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稳定性同位素稀释技术结合气相色谱-离子阱质谱法检测葡萄酒中的氨基甲酸乙酯
目的 建立葡萄酒中氨基甲酸乙酯(EC)的测定方法.方法 使用气相色谱-离子阱质谱法和稳定性同位素稀释技术,采用硅藻土Extrelut NT进行基质固相分散萃取净化,二氯甲烷洗脱,选择离子储存方式SIS测定.结果 方法的线性范围在10～1000 μg/kg,检出限为2μg/kg,定量限为6 μg/kg.3个不同加标水平葡萄酒中氨基甲酸乙酯的平均回收率为88.5%～112.8%,RSD为5.8%～9.5%(n=5).结论 本方法准确可靠,可用于葡萄酒中氨基甲酸乙酯的测定.
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葡萄酒中氨基甲酸乙酯污染评估
目的 对葡萄酒中氨基甲酸乙酯进行污染评估,分析其摄入患肺癌的风险.方法采用个体食品研究方法了解葡萄酒中氨基甲酸乙酯的污染水平,结合2002年全国营养调查数据.剂量反应模型BMDL和暴露边界比(Margin of Exposure,MOE)进行评估.结果葡萄酒中氨基甲酸乙酯平均暴露量每天1.6 ng/kg BW患肺癌的MOE为188 000;氨基甲酸乙酯较高的暴露量(97.5百分位)每天12.9 ng/kg BW,惠肺癌的MOE为23 000.结论对我国葡萄酒中氨基甲酸乙酯的暴露应给予关注.
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浙江省黄酒中氨基甲酸乙酯的含量及变化趋势研究
目的 了解浙江省黄酒中氨基甲酸乙酯(EC)含量现状及黄酒生产贮存期、流通货架期中EC的变化情况.方法 2008-2012年采用单纯随机法从浙江省超市、食品商场随机购买市售黄酒475份；同时采集生产企业不同酒龄贮酒49份进行EC含量调查,分别在4℃、室温、37℃下存放400 d进行贮存实验；2011年购买市售瓶、袋装黄酒各1份在室温放置400 d,定期测量EC含量,进行货架期贮存试验；样品采用D5-EC同位素稀释技术、碱性硅藻土固相萃取净化,气相色谱-质谱法测定EC.结果 2008-2012年浙江省黄酒中EC总检出 率为99％(472/475),中位数为70～112 μg/kg,第90百分位数为190 ～333 μg/kg,第95百分位数为214 ～ 393 μg/kg,大值为430 ～515 μg/kg;不同酒龄市售黄酒中EC含量随酒龄的增加而增加,贮酒EC含量的平均值与酒龄呈正相关(r=0.988).黄酒在4℃、常温、37℃存放400 d,EC含量从原来的74 μg/kg分别上升至86、127、509 μg/kg,差异有统计学意义(F=14.73,P＜0.01).同时,瓶、袋装黄酒EC含量随放置时问的延长而略有降低,分别从215和196 μg/kg降到184和158 μg/kg,放置250 d后随着存放时间的增加而增加,400 d后瓶、袋装黄酒中EC含量分别为252和210 μg/kg,EC含量差异有统计学意义(Z=2.37,P＜0.05).结论 浙江省黄酒中普遍存在EC,其含量与贮存时间、贮存温度有关.
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不同滋阴中药对小鼠诱发性肺肿瘤发生及抗肿瘤免疫功能的影响
目的:研究六味地黄丸和二冬膏对乌拉坦诱发性肺肿瘤小鼠的肿瘤发生情况和抗肿瘤免疫功能的影响.方法:雌性昆明种小鼠33只,使用乌拉坦(1 g·kg-1·d-1)注射诱发小鼠肺肿瘤,随机分为对照组、六味地黄丸组(ig 1.56 g·kg-1·d-1)和二冬膏组(ig 0.78 g·kg-1·d-1),连续给药100 d后肉眼及病理切片和苏木精-伊红染色观察药物对小鼠肺肿瘤发生的影响,测定脾指数、胸腺指数、巨噬细胞吞噬功能以及测定血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量.结果:与对照组比较,六味地黄丸和二冬膏给药组小鼠肺肿瘤诱发率明显降低,诱发率分别是63.6％,18.2％,36.4％.与对照组比较,六味地黄丸和二冬膏给药组小鼠脾指数、巨噬细胞活性明显增高(P ＜0.05或P＜0.01),小鼠血清中TNF-α含量明显降低(P＜0.05或P＜0.01).结论:六味地黄丸和二冬膏均能通过提高小鼠的抗肿瘤免疫功能和减少炎症因子产生来延缓乌拉坦诱发肺肿瘤的发生发展.
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附子和蒲公英对乌拉坦诱导肺癌小鼠中医体征的影响
目的:研究乌拉坦诱导肺癌小鼠的中医体征,观察附子和蒲公英对小鼠症状及肿瘤进展的影响.方法:每周2次、连续5周给小鼠腹腔注射乌拉坦建立小鼠肺癌模型,观察诱癌过程中小鼠外观、体温和外耳微循环变化,用能量代谢、红细胞ATP酶活性及血液流变学指标评价乌拉坦诱导肺癌小鼠的中医体征,并在模型建立同时用附子和蒲公英进行治疗,考察其对小鼠症状及肿瘤进展的影响.结果:乌拉坦诱导肺癌过程中小鼠逐渐出现畏寒喜暖、蜷缩少动、弓背毛松、体温下降、外耳和尾部血管紫暗现象,同时能量代谢和红细胞ATP酶活性降低,全血黏度及红细胞聚集指数增高.蒲公英对上述体征有增强趋势,但对肿瘤进展无影响；附子可以减弱上述体征、阻止肿瘤进展.结论:乌拉坦诱导的肺癌小鼠表现为寒凝血瘀中医体征,附子治疗能改善小鼠症状和体征,阻止肿瘤进展.
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乌拉坦和戊巴比妥钠对手术后长期饲养动物的影响
目的:探讨麻醉药乌拉坦的副作用及手术造模后需长期饲养的动物麻醉用药的选择.方法:将大鼠用乌拉坦(n=90)及戊巴比妥钠(n=48)分别进行麻醉,观察较长期的生存及死亡状态,并对乌拉坦对动物脏器的影响做了肉眼观察,度量比较,扫描电子显微镜下观察肠内壁绒毛,腺体以及微绒毛的形态特征.结果:使用乌拉坦的动物死亡率非常高,达33.3-40.0%,死亡动物的内脏严重受损.使用戊巴比妥钠的大鼠死亡率在假手术组为8.3%,在手术组为6.25%.假手术组以及手术组与正常组比较,脾系数极度减小(0.78±0.38,0.77±0.21 vs 3.44±1.16,P＜0.01),盲肠与回肠直径极度增加(3.20±0.79,2.23±0.34 vs 1.26±0.24,P＜0.01;1.68±0.44,1.46±0.36 vs 0.46±0.07,P＜0.01),细胞变性严重.透射电镜下观察到用乌拉坦19 wk的大鼠,小肠黏膜上皮细胞明显水肿,表面有的微绒毛已脱落,整体数量减少.结论:乌拉坦不适用于对手术后需长期饲养的动物进行麻醉,而戊巴比妥钠可作为术后需长期饲养动物的手术麻醉用药.
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乌拉坦浓度依赖性增强康斯特保护液大鼠离体心脏保存效果的实验研究
目的 观察不同浓度乌拉坦增强康斯特保护液(HTK)液对大鼠离体心脏保存效果,筛选佳的乌拉坦浓度.方法 36只SD大鼠心脏随机分为6组,分别用含有不同浓度乌拉坦的HTK液(mmol/L:0、10、20、40、80和160)灌注停搏并于4℃静止保存8 h.采用langendorff离体心脏灌注系统和多导生理仪测定停搏前及保存后再灌注60 min的心功能,指标包括左室发展压、心率、左心室内压、左室舒张末压、收缩和舒张变化率,比较心功能各指标恢复率,同时检测保存液中肌钙蛋白I(cTnI)含量.结果 20 mmol/L乌拉坦增强HTK液保存大鼠离体心脏的心功能恢复率较其它浓度组显著升高,80 mmol/L组左室舒张末压显著高于其他组,其它各组之间没有显著性差异;加入乌拉坦各组cTnI释放量显著低于对照组,各浓度组之间没有显著性差异.结论 20 mmol/L乌拉坦增强HTK液对大鼠离体心脏具有佳的保存效果.
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乌拉坦对大鼠胰岛素水平的影响
目的观察麻醉剂量的乌拉坦对空腹大鼠、葡萄糖负荷大鼠和肾上腺素诱发高血糖大鼠血浆胰岛素水平的影响.方法采用放射免疫测定法测定血浆胰岛素活性.结果麻醉剂量的乌拉坦(1.5 g*kg-1,sc, ip各半)给药后20 min显著升高空腹大鼠及葡萄糖负荷大鼠血浆胰岛素水平,给药后50 min血浆胰岛素水平分别从(11±4)及(11±4)mU*L-1升至(25±11)及(47±6)mU*L-1;相同剂量的乌拉坦给药后140 min使肾上腺素诱发的高血糖大鼠血浆胰岛素水平从(10±3)升至(51±18)mU*L-1.与血浆胰岛素水平的变化相比,乌拉坦给药后50 min显著升高空腹大鼠和葡萄糖负荷大鼠的血糖水平,但对肾上腺素诱发的高血糖大鼠的血糖水平无明显影响.结论乌拉坦显著升高空腹大鼠、葡萄糖负荷大鼠及肾上腺素诱发的高血糖大鼠血浆胰岛素水平.乌拉坦促进胰岛素分泌的机制包括高血糖依赖性促分泌和非血糖依赖性促分泌两种.
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己烯雌酚单独或与乌拉坦共同暴露对新生和5周龄小鼠的致肿瘤作用
目的 研究不同生长阶段ICR小鼠对己烯雌酚(DES)暴露的敏感性及DES暴露频率与肿瘤发生的关系,探索乌垃坦(Ure)对DES的肿瘤促进作用.方法 新生及5周龄小鼠分对照、溶剂、DES、Ure及Ure+DES联合应用组.新生鼠在d 14,5周龄鼠在出生第5周末,均以500 mg·kg-1 Ure ip;新生鼠分别在d 1,8和15 ip DES共3次;5周龄鼠从出生第6周起ip DES,每周1次,连续18次.至26周时剖检,观察肿瘤发生情况.结果 新生鼠和5周龄鼠均有明显的肺肿瘤发生.新生鼠DES(2.0,4.0和8.0 mg·L-1)给药组,肺肿瘤发生率分别为16.7%,22.4%和43.1%;Ure+DES(2.0,4.0和8.0 mg·L-1)为70.4%,90.9%和70.8%.5周龄鼠DES 5,15及50 mg·kg-1时,肺肿瘤发生率分别为52.5%,32.1%和23.0%;Ure+DES(5,15和50 mg·L-1)为54.1%,58.5%和62.0%.结论 外源DES对同一品系小鼠不同生长阶段的致肿瘤作用不同,新生鼠比成年鼠对DES和Ure 联合作用有更高的肿瘤易感性,Ure对DES有一定的肿瘤促进作用.
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乌拉坦致C57BL/6J小鼠肺腺瘤动物模型方法研究
目的 采用3种不同的造模方法,比较并优化乌拉坦致C57BL/6J小鼠肺腺瘤动物模型建立的方法.方法 取雌性C57BL/6J小鼠,分成4组,阴性对照组和模型Ⅰ组,模型Ⅱ组,模型Ⅲ组.模型Ⅰ组腹腔注射800 mg·kg-1乌拉坦,2次·周-1,连续5周;模型Ⅱ组腹腔注射1 000mg·kg-1乌拉坦,2次·周-1,连续5周;模型Ⅲ组腹腔注射1 000 mg · kg-1乌拉坦,5d·次-1,连续8次.阴性对照组给予等体积氯化钠注射液,给药方式与模型Ⅱ组相同.每周称量动物体重.所有组分别于第28周取主要脏器心、肝、脾、肺、肾、脑、胸腺,计算脏器指数,同时另取肺组织观察,计腺瘤数,量取肺腺瘤直径,并对肺、胸腺进行组织病理学检查.收集阴性对照组和模型组小鼠支气管肺泡灌洗液,对细胞进行分类计数分析.结果 与阴性对照组相比,3种造模方法均100％诱导出肺腺瘤,模型Ⅰ组和模型Ⅲ组肿瘤数目均为6左右,模型Ⅱ组肿瘤数目大约为2.3组造模小鼠肺指数均增大,脑、脾、胸腺指数均减小,支气管肺泡灌洗液分析表明模型组淋巴细胞和多型核白细胞多于阴性对照组.结论 3种造模方法均100％诱导出肺腺瘤,综合检测各指标,模型Ⅰ组和Ⅲ组相对于模型Ⅱ组诱导肺肿瘤的数目相对较多,模型较稳定均一.
关键词： 乌拉坦 C57BL/6J小鼠 肺腺瘤 动物模型 -
乌拉坦和戊巴比妥钠对大鼠血液流变学的影响
乌拉坦和戊巴比妥钠都是常用的实验动物麻醉药.我们在实验中发现,用乌拉坦和戊巴比妥钠麻醉的大鼠的体内血栓形成时间有很大差异,考虑其可能与血液流变学指标变化相关.本文研究对比了两者对大鼠血液流变学的影响.
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三种麻醉药物对小鼠麻醉效果的比较
目的 比较三种常用麻醉药阿佛丁、水合氯醛、乌拉坦的麻醉效果,探索适合于C57BL/6J品系小鼠的麻醉方法.方法三种麻醉药物分别以剂量梯度对C57BL/6J小鼠进行腹腔注射,比较不同剂量下的麻醉起效时间、麻醉深度、麻醉维持时间及恢复时间.结果 阿佛丁(1.2％)以0.60 ～0.65mL/20g剂量效果好,水合氯醛(4％)以0.20mL/20g剂量效果较好,乌拉坦不适用于C57BL/6J小鼠的麻醉实验.结论 腹腔注射阿佛丁(0.60mL/20g)和水合氯醛(0.20mL/20g)是适合于C57BL/6J品系小鼠全身麻醉的起效时间短,维持时间和麻醉深度适度,死亡率为0,麻醉效果较佳的麻醉方法.
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动物实验常用麻醉剂的比较与选择
动物实验中经常需要进行麻醉,麻醉剂的选择和麻醉方式都对实验结果有很大的影响.常用的有戊巴比妥钠、水合氯醛、乌拉坦(氨基甲酸乙酯)、氯胺酮、α-氯醛糖、苯戊巴比妥等非挥发性麻醉剂,另外还有吸人性麻醉剂乙醚.
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三种常用麻醉剂对长爪沙鼠麻醉效果观察
目的 分析比较3种不同麻醉剂对长爪沙鼠的麻醉效果.方法 成年长爪沙鼠分为3组,分别腹腔注射水合氯醛、乌拉坦和戊巴比妥生理盐水溶液,观察麻醉诱导时间、麻醉期、苏醒时间及心率和呼吸变化,并与大、小鼠进行比较.结果 长爪沙鼠在注射水合氯醛后麻醉保持时间长,而乌拉坦短.水合氯醛对呼吸和心跳的抑制能力较弱于乌拉坦和戊巴比妥.除了乌拉坦,其余两种药物对长爪沙鼠的麻醉时间均较大,小鼠更长一些.结论 3种麻醉药对长爪沙鼠的麻醉效果明显不同,对其呼吸和心跳频率的影响也有差别,可以根据不同的实验要求选用这三种麻醉剂.相对于大、小鼠来说,长爪沙鼠对3种麻醉剂都更敏感.
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动物麻醉剂乌拉坦的生物活性
在医学实验中,乌拉坦作为常用的麻醉剂,与其他麻醉剂相比,具有价廉、易配制、麻醉效果稳定、维持时间长等优点,而且对实验家兔的呼吸无明显抑制.除了麻醉效应外,乌拉坦还具有复杂的生物活性,能对抗内毒素引起的血压下降等起增强心脏保存效果.此外,乌拉坦能升高血糖,导致溶血和抑制胃排空,而且它的致癌作用越来越受到人们的重视.在此综述相关系统乌拉坦的生物活性,为深入认识乌拉坦的作用和今后在动物实验中较好地应用提供参考.
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戊巴比妥钠和乌拉坦对超声检测兔肾血流动力学变化的影响探讨
目的 比较戊巴比妥钠和乌拉坦两麻醉剂在超声监测兔肾血流动力学变化的影响.方法 选用日本大耳白兔24只,随机分组,戊巴比妥钠和乌拉坦麻醉两组,每组12只.采用频谱多普勒检测兔肾各级肾动脉血流参数.结果 乌拉坦组各级肾动脉收缩期峰值流速(Vmax),舒张期低流速(Vmin)均明显高于戊巴比妥钠组(P<0.05),动脉搏动指数(PI)和阻力指数(RI)无明显变化(P>0.05).结论 为保证超声监测兔肾血流动力学实验数据的准确性,戊巴比妥钠麻醉较乌拉坦麻醉更适合.
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两种大鼠膀胱测压方法的比较
目的 比较大鼠在乌拉坦麻醉下经尿道置管膀胱测压与清醒状态经耻骨上膀胱造瘘置管测压的尿动力学指标差异及两种方法的优缺点.方法 15只成年雌性SD大鼠在不同剂量乌拉坦麻醉后经尿道置管测压,15d后行耻骨上膀胱造瘘置管,术后第3~8天及第14天分别行清醒膀胱灌注测压.比较膀胱容量,排尿量,残余尿量,大排尿压及排尿效率的差异.结果 乌拉坦麻醉尿道置管测压时,按0.8g/kg体重腹腔注射后麻醉程度浅,无法插管.而按1.2g/kg体重腹腔注射后,对排尿反射影响较大.按1.0g/kg体重腹腔注射较为合适.而耻骨上膀胱造瘘测压时,术后第8天以后膀胱容量较为稳定.两者相比,清醒状态膀胱造瘘置管测压时膀胱容量较乌拉坦麻醉下尿道置管测压明显增大,分别为2.264±0.44mL及1.45±0.41mL (P<0.05);大排尿压明显降低,分别为26.15±6.71cmH<,2>O及44.32±4.93cmH<,2>O (P<0.05);排尿效率明显增大,分别为(96.73±3.81)%及(80.44±4.12)% (P<0.05).结论两种大鼠膀胱测压方法测得指标具有明显差异.
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N-乙酰半胱氨酸对乌拉坦诱发小鼠骨髓细胞SCE的影响
De Flora等[1]和刘淑英等[2]均证实N-乙酰半胱氨酸(NAC)具有抗诱变性,De Flora等[3]和Kada等[4]报道了NAC对诱变剂导致的DNA损伤的修复作用.我们以L-半胱氨酸为参比,观察了NAC对乌拉坦诱发的小鼠骨髓细胞姐妹染色单体交换率(SCE)的影响.
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N-乙酰半胱氨酸对乌拉坦诱发肺瘤抑制作用的研究
N-乙酰半胱氨酸(NAC)作为一种巯基化合物因其具有明显的抗氧激活性而成为化学预防研究的对象.本实验室在Ames试验中证实了NAC的抗诱变活性[1],美国国立癌症研究所化学预防部已将NAC进入I期临床试验[2].近年来肺癌趋于高发,为了探讨NAC对肺肿瘤的化学预防作用,我们选择了乌拉坦作为诱发小鼠肺瘤模型的致瘤剂,观察NAC的化学预防作用.
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新西兰兔麻醉实验中应用乌拉坦加丙泊酚的效果观察
[目的]观察乌拉坦加丙泊酚在新西兰兔有创实验中的麻醉效果。[方法]将120只新西兰兔随机分为实验组和对照组，经耳缘静脉缓慢注射20%乌拉坦溶液(3 mL/kg)，麻醉后固定四肢，行气管插管、留置胃管，实验组给予追加丙泊酚(0.5 mL/kg)静脉缓慢注射，对照组只在实施插管时追加乌拉坦溶液(1 mL/kg)。观察两组插管期间心率、呼吸、咳嗽反射及挣扎运动情况。[结果]在插管操作期间，实验组心率、呼吸较对照组降低，其咳嗽反射不明显、挣扎运动轻微，两组差异有统计学意义(P<0.05)。[结论]在气管插管等有创操作的新西兰兔的麻醉实验中，乌拉坦加丙泊酚的麻醉效果较单用乌拉坦更理想。
