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高剂量丹参、川芎对Lewis肺癌小鼠肿瘤的影响及机制研究
目的 探究高剂量活血化瘀药丹参、川芎对Lewis肺癌小鼠肿瘤侵袭转移的影响及其可能作用的机制.方法 采用腋下接种Lewis肺癌细胞悬液的方法制备Lewis肺癌小鼠模型30只,随机分为模型组、顺铂组、高剂量丹参组、高剂量川芎组、丹参联合顺铂组和川芎联合顺铂组,每组5只.顺铂组、丹参联合顺铂组和川芎联合顺铂组均给予顺铂4 mg/kg腹腔注射,高剂量丹参组、丹参联合顺铂组以2.16 g/kg剂量丹参灌胃,高剂量川芎组、川芎联合顺铂组以3.6 g/kg剂量川芎灌胃,模型组给予等体积生理盐水腹腔注射和灌胃.灌胃1次/d,腹腔注射于造模后第1、3、5天进行.每2 d记录1次小鼠体重,并于治疗后第14天将小鼠断颈处死取材,称取肿瘤质量,计算抑瘤率;采用Western-Blot法检测肿瘤组织内Twist和血管内皮生长因子(VEGF)的表达.结果 各组小鼠体重,模型组、高剂量丹参组和高剂量川芎组>顺铂组、丹参联合顺铂组和川芎联合顺铂组(P<0.05),高剂量丹参组、高剂量川芎组和模型组比较差异无统计学意义.计算抑瘤率,发现中药对肿瘤生长并没有抑制作用,反而具有促进作用.肿瘤组织免疫印迹结果显示高剂量川芎组肿瘤组织Twist蛋白表达高于模型组(P<0.05),高剂量丹参组肿瘤组织VEGF-A蛋白表达高于模型组(P<0.05).结论 高剂量活血化瘀中药川芎、丹参对Lewis肺癌小鼠肿瘤侵袭转移具有促进作用,其机制可能与调控Twist和VEGF-A蛋白的表达有关.
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择时服用扶正祛邪抗癌方对小鼠化疗造血功能的影响
目的:观察择时服用扶正祛邪抗癌方对顺铂化疗后Lewis肺癌荷瘤小鼠造血功能的影响.方法:对适应明暗交替环境的C57BL/6小鼠进行Lewis肺癌造模,按随机数字表法分成6组,造模成功5d后开始按不同时辰给予扶正祛邪抗癌方和化疗药,给药2周后同时处死并采取血液等样本检测相关指标.结果:与化疗组比较,各时辰用药组白细胞和红细胞以及骨髓有核细胞计数出现一定回升(P＜0.05),时辰用药组间比较,亥时组白细胞计数以及骨髓有核细胞计数回升明显(P＜0.05),而各时辰组红细胞回升差异无统计学意义.结论:扶正祛邪抗癌方可改善Lewis肺癌小鼠化疗引起的骨髓抑制,择时服用该药对骨髓抑制的恢复亦不尽相同,亥时用药对改善化疗引起的骨髓抑制为明显.
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肺抑宁I号对Lewis肺癌小鼠 TNF-α表达的影响
目的 探讨肺抑宁I号对Lewis肺癌小鼠TNF-α表达的影响.方法 以肺抑宁I号治疗Lewis肺癌小鼠,观察其对小鼠TNF-α表达的影响.结果 肺抑宁I号能够上调细胞因子TNF-α蛋白的表达.结论 肺抑宁I号上调细胞因子TNF-α蛋白的表达可能是其抗肿瘤的作用机制之一.
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针刺联合紫杉醇对Lewis肺癌小鼠一般状态及抑瘤率影响的实验研究
目的 通过采用针刺联合抗癌新药紫杉醇对Lewis肺癌小鼠进行治疗,探讨针药结合对肿瘤的治疗效应,验证针药并举理论及协同增效作用.方法 复制小鼠Lewis肺癌模型,分别采用针刺、药物及针药结合法对其进行治疗,观察小鼠的生存状态、肿瘤体积的动态变化、瘤重及抑瘤率.结果 针刺、紫杉醇、针刺联合紫杉醇均能抑制肿瘤生长,具有良好的抑瘤作用,针刺联合紫杉醇抑瘤效果更加显著.结论 针刺联合紫杉醇治疗有更显著的抗肿瘤作用,并能改善实验动物的生存状态,针药结合对Lewis肺癌小鼠的治疗效果明显优于单一疗法.
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CpG联合X射线照射对Lewis肺癌小鼠IL-10和TNF-α的影响
肺癌是常见的恶性肿瘤,放射治疗是重要的治疗手段,但治疗效果多不令人满意,肺癌患者免疫力低下是原因之一,而放射治疗又可使机体的免疫功能下降.
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苏木乙酸乙酯提取物结合针刺对Lewis肺癌小鼠TGF-
目的:采用苏木乙酸乙酯提取物结合针刺对Lewis肺癌小鼠进行治疗,探讨针药结合对肿瘤的治疗作用及机制.方法:复制C57BL/6小鼠Lewis肺癌动物模型,采用免疫磁珠分选技术分离小鼠脾CD4+细胞,培养72h,ELISA方法检测细胞上清液TGF-β水平.结果:苏木组、苏木结合针刺组、黄芪组TGF-β的表达均低于模型组(P＜0.01),苏木结合针刺组TGF-β的表达明显低于苏木组和黄芪组(P＜0.01).结论:苏木乙酸乙酯提取物结合针刺具有联合抑制小鼠Lewis肺癌TGF-β表达的作用,可能是其抑制肿瘤生长转移的机制之一.
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调气消积汤对Lewis肺癌小鼠免疫功能影响的实验研究
[目的]探讨调气消积汤对Lewis肺癌小鼠免疫功能的影响.[方法]C57BL/6小鼠常规接种Lewis肺癌,随机分为:荷瘤对照组(MG)、调气消积汤组(TG)、顺铂组(DG)、综合组(ZG);健康的小鼠组成空白对照组(CG),每组lO只.观察各组对脾脏指数的影响,计数小鼠外周血T淋巴细胞转化率及脾T淋巴细胞的增殖情况,检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达.[结果]调气消积汤可使荷瘤小鼠的脾脏指数降低并趋向正常,与空白组比较无差异(P>0.05).从小鼠T淋巴细胞转化率及增殖活性来看.调气消积汤组比荷瘤对照组明显升高,差异显著(P
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补康灵对Lewis肺癌小鼠化疗疗效及免疫功能的影响
目的:探讨补康灵对Lewis肺癌小鼠化疗疗效及血清CD(+,4)/CD(+,8)和IL-2水平的影响.方法:测定各组Lewis肺癌小鼠的肿瘤、胸腺和脾质量,计算抑瘤率、胸腺系数和脾指数;用ELISA检测小鼠外周血IL-2的水平;用流式细胞仪测定血清CD(+,4)和CD(+,8)T淋巴细胞含量,计算CD(+,4)/CD(+,8)值.结果:补康灵联合化疗各组Lewis肺癌小鼠肿瘤质量均明显少于模型对照组(P<0.05),联合化疗组脾系数和胸腺系数均明显高于模型对照组(P<0.05),联合化疗组均明显提高Lewis肺癌小鼠血清IL-2水平和T淋巴细胞CD(+,4)/CD(+,8)比值(P<0.05),其中以高浓度补康灵联合组为显著.结论:补康灵可能通过提高kwis肺癌小鼠免疫功能而发挥化疗增效的作用.
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基于温里药抑制肺癌的药物筛选及对肿瘤相关巨噬细胞的影响
目的:根据《中药学》第7版,将温里药附子、肉桂、干姜、高良姜、丁香、小茴香、花椒、吴茱萸、胡椒、荜茇、荜澄茄进行筛选,选出温里药中对Lewis小鼠具有抑瘤作用的温里药,并通过数据库筛选出肿瘤的有效成分,为下一步温里药组方奠定基础.方法:构建Lewis肺癌小鼠皮下移植瘤模型,将附子、干姜、高良姜、丁香、小茴香、花椒、吴茱萸、胡椒、荜茇、荜澄茄灌胃21 d后,观察其抑瘤效果.结果:附子、吴茱萸、荜茇对肿瘤具有抑制作用,与对照组相比,附子、吴茱萸、荜茇对肿瘤具有抑制效果,可以抑制Lewis肺癌小鼠皮下移植瘤的生长,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:温里药中的附子、吴茱萸、荜茇对Lewis肺癌小鼠皮下移植瘤有抑制作用,荜茇可抑制肿瘤组织中CD206的表达.
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益气扶正方对Lewis肺癌小鼠抑瘤作用的实验研究
目的:观察益气扶正方对Lewis肺癌小鼠肿瘤生长的影响,并通过拆方和不同时间点预防性给药研究其抑瘤作用.方法:选用5周龄纯系C57BL/6雄性小鼠150只,将Lewis肺癌细胞悬液接种于小鼠右侧腋下建立皮下肺癌模型,接种后小鼠随机分组,治疗组给予相应中药汤剂灌胃,对照组给予同体积生理盐水,测量肿瘤体积大小并统计.结果:益气扶正方能抑制Lewis肺癌皮下移植瘤小鼠的肿瘤生长(P＜0.05),拆方后的加减四君子汤和黄芪、党参、白术、茯苓、陈皮均未观察到抑瘤作用.益气扶正方接种前2周、接种前1周、接种后给药均能发挥抑瘤作用(P＜0.05).结论:益气扶正方能明显抑制Lewis肺癌皮下移植瘤小鼠的肿瘤生长,预防性给药则起效更早,抗癌作用更显著.
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肺抑宁Ⅰ号对Lewis肺癌小鼠免疫功能影响的实验研究
目的:探讨肺抑宁Ⅰ号对Lewis肺癌小鼠的免疫作用机制.方法:以肺抑宁Ⅰ号治疗Lewis肺癌小鼠,观察其生存状态,测定脾指数、T淋巴细胞增殖活性.结果:肺抑宁Ⅰ号能改善Lewis肺癌小鼠一般状况,5min自主活动及站立次数增加;脾指数降低并趋向正常;T淋巴细胞增殖活性增强.结论:肺押宁Ⅰ号可提高Lewis肺癌小鼠的免疫功能.
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肺抑宁2号诱导Lewis肺癌小鼠细胞凋亡的实验研究
目的:探讨肺抑宁2号对Lewis肺癌小鼠细胞凋亡的影响.方法:建立Lewis肺癌小鼠模型,随机分为模型组、中药组、西药组,用肺抑宁2号治疗Lewis肺癌小鼠,计算抑瘤率,进行光镜和电镜下瘤细胞凋亡的形态学观察.结果:抑瘤率中药组与模型组比较明显提高(P＜0.05),光镜下可见中药组肿瘤团块小,细胞体积小,异型性不明显,病理性核分裂像少,电镜下可见凋亡小体.结论:肺抑宁2号能诱导Lewis肺癌小鼠肿瘤细胞凋亡,可能是该方抗肺癌机制之一.
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双黄升白颗粒双向调控细胞周期CyclinD-CDK4/6信号途径的进一步研究
目的:探讨双黄升白颗粒对化疗所致骨髓抑制荷瘤小鼠细胞周期CyclinD-CDK4/6信号途径的双向调控作用及其机制.方法:该研究采用Lewis肺癌荷瘤小鼠,30只小鼠随机分为空白组、模型组和治疗组.除空白组外,腹腔注射环磷酰胺制作骨髓抑制模型.治疗组用40g/( kg?d)双黄升白颗粒治疗6天后,流式细胞仪检测细胞周期情况,并计算增殖指数(proliferation index,PI),以实时荧光定量PCR法(reverse transcription quantitative real-time PCR,RT-qPCR)检测CyclinD-CDK4/6(cyclin D-cyclin dependent kinase 4/6,CyclinD-CDK4/6)上游激活信号CDC25A、上游抑制信号p16INK4a、p15INK4b,以及CyclinD-CDK4/6所激活的下游信号Rb、pRb、E2F的表达,并以western-blot法进行验证.结果:模型组骨髓组织的G0/G1期细胞比例均低于空白组(P＜0.05),PI和CDC25A、Rb、pRb、E2F的表达均高于空白组(P＜0.05).肿瘤组织G0/G1期细胞比例均低于空白组(P＜0.05),PI和CDC25A的表达均高于空白组(P＜0.05).治疗组骨髓G0/G1期细胞比例低于模型组及空白组(P＜0.05),PI及CDC25A、Rb、pRb、E2F的表达均高于模型组及空白组(P＜0.05).肿瘤组织G0/G1期细胞比例高于空白组及模型组(P＜0.05),PI及CDC25A的表达均低于模型组及空白组(P＜0.05).各组骨髓及肿瘤组织中p16INK4a、p15INK4b的表达经比较无统计学差异.各组肿瘤组织中Rb、pRb、E2F的表达经比较无统计学差异.结论:双黄升白颗粒对骨髓抑制Lewis肺癌荷瘤鼠的骨髓及肿瘤细胞周期具有双向调控作用,其机制可能与调控细胞周期CyclinD -CDK4/6上游激活信号CDC25A及其所激活的下游信号Rb、pRb、E2F的表达有关.
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清金得生片对Lewis肺癌小鼠血清IL-2、TNF的影响
目的 研究清金得生片对Lewis肺癌小鼠血清IL-2、TNF的调节作用.方法 建立Lewis肺癌模型,运用益气除痰法代表方清金得生片进行实验性治疗,采用放射免疫法(RIA)测定IL-2的活性、TNF的含量.结果 清金得生片各用药组荷瘤小鼠血清IL-2水平明显高于生理盐水组(P＜0.05);TNF水平清金得生片高、中剂量有明显的升高作用,与生理盐水组比较有显著差异(P＜0.05).结论 清金得生片有调节免疫细胞因子IL-2、TNF的作用,从而增强荷瘤小鼠的免疫力.
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双黄升白颗粒对化疗所致骨髓抑制荷瘤小鼠细胞增殖的调控
目的:探讨双黄升白颗粒对化疗所致骨髓抑制荷瘤小鼠骨髓及肿瘤细胞增殖的调控作用.方法:本研究采用Lewis肺癌荷瘤小鼠,30只小鼠随机分为空白组、模型组和治疗组.除空白组外,腹腔注射环磷酰胺制作骨髓抑制模型.治疗组用40g/(kg·d)双黄升白颗粒治疗6d后,常规检测血常规、有核细胞数、肿瘤大小、骨髓及肿瘤细胞周期,以RT-qPCR(reverse transcription quantitative real-time PCR,RT-qPCR)检测增殖相关因子C-myc、N -myc、L-myc,并以免疫组化法进行验证.结果:模型组骨髓组织的G0/G1期细胞比例均低于空白组(P＜0.05),PI和C-myc、N-myc、L-myc的表达均高于空白组(P＜0.05).肿瘤组织G0/G1期细胞比例均低于空白组(P＜0.05),PI和C-myc、N-myc、L-myc表达均高于空白组(P＜0.05).治疗组骨髓G0/G1期细胞比例低于模型组及空白组(P＜0.05),PI及C-myc、N-myc、L-myc的表达均高于模型组及空白组(P＜0.05).肿瘤组织G0/G1期细胞比例高于空白组及模型组(P＜0.05),PI及C-myc、N-myc、L-myc的表达均低于模型组及空白组(P＜0.05).结论:双黄升白颗粒对骨髓抑制Lewis肺癌荷瘤鼠的骨髓及肿瘤细胞增殖具有双向调控作用,其机制可能与调控增殖相关因子C-myc、N-myc、L-myc的表达有关.
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肺复康对Lewis肺癌小鼠肿瘤细胞fas、fasL及bax表达的影响
目的:观察肺复康对Lewis肺癌小鼠肿瘤细胞fas fasL及bax表达的影响.方法:复制Lewis肺癌小鼠模型,分别采用肺复康大、中、小剂量,紫杉醇以及肺复康加紫杉醇对其进行治疗,运用RT-PCR技术检测Lewis肺癌小鼠凋亡相关基因fas、fasL及bax的表达.结果:各用药组与模型组fas 、fasL的mRNA的表达差异无显著性(P＞0.05)；用药组bax mRNA的表达明显高于模型组(P＜0.05).结论:肺复康可能通过上调bax mRNA的表达来启动线粒体途径从而诱导肿瘤细胞的凋亡,这可能是肺复康治疗非小细胞肺癌的作用机制之一.
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六神丸对Lewis肺癌模型小鼠移植瘤bFGF、CD34表达的影响
目的:探讨六神丸通过降低碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、微血管密度(MVD)的CD34表达的机制来抑制肿瘤生长及转移.方法:采用动物实验以Lewis肺癌小鼠为模型,观察六神丸的抑瘤、抗肺转移等作用疗效,用免疫组化方法检测六神丸对移植瘤组织bFGF、CD34表达的影响.结果:六神丸对Lewis肺癌移植瘤均有明显抑制作用,且能明显抑制肺转移瘤的生长,对Lewis肺癌自发肺转移的转移率和转移程度方面均低于生理盐水对照组(P<0.05或P<0.01);并抑制肿瘤组织bFGF、CD34的表达,高剂量优于低剂量,有显著性差异(P<0.01或P<0.05);六神丸高剂量组抑瘤作用与顺铂组相比无统计学意义(P>0.05),六神丸低剂量+顺铂组明显增强抑瘤作用(P<0.05).结论:六神丸可能通过降低bFGF和MVD的CD30表达的机制来抑制Lewis肺癌自发肺转移的发生及原发肿瘤、肺转移瘤的生长.
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肺复康对Lewis肺癌模型小鼠肿瘤及细胞周期的影响
目的:观察肺复康对Lewis肺癌模型小鼠肿瘤及细胞周期的影响.方法:复制Lewis肺癌小鼠模型,将60只造模后的小鼠随机分成6组,每组10只,造模后次日开始给药,分别采用肺复康大中小剂量、紫杉醇以及肺复康联合紫杉醇对其进行治疗,观察小鼠的生存状态及肿瘤生长抑制率,通过流式细胞术分析Lewis肺癌移植瘤细胞周期.结果:肺复康大剂量组肿瘤生长抑制率为36%,高于肺复康小剂量组和中剂量组.与紫杉醇合用,肿瘤生长抑制率为60%,与模型对照组比较有较显著性差异(P<0.01).细胞周期分析表明肺复康将肿瘤细胞阻滞于G1期.结论:肺复康能明显改善小鼠生存状态,并对Lewis肺癌移植瘤有显著抑制作用,其抗肿瘤作用可能与调控肿瘤细胞周期及诱导肿瘤细胞凋亡有关.
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尿胰蛋白酶抑制剂Ulinastatin对lewis肺癌小鼠肿瘤生长和转移的抑制作用
目的探讨尿胰蛋白酶抑制剂(UTI)在动物模型上抗肿瘤作用.方法选用尿胰蛋白酶抑制剂乌司他丁(Ulinastatin),Lewis肺癌小鼠模型;雄性C57BL/6小鼠40只,接种lewis肿瘤细胞,分成生理盐水组(对照组)、环磷酰胺组(CTX)、Ulinastatin 2.5万单位组、Ulinastatin 5万单位组、Ulinastatin 10万单位组,各8只,接种后第6天,开始腹腔给药,记录皮下瘤长短径变化,做生长曲线;接种14天后处死所有小鼠,统计皮下平均瘤重和肺转移灶个数,使用流式细胞计分析凋亡率(AR)增值百分比(SPF).结果皮下瘤重依次为(7.92±2.52、0.66±0.50**、3.47±1.45*、3.08±0.81**、1.70±1.05**)g,平均肺转移灶依次为(8.625±1.407、1.125±1.126**、1.625±1.302**、1.00±0.75**、0.625±0.74**).CTX组(39.3±4.8)%*和Ulinastatin 10万单位组(40.2±3.1)%*的AR值明显增加,Ulinastatin未见SPF值明显减少.结论Ulinastatin对lewis肺癌小鼠的转移瘤生长和自发性肺转移有抑制作用.
关键词： 尿胰蛋白酶抑制剂 乌司他丁 Lewis肺癌小鼠 血浆纤维蛋白溶酶激活剂 -
丹红注射液对多柔吡星所致Lewis肺癌小鼠心肌损伤保护作用的研究
目的:研究丹红注射液(DH)对抗肿瘤药物多柔吡星(DOX)所致小鼠心肌损伤的保护作用及其机制.方法:通过腋下注射Lewis肺癌细胞建立小鼠实体瘤模型,随机分为4组:模型对照组、DOX组、DH组、DH+DOX组.实验结束,颈臼处死小鼠,无菌分离心肌和肿瘤组织,肿瘤称质量,比色法检测心肌组织中乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)的活性及丙二醛(MDA)的含量;流式细胞仪检测心肌细胞内的细胞凋亡、活性氧(ROS)和线粒体膜电位(△Ψm).结果:与模型对照组相比,DOX和DH+DOX组中肿瘤质量显著下降(P<0.01),且DH对DOX的抗肿瘤作用无显著影响;小鼠心肌组织中LDH和CK活性、细胞凋亡显著增加(P<0.01).与DOX组相比,DH+DOX组心肌组织中LDH和CK活性、细胞凋亡显著降低(P<0.01),且△Ψm、SOD、CAT与GPx的活性显著增加(P<0.05或P<0.01),MDA含量和ROS生成减少(P<0.01).结论:腹腔注射DH不影响DOX的抗肺癌作用,但对于DOX介导的心肌损伤具有保护作用,其机制与DH抑制心肌组织氧化应激和稳定△Ψm有关.
