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新疆阿魏乙酸乙酯部位对人结肠癌Caco-2细胞周期和凋亡的影响术
目的:探讨新疆阿魏乙酸乙酯部位对人结肠癌Caco-2细胞周期和凋亡的影响,并对抑癌基因PTEN、p53进行考察.方法:将新疆阿魏乙酸乙酯部位用完全培养液配成高、中、低浓度的溶液(15、30、60 μg/mL),分别作用于Caco-2细胞,采用流式细胞仪对各组细胞所处周期和凋亡情况进行检测,采用RT-PCR、Western Blot方法检测调控细胞周期、凋亡的PTEN、p53基因和蛋白的表达水平.结果:新疆阿魏乙酸乙酯各剂量组使Caco-2细胞大量阻滞在G0/G1期(P＜0.05),并且各给药组Caco-2细胞的凋亡率均明显高于空白组(P＜0.01);RT-PCR、Western B10t检测结果显示各给药组Caco-2细胞的PTEN、p53的基因表达水平均显著增高(P＜0.01),PTEN、p53的蛋白相对表达水平显著增高(P＜0.05或P＜0.01),与顺铂对Caco-2细胞的作用效果相似.结论:新疆阿魏乙酸乙酯部位可以使人结肠癌Caco-2细胞分裂阻滞在G0/G1期,促进Caco-2细胞凋亡,并且显著提高抑癌基因PTEN、p53的表达.
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新疆阿魏根际微生物群落动态变化研究
目的:了解新疆阿魏生长期根际微生物种群的动态变化.方法:取不同生长年限新疆阿魏的根际土壤,测定其所含的细菌、真菌、放线菌数量.结果:根际土壤微生物数量随土层深度增加而减少;细菌、真菌、放线菌数量随着新疆阿魏生长年限的增加呈现逐年增加趋势;在花期,细菌、真菌数量下降,放线菌数量则继续增加;新疆阿魏根际土壤微生物数量与对照组具有显著性差异,根际效应显著.结论:新疆阿魏根际微生物数量与其生长年限、生长阶段有关联.
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新疆阿魏愈伤组织诱导研究
目的:探索不同培养条件、激素组合对新疆阿魏愈伤组织诱导的影响.方法:以不同苗龄的新疆阿魏幼嫩子叶、下胚轴、幼根为外植体,在不同激素组合的脱分化培养基上培养,考察不同外植体、激素组合对诱导新疆阿魏愈伤组织的影响.结果:无真叶长出的阿魏幼苗较有利于出愈伤组织,诱导下胚轴愈伤组织的佳培养基为MS+2,4-D(1.0 mg/L)+KT(1.5 mg/L),诱导幼根愈伤组织的佳培养基为MS+NAA(0.5 mg/L)+6-BA(0.5 mg/L).佳继代培养基为MS+NAA(1.5 mg/L)+6.BA(2.5 mg/L).结论:NAA、2,4-D和6-BA均有一定的诱导效应,在愈伤组织继代增殖培养过程中6-BA的效果优于KT,添加GA_3有利于继代过程中胚性愈伤组织的产生.
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新疆阿魏和阜康阿魏生药学比较研究
目的:用生药学鉴别方法对新疆阿魏和阜康阿魏进行比较研究.方法:利用显微鉴定的方法对新疆阿魏和阜康阿魏的横切面组织形态结构、粉末鉴别特征进行系统的研究.结果:新疆阿魏、阜康阿魏在根横切面的表皮、树脂道、形成层,茎横切面的形状、表皮、皮层、维管束、树脂道特征,叶横切面的非腺毛和厚角组织特征等方面存在较大差异.粉末中新疆阿魏、阜康阿魏在淀粉粒、气孔、方晶、纤维和油囊方面有明显区别.结论:新疆阿魏和阜康阿魏具有明显的生药学区别,可以作为阿魏品种鉴别的方法.
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维药新疆阿魏的生药鉴定
目的:研究维药新疆阿魏的生药鉴定特征.方法:利用性状、显微和薄层鉴别法为该药进行初步鉴定研究,并确立其鉴别特征.结果:该品根、茎及叶的横切面中均存在不规则树脂道,尤见茎中树脂道多；粉末中观察到非腺毛、淀粉粒、螺纹和网纹导管、石细胞及方晶等；全株具有特殊的葱蒜样臭味.薄层色谱中,供试品与阿魏酸对照品相应的位置上,显相同颜色的斑点.结论:本研究可为新疆阿魏的鉴别、开发利用及质量标准提供依据.
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新疆阿魏乙酸乙酯部位提取物对CT-26.WT原位移植瘤模型小鼠的抑瘤作用及机制研究
目的:研究新疆阿魏乙酸乙酯部位对CT-26.WT原位移植瘤模型小鼠的抑瘤作用,并探讨其作用机制.方法:将小鼠随机分为假手术组[溶剂(聚山梨酯80和食用油)]、模型组(溶剂)、顺铂对照组(5 mg/kg)和新疆阿魏乙酸乙酯部位提取物低、中、高剂量组(0.375、0.75、1.5 g/kg,以新疆阿魏乙酸乙酯部位提取物计),每组12只.除假手术组外其余各组小鼠建立CT-26.WT原位移植瘤模型,手术1周后灌胃给予相应药物,每隔2 d给药1次,连续给药10 d后,观察各组小鼠的体质量、瘤质量、肿瘤病理切片、脾指数,计算抑瘤率.采用流式细胞磁珠微阵列法(CBA)检测小鼠血清中白细胞介素12p70(IL-12p70)、干扰素γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、IL-6、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)、IL-10的水平.结果:与假手术组比较,其余各组小鼠成功建立原位移植瘤模型,体质量均明显降低(P<0.05),模型组小鼠血清中TNF-α、MCP-1、IL-6水平明显增加(P<0.05),IFN-γ和IL-10水平明显降低(P<0.05).与模型组比较,顺铂对照组和新疆阿魏乙酸乙酯部位提取物低、中、高剂量组小鼠瘤质量明显降低(P<0.05),其抑瘤率分别为(62.96±12.54)％、(40.74±17.34)％、(45.93±16.74)％、(57.05±14.28)％,且肿瘤细胞排列松散,有丝分裂现象及肿瘤细胞的浸润减少,顺铂对照组和新疆阿魏乙酸乙酯部位提取物中、高剂量组小鼠的脾指数明显增加(P<0.05),所有给药组小鼠血清中IL-12p70、TNF-α、MCP-1、IL-10因子水平均明显增加(P<0.05),IL-6因子水平明显降低(P<0.05),仅新疆阿魏乙酸乙酯部位提取物高剂量组小鼠血清中IFN-γ因子水平明显增加(P<0.05).结论:新疆阿魏乙酸乙酯部位提取物对CT-26.WT原位移植瘤模型小鼠具有抑瘤作用,其机制可能与增加IL-12p70、TNF-α、IFN-γ、MCP-1、IL-10水平和降低IL-6水平有关.
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新疆阿魏乙酸乙酯部位提取物对结肠癌模型小鼠免疫功能的影响
目的:研究新疆阿魏乙酸乙酯部位提取物对结肠癌模型小鼠免疫功能的影响,为新疆阿魏属植物的进一步开发利用提供参考.方法:体外接种小鼠结肠癌CT-26.WT细胞复制小鼠结肠癌模型.将造模的50只小鼠随机分为模型组(生理盐水,灌胃)、顺铂组(5 mg/kg,腹腔注射)和新疆阿魏乙酸乙酯部位提取物低、中、高剂量组(按生药量计分别为1.0、2.0、3.0 g/kg,灌胃),每组10只;另选10只正常小鼠作为空白组(生理盐水,灌胃).顺铂组小鼠隔天给药1次,其余各组小鼠均每天给药1次,连续给药10 d.给药结束后,测定各组小鼠抑瘤率和脾指数;采用流式细胞术测定各组小鼠血液中T淋巴细胞亚群CD3+、CD4+、CD8+以及B淋巴细胞CD19+的数量,并计算CD4+/CD8+值;酶联免疫吸附法测定小鼠血清中免疫球蛋白M(IgM)、IgG的含量.结果:与空白组比较,模型组小鼠脾指数显著升高(P＜0.01),但血液中CD3+、CD4+、CD8+、CD19+细胞的数量以及血清中IgM、IgG含量差异无统计学意义(P＞0.05).与模型组比较,新疆阿魏乙酸乙酯部位提取物各剂量组小鼠的瘤质量均显著降低(P＜0.01),抑瘤率均在40%以上;新疆阿魏乙酸乙酯部位提取物中、高剂量组小鼠脾指数以及血液中CD3+细胞数量、CD4+细胞数量、CD4+/CD8+值和血清中IgM、IgG含量均显著升高(P＜0.05或P＜0.01);新疆阿魏乙酸乙酯部位提取物各剂量组小鼠血液中CD19+细胞数量显著减少(P＜0.05或P＜0.01),但血液中CD8+细胞数量差异均无统计学意义(P＞0.05).结论:新疆阿魏乙酸乙酯部位提取物对结肠癌模型小鼠具有一定的改善作用,并可显著提高小鼠自身的细胞免疫能力和体液免疫能力.
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新疆阿魏乙酸乙酯部位对小鼠S180实体瘤的抑制作用
目的：研究新疆阿魏药材乙酸乙酯部位对小鼠S180实体瘤的抑制作用。方法：将60只小鼠随机分为正常对照组，肿瘤模型组，阿魏乙酸乙酯部位低、中、高剂量组（1.0、2.0、3.0 g/kg，ig），顺铂对照组（阳性药物，5 mg/kg，iv），每组10只。除正常对照组外，其余各组小鼠接种经S180实体瘤侵染的小鼠的腹水以复制S180实体瘤动物模型。造模次日，各给药组小鼠给予相应药物，正常对照组、肿瘤模型组小鼠ig等体积生理盐水，每天1次，连续10 d。观察并测定各组小鼠体质量、脏器（脾、胸腺）指数、肿瘤体积变化趋势、实体瘤块体积和质量、肿瘤抑制率和病理变化；酶联免疫吸附法（ELISA）测定小鼠血清白细胞介素2（IL-2）、干扰素γ（IFN-γ）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）水平。结果：与正常对照组比较，肿瘤模型组小鼠脾指数、TNF-α水平显著升高，IL-2、IFN-γ水平显著降低（P＜0.05）；肿瘤组织异型细胞呈团块状分布，伴有一定数量的缺血性坏死。与肿瘤模型组比较，顺铂对照组小鼠体质量、脾指数、胸腺指数、实体瘤块体积和质量显著降低，IL-2、TNF-α水平显著升高；阿魏乙酸乙酯部位各剂量组小鼠脾指数、TNF-α水平显著升高，实体瘤块体积和质量显著降低（P＜0.05）；病理观察肿瘤组织受到不同程度抑制，且顺铂对照组抑制程度为显著，肿瘤细胞数量减少，伴有少量坏死和细胞浸润；顺铂对照组和阿魏乙酸乙酯部位低、中、高剂量组小鼠的肿瘤抑制率分别为（73.26±4.55）％、（40.34±3.45）％、（50.86±9.34）％、（58.20±3.70）％。结论：阿魏药材乙酸乙酯部位对小鼠S180实体瘤有抑制作用。
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新疆阿魏的毒性实验研究
目的 应用细胞毒性试验对1号和5号两个批次新疆阿魏的毒性进行比较.方法 用高效液相法测定两个批次新疆阿魏的阿魏酸含量.用SRB法比较两批次新疆阿魏对大鼠NRK肾细胞的毒性.结果 HPLC结果显示1号、5号新疆阿魏中阿魏酸的含量分别为(0.775±1.44)mg/g、(0.279±1.63) mg/g;1号、5号新疆阿魏的IC50分别为60 600 μg/L和39 900μg/L.结论 两种批次新疆阿魏阿魏酸含量有明显差异,通过细胞毒性试验,结果5号比1号的新疆阿魏毒性大,表明新疆阿魏的毒性可能与其化学成分有关.
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DPPH法研究新疆阿魏的抗氧化活性
目的:采用紫外-DPPH法测定新疆阿魏的总抗氧化活性,并结合薄层生物自显影法(Bio-TLC-DPPH)鉴别其抗氧化活性成分.方法:以紫外-可见分光光度法测定DPPH溶液及10批新疆阿魏供试品溶液与DPPH溶液反应后的吸光度,计算清除率及EC50;依据2010版《中国药典》及文献中阿魏的提取方法,探索合适展开系统,喷以DPPH溶液显色后检视新疆阿魏抗氧化活性成分.结果:新疆阿魏甲醇提取液对DPPH自由基的EC50为5mg/mL;乙酸乙酯提取液以正己烷-石油醚(19∶1)展开得到新疆阿魏特征抗氧化活性成分.结论:采用DPPH法可对新疆阿魏抗氧化活性物质进行鉴别.
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新疆阿魏药材 HPLC 指纹图谱研究
目的：建立新疆阿魏药材 HPLC 指纹图谱的鉴别方法。方法以 Waters XTerra RP18（250 mm×4．6 mm，5μm）色谱柱为分析柱，流动相为乙腈-0．01％磷酸水，采用梯度洗脱，流速为1．0 mL/min，323 nm 波长下检测，对10个不同批次药材的 HPLC 指纹图谱进行比对。结果新疆阿魏药材 HPLC 指纹图谱共有18个共有峰，且具有较高的相似度，平均值为0．980。结论该方法简便，重复性好，特征性强，可用于新疆阿魏药材的鉴别和质量控制。
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新疆阿魏及其炮制品对大鼠胃溃疡模型作用的实验研究
目的探讨新疆阿魏及其不同炮制品对大鼠胃溃疡的治疗效果，评价其炮制方法对疗效的影响。方法建立醋酸注射型胃溃疡大鼠模型，用新疆阿魏及其不同炮制品进行抗胃溃疡试验，将80只大鼠随机分为8组，分别为假手术组、模型组、阳性药物组、新疆阿魏原药材组、民间习用炮制品（面粉炒）组、清炒炮制品组、醋炙炮制品组、水煮炮制品组，测定胃液p H值、胃黏膜溃疡面积，并检测大鼠血清中胃泌素（GAS）和表皮生长因子（EGF）的表达。结果各给药组大鼠胃液p H值均明显高于模型组（P＜0．01）；各给药组大鼠的胃黏膜溃疡面积明显小于模型组（P ＜0．01），其中民间习用炮制品和水煮法炮制品的效果好；新疆阿魏及其炮制品对胃溃疡大鼠血清中 GAS的含量均无影响，与模型组比较无明显差异（P ＞0．05）；与模型组比较，醋炙炮制品组和水煮炮制品组 EGF水平表达明显提高（P ＜0．05）；但模型组与其余各给药组 EGF差异无统计学意义（P ＞0．05）。结论新疆阿魏及其炮制品对胃溃疡有一定的治疗效果，其中水煮法的治疗效果比较显著。
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新疆阿魏中多种微量元素的ICP-AES分析
目的:探讨新疆阿魏中多种微量元素的测定方法.方法:采用湿法硝酸-双氧水进行消解,用电感耦合等离子体原子发射光谱法(ICP-AES)同时测定试样中多种微量元素Al、Ba、Ca、Cd、Co、Cu、K、Mg、Mn、Pb、Zn、Cr、Fe、V的方法.结果:方法的检出限为0.0015～0.05μg·mL-1,加标回收率为91.1%～104.6%,结果令人满意.结论:发现新疆阿魏中含有比较丰富的K,微量元素在中药中可能起到一定的药理作用,用ICP-AES测定中药中微量元素以评价中药价值具有重要的意义.
关键词： 电感耦合等离子体原子发射光谱法 微量元素 新疆阿魏 硝酸-双氧水消解
