别插入自制导管至肺动脉及颈总动脉以测定平均肺动脉压(mPAP)和体动脉压:收缩压(SBP)、舒张压(DBP)、平均动脉压(MAP).气管切开行气管插管并接美国DH-140型小动物呼吸机控制呼吸,维持呼气末二氧化碳分压(PETCO2) 在35～45 mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa).稳定20 min测量基础值后,进行以下两部分实验.第一部分:大鼠随机分为三组:对照组(10只):大鼠吸入 21% O2 30 min;缺氧组(10只):大鼠吸入90% N2+10% O2的混合气30 min; ZnPPIX组(10只):腹腔注入血红素氧化酶抑制剂ZnPPIX 10 μmol/kg后,大鼠吸入90% N2+10% O2的混合气30 min.然后分别从三组大鼠的颈动脉导管采集动脉血测血气,血浆CO含量及血浆cGMP含量.并取肝、肾、肺组织称重、匀浆.血及组织样品在3 000 r/min离心 15 min,取血浆及组织上清液进行CO分析.
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坏死性胰腺炎大鼠肠粘膜细胞表皮生长因子及其受体表达的变化
利用大鼠坏死性胰腺炎模型，测定小肠粘膜上皮细胞内表皮生长因子(EGF)含量、及其受体与mRNA表达。探讨这些变化与坏死性胰腺炎肠粘膜屏障损伤的关系。 1.材料与方法：(1)动物与分组：采用雄性Spragure-Dawly大鼠50只，体重340～380 g，随机分为5组：虚拟手术组(Ⅰ组)；其余4组分别为制模后3 h组(Ⅱ组)、6 h组(Ⅲ组)、12 h组(Ⅳ组)处死和自然死亡组(Ⅴ组)。(2)大鼠急性坏死性胰腺炎模型的制备：采用2.5%戊巴比妥钠，1 ml/kg腹腔内麻醉后，腹部正中切口打开腹腔，在胆总管进入十二指肠开口下缘处用金属夹夹住十二指肠，然后向胰管方向注入5%牛磺酸钠1 ml/kg，注射完毕后用丝线结扎胆总管，2 min后松开银夹及胆总管处的丝线，关腹。虚拟手术组，操作同试验组，注入等量生理盐水，术后自由饮水。(3)方法与步骤：切取1 mm×2 mm的空肠组织块，3%戊二醛固定，依次脱水、包埋、超薄切片及醋酸铀、枸橼酸铅双染色，在透射电镜下对小肠粘膜细胞超微结构进行观察。于屈韧带远侧取近段空肠2 cm，甲醛固定，常规脱水，石蜡包埋，5 μm连续切片，待作免疫组织化学及原位杂交染色。采用ABC法进行小肠粘膜细胞EGF及EGF受体的免疫组织化学染色，EGF受体mRNA采用地高辛随机引物原位杂交法。在单盲情况下应用四川大学研制的MIAS-300全自动图像分析仪，在每张免疫组织染色及原位杂交染色切片上任意选取20个阳性细胞进行吸光度扫描，计算平均吸光度值(A)，即单位面积内EGF含量、EGF受体或EGF受体mRNA的表达。结果以均数±标准差表示，应用第四军医大学统计教研室SPLM统计软件进行统计学处理。
