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肾血管性高血压大鼠大脑皮质水通道蛋白4表达变化
背景中枢神经系统星形胶质细胞,脑血管内皮细胞均有水通道蛋白(AQP)分布,起着保持脑细胞水代谢平衡的作用.脑组织受损伤时,AQP4增加,增加水分子重吸收,缓和局部离子浓度变化,减轻脑细胞内外环境紊乱.目的 研究肾血管性高血压大鼠大脑皮质AQP4在高血压发生发展过程中的表达变化.方法 雄性SD大鼠60只,采用完全随机的方法将大鼠分成实验组(n=30)和对照组(n=30),实验组行"两肾一夹"法复制高血压模型.于术后7、30和90 d处死大鼠,取大脑额叶和海马区皮质行AQP4免疫组化染色,Western Blot 法检测其蛋白表达量的变化.结果 与对照组相比,手术后21 d血压[(132.4±9.1)mmHg]逐渐升高,30 d[(149.6±15.7)mmHg]和90 d[(196.4±11.2)mmHg]血压明显升高(均P<0.05).一直到手术后90 d,AQP4阳性细胞的数量和密度才开始明显增加[免疫组化染色吸光度值:(2.3±0.2)比(1.5±0.4),P<0.01;Western Blot:(1.0±0.4)比(0.9±0.1),P<0.05].结论 AQP4在神经元的表达变化在肾血管性高血压的发展初期无变化,一直到第90天才开始出现改变,机制尚待阐明.
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结直肠息肉水通道蛋白3、4的表达
目的:观察水通道蛋白(aquaporin,AQP)3、4蛋白在结直肠息肉中的表达,方法:选择结直肠息肉患者103例,肠镜下收集115个息肉组织样本和10例正常人结直肠黏膜组织样本,采用免疫组织化学方法检测AQP3、4的蛋白表达,结果:AQP3、4蛋白在人结直肠黏膜上皮细胞呈阳性表达,均表达在细胞的基底部与侧面.AQP3、4蛋白在炎性息肉中的表达均明显高于正常组,差异有显著性意义(P＜0.01,P＜0.05)；增生性息肉AQP3蛋白表达低于正常组,差异有显著性意义(P＜0.01)；腺瘤AQP4蛋白表达低于正常组,差异有显著性意义(P＜0.01).AQP3与AQP4在结直肠息肉及正常结直肠黏膜中的表达呈正相关(r=0.61,P=0.000).结论:AQP3、4蛋白在结直肠息肉中存在异常表达,二者之间呈正相关.
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肝硬化肝性脑病大鼠脑水通道蛋白-4的表达与脑水肿的关系
目的:探讨肝硬化肝性脑病脑水肿的发生机制,为治疗脑水肿新方法的发现提供理论依据.方法:实验大鼠随机分为正常组(n=10)、正常氨负荷组(n=10)、肝硬化组(n=20)和肝硬化氨负荷组(n=20).后2组给予400 g/L CCl4橄榄油,按0.2 mL/kg腹腔注射.2次/wk,共12wk.前两组给与橄榄油.注射剂量、部位、频次、时间同后两组.正常氨负荷组、肝硬化氨负荷组分别在后1次给药2d后,给与乙酸胺盲肠注射.4组大鼠通过尾静脉注射伊文恩蓝(EB)应用干式生化法测量动脉血氨,比色法测量EB含量,干-湿重法测量脑含水量,免疫组化法染色并通过图像分析系统分析脑组织中AQP4的表达.结果:肝硬化组动脉血氨与正常组、正常氨负荷组比较有差异性(97.20±29.66 μmol/Lvs 42.62±10.11,59.33±15.06 μmol/L,均P＜0.05),肝硬化氨负荷组的动脉血氨(420.18±75.91 μmol/L)与其他各组比较有明显的差异性(P＜0.01).肝硬化组EB和脑含水量与正常组、正常氨负荷组比较没有差异性.而肝硬化氨负荷组与其他各组比较有差异性(1.96±0.55 μg/g vs 1.41±0.46,1.19±0.38,1.05±0.18 μg/g;75.14±5.68 vs 65.58±4.14,62.14±2.29,66.27±4.57,均P＜0.05).肝硬化大鼠AQP4表达部位与正常大鼠一致,但肝硬化大鼠给与氨负荷后,无论是平均吸光度还是显色阳性面积均较正常组增高(P＜0.05).结论:AQP4可能在肝硬化肝性脑病大鼠脑水肿形成中起一定的作用.
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胃泌素对结肠癌细胞株HT-29水通道蛋白4表达的影响
目的: 观察胃泌素对人结肠癌细胞株HT-29水通道蛋白4表达的影响,探讨胃泌素促进结肠癌侵润转移的另一可能机制.方法: 体外培养结肠癌细胞株,采用不同浓度的胃泌素(10-6、10-7、10-8 mol/L)干预HT-29细胞12 h,同时用10 mmol/L的胃泌素受体拮抗剂丙谷胺处理细胞1 h,再给予10-7 mol/L的胃泌素干预相同时间.采用免疫细胞化学和流式细胞技术的方法检测水通道蛋白4表达的变化.结果: 各浓度胃泌素干预后,细胞水通道蛋白4的表达与空白组和丙谷胺处理组相比均明显增加(16.08%±1.93%,17.00%±2.72%,16.48%±2.22% vs 9.28%±2.74%,8.52%±2.72%,均P＜0.01);丙谷胺处理组的表达与空白组无差别,胃泌素各浓度组间亦无差别.结论: 胃泌素能够增加结肠癌细胞水通道蛋白4的表达,丙谷胺能够阻断胃泌素的作用.
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以极后区综合征为首发症状的视神经脊髓炎谱系疾病14例临床分析
目的 研究以极后区综合征为首发症状的视神经脊髓炎谱系疾病(NMOSD)的临床、影像及实验室检查特点,以提高对该疾病的认识.方法 收集以极后区综合征为首发症状的14例NMOSD患者病例资料,分析其临床特征、头颅及脊髓增强MRI、重要实验室检查特点及诊治过程.结果 以极后区综合征为首发症状的NMOSD患者女性多见(10/14),发病年龄为(38.1±17.0)岁,11例患者血清水通道蛋白4 (AQP4)-IgG阳性,3例阴性,7例存在自身抗体(抗SSA抗体、抗SSB抗体、抗核抗体)阳性.头颅MRI显示病灶主要分布在延髓中央导水管等室管膜周围、极后区,常呈线样延髓征;脊髓MRI11例(11/14)呈片状或线样损害,均超过3个椎体节段,主要累及灰质,以脊髓中央管为中心呈H型分布.存在误诊情况11例,其中误诊为胃食管反流病7例,神经源性呕吐2例,脊髓结核和脑梗死各1例.结论 临床上对于不明原因的顽固性呃逆和/或恶心、呕吐的患者,症状持续大于48 h时应警惕NMOSD的可能,尤其是明确存在神经系统阳性体征时.应完善头颈胸MRI和血清AQP4-IgG检测,尽早明确诊断,提高NMOSD的诊断与鉴别诊断能力.
关键词： 视神经脊髓炎谱系疾病 水通道蛋白4 顽固性呃逆、恶心、呕吐 磁共振成像 -
视神经脊髓炎特异性抗体三种检测方法比较
目的 评价组织间接免疫荧光检测(IIF)、细胞免疫荧光(CBA)及ELISA 3种不同检测视神经脊髓炎(NMO)特异性抗水通道蛋白4(AQP4)抗体的方法。方法 NMO 29例、多发性硬化(MS)23例、健康志愿者50例，分别采用IIF、CBA及ELISA方法检测血清中的抗AQP4抗体，比较各种方法诊断NMO的敏感性和特异性以及阳性结果的一致性。结果 3种方法检测的抗AQP4抗体诊断NMO的敏感性CBA法(72.4％)＞IIF法(62.1％)＞ELISA法(51.7％)；特异性CBA法(100％)＞ ELISA法(98.6％) ＞IIF法(97.3％)。采用Kappa检验评估各种检测方法一致性，CBA、IIF、ELISA 法均具有较好的一致性，其中CBA法与ELISA法检测一致性好(P＜0.01)。结论 检测抗AQP4 抗体以CBA法敏感性和特异性佳，CBA与ELISA法阳性结果具有较好的一致性。
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缺血再灌注预处理对血浆MDA、SOD及脊髓AQP4 mRNA的表达影响
目的 探讨腹主动脉缺血预处理对再灌注不同时问血浆丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)及脊髓组织中水通道蛋白4(AQP4) mRNA表达的影响.方法 将54只体质量189 ～ 207 g雌雄不拘的SD大鼠随机分为假手术组(Sham组)、缺血再灌注组(I/R组)和缺血预处理组(IPC组)3组.采用肾下腹主动脉阻断法,建立脊髓缺血再灌注模型;Sham组6只,手术开始步骤同其他两组,但不作肾下腹主动脉阻断即缝合伤口;I/R组24只,直视下采用动脉夹夹闭腹主动脉段左肾动脉分支起始处下方5 mm处(即肾动脉后型),仅阻断腹主动脉60 min后开放灌注;而IPC组24只,先阻断腹主动脉5min,开放5 min,再阻断60 min后开放灌注.再灌注后12h、1、2、5、10天分别进行神经功能评分,同时观察大鼠血浆MDA、SOD指标的水平,以及预处理对脊髓AQP4 mRNA表达的影响.结果 54只大鼠术后全部存活,I/R组行为学评分降低(P＜0.01),IPC组的神经功能评分在再灌注5天内均高于I/R组(P＜0.01),随着再灌注时间的延长行为学评分逐渐增加.I/R组血浆SOD水平仅在再灌注1天时较Sham组显著下降,随时间延长SOD水平逐渐升高与Sham组无差异,血浆各时间点MDA水平比Sham组低(P ＜0.05);IPC组SOD、MDA水平与Sham组比较没有差异.I/R组再灌注2天时AQP4mRNA表达显著增高(P＜0.01),之后降低至与Sham组无差异;IPC组在再灌注1天时即出现AQP4 mRNA表达明显升高(P＜0.05),之后表达逐渐降低,第5天时与Sham组无差异.IPC AQP4mRNA峰值明显低于I/R组(P＜0.01).结论 大鼠腹主动脉缺血再灌注的预处理IPC可能通过减轻由缺血再灌注造成的全身氧化应激反应和下调AQP4mRNA的表达,进而保护脊髓组织.
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新生猪缺氧缺血脑水肿早期MRI及水通道蛋白4的变化
目的 探讨新生猪急性缺氧缺血脑水肿早期MRI的改变、相应脑组织水通道蛋白4(AQ,P4)的表达及二者的关系.方法 选择生后3 d的健康新生猪14只,随机分成实验组和对照组(假手术组),在缺氧缺血后0、1.5、3、4.5和6 h进行MRI扫描,获得明显脑水肿区域的表观扩散系数(ADC)、磁共振扩散加权成像(DWI),应用免疫组织化学方法 观察缺氧缺血后6 h脑组织AQP4的表达.结果 实验组在缺氧缺血后1.5 h时,脑DWI图像上开始出现高信号区,局部ADC值下降,主要分布于大脑皮层、基底神经节及脑室旁区,在3 h和6 h的DWI图像上,高信号区更加明显且范围扩大,ADC值明显下降,6 h后脑室旁的AQP4表达明显增多,相对比表达强度(吸光度值)为(15.0±4.0)%.明显高于对照组(5.1±2.9)%,差异有显著性(t=3.09,P＜0.01),并与该区域的ADC值呈显著负相关(r=0.876,P＜0.01),与rs-DWI(DWI高信号区面积与同层脑总面积比值)呈显著正相关(r=0.846,P＜0.01o结论 ADC、DWI能够早期诊断缺氧缺血性脑水肿,AQP4在急性缺氧缺血脑水肿的发生机制中起重要的作用,ADC、DWI可间接反映AQP4的表达水平.
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儿童视神经脊髓炎及其谱系疾病临床特征及随访
目的 分析儿童视神经脊髓炎(NMO)及视神经脊髓炎谱系疾病(NMOSD)的临床特征.方法 回顾性分析2010年12月至2014年5月北京儿童医院神经科收治的10例NMO及NMOSD患儿的临床资料及影像学表现和随访资料.其中女7例、男3例,发病年龄0.8 ～13.8岁,中位数8.9岁;病程1.0～18.5个月,中位数1.5个月.结果 10例患儿中NMO8例,NMOSD 2例为长节段扩展性脊髓炎;4例为单相性病程,6例有复发.首发症状出现视神经炎者共8例(均为NMO患者),2例NMOSD患儿首发无视神经炎表现.9例有脊髓炎临床表现,1例为无症状的脊髓MRI异常.头颅MRI 7例异常(其中NMO6例,NMOSD 1例),其中中脑受累及双侧大脑半球多发片状异常信号各4例、延髓受累3例、丘脑和内囊后肢受累各2例、脑桥、小脑以及胼胝体受累各1例.5例有脑部症状,其中4例首发影像学改变类似于急性播散性脑脊髓炎,并伴有脑病表现.1例影像学改变类似多发性硬化.9例血清水通道蛋白4抗体阳性,1例合并系统性红斑狼疮.10例脑脊液寡克隆区带均为阴性.所有患儿急性期均给予大剂量甲泼尼龙联合静脉用免疫球蛋白冲击治疗,8例症状改善,2例无效者均行2次血浆置换治疗.7例患儿进行随访,中位随访时间19(13 ～30)个月.随访时扩展型残疾状态量表(EDSS)评分1～7分,中位数为3分.结论 儿童NMO及NMOSD临床表现多样,除视神经炎及脊髓炎表现外,还可有脑部症状,可类似于急性播散性脑脊髓炎或多发性硬化,水通道蛋白4抗体的测定对鉴别诊断非常重要.
关键词： 视神经脊髓炎 水通道蛋白4 视神经脊髓炎谱系疾病 儿童 -
儿童视神经脊髓炎谱系疾病临床分析
目的 总结儿童视神经脊髓炎谱系疾病(NMOSD)临床特点及治疗效果.方法 对2013年1月至2018年6月于北京大学第一医院儿科住院的NMOSD患儿的临床资料和随访情况进行回顾性总结.分析其基本信息、每次发作的症状、影像学新病灶累及的部位和性质、脑脊液特点、血清学标志物、治疗及预后情况.共33例NMOSD患儿,其中男13例、女20例;中位起病年龄6.83(4.25,8.75)岁.比较水通道蛋白4抗体(AQP4-IgG)和抗髓鞘少突胶质细胞糖蛋白抗体(MOG-IgG)阳性的NMOSD差异,组间比较使用Mann-WhitneyU检验及Fisher精确检验;加用预防复发治疗前后年复发率的差异使用Wilcoxon检验比较.结果 33例NMOSD患儿无论首次还是至随访末127次发作中,视神经炎[首次占39％(13/33),所有发作中占49％(62/127)]和脊髓炎[首次占36％(12/33),所有发作中占26％(33/127)]均为前两位症状.42％(37/89)的患儿发作急性期头颅磁共振成像(MRI)存在幕上白质新病灶,其中43％(16/37)为急性播散性脑脊髓炎样或遗传性脑白质病样病灶.30％(10/33)的患儿血清AQP4-IgG阳性,55％(11/20)的患儿MOG-IgG阳性,无同时阳性病例.20例患儿使用利妥昔单抗预防复发,2例首次发作后加用,其余18例使用期间年复发率较加用前显著下降[0.28(0,1.13)比1.86(1.52,2.60)次/年,Z=-3.376,P=0.001].MOG-IgG阳性(11例)与AQP4-IgG阳性(10例)的NMOSD相比,不明原因的发热多见(8/40比0/33,P=0.007),延髓后区症状少见(0/40比4/33,P=0.038);脑脊液细胞数多[49.0(17.5,115.0)×106/L比5.5(3.0,15.8)×106/L,Z=-3.526,P=0.000].结论 儿童NMOSD中视神经炎和脊髓炎为前两位症状,幕上白质受累多见,MOG-IgG阳性比率高.利妥昔单抗能明显降低儿童NMOSD的年复发率,但不同抗体相关NMOSD的治疗差异有待进一步研究.
关键词： 视神经脊髓炎 水通道蛋白4 抗体 儿童 髓鞘少突胶质细胞糖蛋白 -
丁基苯酞对放射性脑损伤模型大鼠皮质AQP4表达影响的观察
目的:观察丁基苯酞对单次全脑照射后大鼠大脑皮质水通道蛋白4 (AQP4)表达的影响.方法:将雄性SD大鼠60只随机分为假照射组、单纯照射组和丁基苯酞组,采用10 Gy单次全脑照射模型,制模后丁基苯酞组大鼠分别按剂量0.3、1.0和3.0 mg/kg丁基苯酞腹腔注射；依文思蓝(EB)法评价血脑屏障通透性改变；免疫组织化学法检测皮质AQP4表达的变化.结果:单纯照射组大鼠脑组织EB含量为(1.62±0.18) μg/g,与假照射组的(0.58士0.11)μg/g比较,差异有统计学意义,P=0.006;照射后1周单纯照射组大鼠脑组织皮质AQP4表达(1.67±0.63)较对照组(4.00土0.32)降低,P=0.004.与单纯照射组比较,不同剂量丁基苯酞组大鼠脑组织EB含量均降低(0.3mg/kg组,P=0.002;1.0 mg/kg组,P=0.004; 3.0mg/kg组,P=0.003)；照射后1周不同剂量丁基苯酞组皮质AQP4表达有不同程度增加,呈现剂量依赖性(0.3mg/kg组,P=0.035;1.0 mg/kg组,P=0.042; 3.0 mg/kg组,P=0.006).结论:大鼠全脑照射后皮质AQP4表达呈时程性变化,丁基苯酞对AQP4有调节作用.
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大鼠全脑照射后早期大脑皮质水通道蛋白4表达变化的研究
目的 观察单次全脑照射大鼠大脑皮质水通道蛋白4(AQP4)表达的变化,探讨AQP4在早期放射性脑损伤中的作用.方法 将雄性SD大鼠100只随机分为2、10、30 Gy单次全脑照射后1 d、1周和1个月及对照10个组别,构建放射性脑损伤大鼠脑组织芯片,用免疫组化法检测皮质AQP4蛋白表达变化.结果 与对照组比较,2 Gy照射后各时间点皮质AQP4表达水平无明显变化;10、30 Gy照射后1 d皮质AQP4表达迅速降低,照后1周达低点(P＜0.01),1个月时表达水平又明显高于对照组(P＜0.05);随着受照剂量增加AQP4表达也明显降低,30 Gy组达低点(P＜0.01).结论 大鼠全脑照射后脑皮质AQP4表达呈时程性和剂量依赖性变化;早期放射性脑损伤中AQP4表达下降是一种保护性反应,具有减轻脑水肿效应.
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胡黄连苷Ⅱ在大鼠脑缺血损伤中治疗剂量和时间窗的优化
目的 探讨胡黄连苷Ⅱ治疗大鼠脑缺血损伤的佳治疗剂量和时间窗. 方法 应用双侧颈总动脉结扎法建立大鼠脑缺血模型,将48只大鼠模型,按二因素四水平[L16(4 5)]正交试验设计分组.治疗时间窗设定缺血1.0、1.5、2.0、2.5h,共4个水平,治疗剂量设定5、10、20、40 mg/kg共4个水平.按照设定剂量经腹腔注射胡黄连苷Ⅱ干预治疗,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清和脑组织水通道蛋白4(AQP-4)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)和环氧合酶2(COX-2)的水平,评价胡黄连苷Ⅱ治疗大鼠脑缺血损伤的疗效. 结果 ①根据血清和脑组织AQP-4水平分析结果,胡黄连苷Ⅱ治疗脑缺血损伤的佳治疗时间窗和剂量分别为脑缺血2.0h,腹腔注射20 mg/kg；脑缺血1.5h,腹腔注射20 mg/kg.②根据血清和脑组织MMP-9水平分析结果,佳治疗时间窗和剂量分别为脑缺血1.5h,腹腔注射20 mg/kg；脑缺血2.0h,腹腔注射20 mg/kg.③根据血清和脑组织COX-2水平分析结果,佳治疗时间窗和剂量分别为脑缺血1.5h,腹腔注射10 mg/kg；脑缺血1.5h,腹腔注射20 mg/kg. 结论 根据用药剂量小化和治疗时间窗大化的原则综合评价,根据AQP-4、MMP-9、COX-2测定结果,胡黄连苷Ⅱ治疗脑缺血损伤的佳治疗时间窗和剂量为脑缺血1.5～2.0h,腹腔注射剂量10～20 mg/kg.
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儿童视神经脊髓炎的临床特征及预后
目的 分析儿童视神经脊髓炎(p-NMO)的临床特征及预后.方法 回顾性分析2009-01-2012-10中国人民解放军总医院诊治的14例p-NMO的临床资料.结果 14例p-NMO首次发病年龄为5.0～13.6周岁,中位数为9.7岁,四分位数间距为4.3岁,男女比例为1∶6.4例p-NMO存在可能的诱发因素.以视神经炎(ON)为首发症状者6例,以ON及横贯性脊髓炎(TM)首发2例,以TM首发3例,以脑部症状首发2例,以ON合并脑部症状首发1例.视觉诱发电位(VEP)均异常；12例行水通道蛋白4抗体(AQP4-Ab)检测,6例阳性；均行血清风湿抗体检测,6例阳性.均为复发-缓解病程.通过电话随访(随访时间中位数为14.5个月),1例借助轮椅行走,1例双目失明,其余日常生活基本不受影响；EDSS评分中位数为2.0分,四分位数间距为1.3分.结论 p-NMO女性多见且首发症状可能以ON为主,尤以双侧ON突出.AQP4-Ab对p-NMO敏感度可能较成人低.p-NMO的预后可能较成人NMO好；后遗症可能以视力障碍为主,脊髓炎后遗症较轻.
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头孢曲松钠减轻水通道蛋白4抗体对星形胶质细胞的毒性作用
目的 探讨头孢曲松钠在水通道蛋白4(AQP4)抗体诱导的星形胶质细胞损伤中的作用以及机制.方法 常规体外培养新生SD大鼠大脑皮质细胞,将培养的细胞分为4组,分别加入健康人血清(对照组)、AQP4抗体阳性患者血清、头孢曲松钠+AQP4抗体阳性血清以及单纯头孢曲松钠.细胞培养24 h后采用免疫组织化荧光染色观察不同组星形胶质细胞数目的变化,采用比色法测定上清液谷氨酸浓度以及免疫印迹分析谷氨酸转运体-1(GLT-1)蛋白表达水平.结果 和对照组比较,AQP4抗体阳性血清组星形胶质细胞数目和谷氨酸转运体-1(GLT-1)蛋白表达明显减少,上清液谷氨酸浓度明显增高(均P＜0.01),而单纯头孢曲松钠组仅显著增加GLT 1蛋白表达(P＜0.01),并不影响星形胶质细胞数目和谷氨酸水平(P＞0.05);和AQP4抗体阳性组比较,头孢曲松钠+ AQP4抗体阳性血清组星形胶质细胞数目和GLT-1蛋白表达增加,上清液谷氨酸浓度明显下降(P＜0.01).结论 头孢曲松钠可能通过上调星形胶质细胞GLT-1表达、减少细胞外液谷氨酸水平发挥减轻AQP4抗体对体外培养的大鼠脑皮质星形胶质细胞的毒性作用.
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干燥综合征合并视神经脊髓炎谱系疾病临床特征分析
目的 研究干燥综合征(SS)合并视神经脊髓炎谱系疾病(NMOSD)的临床特点,以提高临床对该病的认识.方法 回顾性分析2011-01-2017-12福建医科大学附属第二医院住院确诊的7例SS合并NMOSD患者的一般情况、临床表现、影像学及预后等资料.结果 7例SS合并NMOSD患者均为女性,发病中位年龄为50岁,6例患者缺少SS相关临床表现,7例患者均以NMOSD起病后发现SS,1例在起病初期被误诊为星形胶质细胞瘤,2例被误诊为多发性硬化(MS).随病程延长,其复发率越高,预后较差.结论 SS合并NMOSD易被误诊、漏诊,且病程长时预后更差;应注意筛查抗核抗体、抗水通道蛋白4抗体,及时诊治,并动态随访,减少复发.
关键词： 干燥综合征 视神经脊髓炎谱系疾病 视神经脊髓炎 脱髓鞘疾病 水通道蛋白4 -
甲泼尼龙减轻水通道蛋白4抗体对星形胶质细胞和神经元的毒性
目的 探讨不同滴度水通道蛋白4(aquaporin-4,AQP4)抗体阳性血清对体外培养大鼠皮质神经细胞的毒性作用以及甲泼尼龙预处理的保护作用.方法 使用原代培养的新生Wistar大鼠大脑皮质神经细胞,分别加入正常对照血清,AQP4抗体滴度1∶10、1∶320和1∶1000血清以及单独甲泼尼龙、甲波尼龙+AQP4抗体滴度1∶1000血清.培养6h后使用免疫荧光染色法观察各组星形胶质细胞、神经元的形态学改变以及数量变化.结果 加入AQP4抗体阳性血清引起星形胶质细胞胞体肿胀和突起减少,神经元突起也明显减少,而甲泼尼龙预处理可减少这些形态学改变;对照组、1∶10、1∶320和1∶1000滴度血清组星形胶质细胞数目分别为(52.22±3.75)％、(45.83±4.82)％、(35.77±5.91)％和(24.68±3.40)％;神经元数目分别为(44.93±2.39)％、(39.00±4.33)％、(32.21±2.67)％和(23.35±2.65)％,各组间星形胶质细胞数量和神经元数量比较均有统计学差异(F值分别为48.09和71.41,均P＜0.01),组间两两比较均有统计学差异(均P＜0.01).而甲泼尼龙+1∶1000血清组的星形胶质细胞和神经元数目分别为(44.52±3.71)％和(42.11±5.94)％,较1∶1000血清组明显增多(均P＜0.01).结论 AQP4抗体阳性血清对体外培养的大鼠星形胶质细胞和神经元有滴度依赖性细胞毒性作用,甲泼尼龙预处理能减轻其毒性.
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视神经脊髓炎谱系疾病二例
视神经脊髓炎谱系疾病(neuromyelitis optica spectrum disorders,NMOSDs)特指一组潜在发病机制与视神经脊髓炎(neuromyelitis optica,NMO)相近,但临床受累局限不完全符合NMO诊断的相关疾病.NMOSDs临床表现多样,易造成误诊.1 病例报告 病例1:患者女,24岁,以"反复纳差伴呕吐3个月,视物模糊、步态不稳半个月"入院.患者3个月前渐出现食欲下降伴顽固性呕吐.曾在消化内科拟诊为反流性食管病,行对症治疗但无明显改善;半个月前出现视物模糊,步态不稳.无幻觉及力弱,无吞咽困难及呛咳,无尿便障碍.
关键词： 视神经脊髓炎 视神经脊髓炎谱系疾病 水通道蛋白4 临床特点 -
血清储存条件和冻融过程对AQP4抗体测定结果的影响
视神经脊髓炎(NMO)是一种致残性自身免疫疾病.血清水通道蛋白4(AQP4)抗体有助于对NMO与多发性硬化(MS)进行鉴别,这对临床诊治这两种疾病具有重要意义,因为两者的预后以及疗法不同.血清中的AQP4抗体与NMO发病直接有关[1],且其血清水平与疾病的严重程度相关[2].临床实践中,只有一些检测中心进行该抗体的检查,其他相关单位需要在常温或冰冻的情况下运输标本到检测中心;临床研究中,标本可能多次被检测,可能经过冻融过程.Jarius等[3]于2011年9月在Clin Chem Lab Med杂志发表论文首次报道储存条件和冻融过程对血清AQP4抗体水平的影响.
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ELISA与FACS定量方法检测血清AQP4抗体诊断NMO的Meta分析
＿＿目的＿系统评价酶联免疫吸附试验（ELISA ）、流式细胞术（FACS ）检测血清水通道蛋白4抗体（AQP4‐IgG）对诊断视神经脊髓炎（NMO）的准确性。方法＿检索国内外公开发表的相关文献。根据题目、摘要、全文逐步筛选，采用质量评价工具（QUADAS）分析文献质量。采用Meta‐Disc1.4与STATA 12.0软件进行Meta分析。根据Meta分析结果综合评价ELISA和FACS方法诊断NMO的准确性。结果＿经过严格的纳入及排除标准，终纳入17篇文献。ELISA和FACS方法合并敏感度分别为0.63（95％ CI：0.58～0.68）和0.55（95％ CI：0.48～0.61），合并特异度分别为0.98（95％ CI：0.97～0.98）和0.99（95％ CI：0.98～0.99）。拟合受试者工作特征曲线（SROC），得到 SROC曲线下面积（AUC）分别为0.9521和0.9542。结论＿通过 ELISA 和FACS方法检测AQP‐4‐IgG对于诊断NMO特异度高，两者都具有较高的诊断效能和准确率。但受纳入研究质量和数量限制，两种方法诊断效能的一致性尚需开展更多高质量研究予以验证。
