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Twist和Snail在子宫腺肌病患者异位内膜组织中的表达及意义
目的 研究上皮间质转化(EMT)的主要转录因子Twist及Snail在子宫腺肌病(AM)患者异位内膜组织中的表达水平,探讨二者与AM的关系.方法 采用免疫组化(SP)法检测30例AM患者的异位子宫内膜组织(异位内膜组)、在位子宫内膜组织(在位内膜组)和30例正常子宫内膜组织(对照组)中Twist及Snail的表达情况,并分析二者表达的相关性.结果 异位内膜组、在位内膜组的Twist及Snail蛋白阳性表达率均高于对照组,且异位内膜组高于在位内膜组,差异均有统计学意义(P<0.05).异位内膜组中Twist与Snail的表达水平呈正相关关系(r=0.630,P<0.05).结论 EMT的主要转录因子Twist和Snail在AM患者异位内膜组织中的表达明显上调,二者可能通过相互作用,协同参与AM的发生与发展.
关键词： 子宫腺肌病(AM) Twist Snail 上皮间质转化(EMT) -
Tim技术CE-MRA在下肢动脉闭塞性病变中的影像研究
目的 分析下肢动脉闭塞性疾病采用Tim技术CE-MER诊断的临床应用价值.方法 选择该院2015年1月-2018年1月收治的35例高度疑似下肢动脉闭塞性病变患者,所有患者均行3D CE-MRA结合TWIST技术检查,对比手术结果分析Tim线圈3D CE-MRA结合TWIST技术诊断下影像学图像特征.结果 经分析35例患者的3D CE-MRA,所有患者均可耐受检查且获得了较好的原始图像,图像质量的优良率为(35/35) 100.00％.在35例中患者31例下肢动脉血管可见不同程度的狭窄或闭塞,共计173段血管,其中盆段82段,大腿段50段,小腿段41段,4例正常.结论 Tim线圈3D CE-MRA结合TWIST技术扫描可较为准确诊断评估下肢动脉不同节段血管不同程度的狭窄或闭塞,是一种诊断下肢动脉狭窄的无创、可靠、实用的血管检查方法.
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高剂量丹参、川芎对Lewis肺癌小鼠肿瘤的影响及机制研究
目的 探究高剂量活血化瘀药丹参、川芎对Lewis肺癌小鼠肿瘤侵袭转移的影响及其可能作用的机制.方法 采用腋下接种Lewis肺癌细胞悬液的方法制备Lewis肺癌小鼠模型30只,随机分为模型组、顺铂组、高剂量丹参组、高剂量川芎组、丹参联合顺铂组和川芎联合顺铂组,每组5只.顺铂组、丹参联合顺铂组和川芎联合顺铂组均给予顺铂4 mg/kg腹腔注射,高剂量丹参组、丹参联合顺铂组以2.16 g/kg剂量丹参灌胃,高剂量川芎组、川芎联合顺铂组以3.6 g/kg剂量川芎灌胃,模型组给予等体积生理盐水腹腔注射和灌胃.灌胃1次/d,腹腔注射于造模后第1、3、5天进行.每2 d记录1次小鼠体重,并于治疗后第14天将小鼠断颈处死取材,称取肿瘤质量,计算抑瘤率;采用Western-Blot法检测肿瘤组织内Twist和血管内皮生长因子(VEGF)的表达.结果 各组小鼠体重,模型组、高剂量丹参组和高剂量川芎组>顺铂组、丹参联合顺铂组和川芎联合顺铂组(P<0.05),高剂量丹参组、高剂量川芎组和模型组比较差异无统计学意义.计算抑瘤率,发现中药对肿瘤生长并没有抑制作用,反而具有促进作用.肿瘤组织免疫印迹结果显示高剂量川芎组肿瘤组织Twist蛋白表达高于模型组(P<0.05),高剂量丹参组肿瘤组织VEGF-A蛋白表达高于模型组(P<0.05).结论 高剂量活血化瘀中药川芎、丹参对Lewis肺癌小鼠肿瘤侵袭转移具有促进作用,其机制可能与调控Twist和VEGF-A蛋白的表达有关.
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活血化瘀类中药干预恶性肿瘤转移的作用机制与Twist节点及其下游信号通路的相关性
癌症致死的重要原因在于肿瘤转移,肿瘤转移过程是一个多因素调控、多步骤协同的复杂信息交互过程,Twist等少数高连接度的关键节点可以与很多低级节点连接并发挥调控作用,调控信息网络中关键节点可以以小代价起到“四两拨千斤”的效果,其调控效率远高于仅针对低级节点的单点调控效率叠加.活血化瘀类中药广泛应用于中医肿瘤临床治疗,经对比分析发现,活血化瘀药已知的作用机制与Twist介导的肿瘤转移调控通路高度吻合,提示Twist相关通路很可能是活血化瘀类中药抑制恶性肿瘤转移的核心作用机制,值得深入探讨.
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Twist在恶性肿瘤发生发展中作用及其中医药研究进展
在恶性肿瘤的发展进程中,Twist对多条通路均有调节作用,是作为节点调控的重要靶点.Twist转录因子是一种高度保守的碱性螺旋-环-螺旋分子,其异常表达在恶性肿瘤中可诱导肿瘤细胞上皮间质转化、肿瘤干细胞表型形成、能量代谢重调等诸多方面,可能成为诊断及预后的新指标.目前各种研究发现,中药可通过引起Twist表达改变抑制肿瘤进展,故将针对Twist在恶性肿瘤中的作用机制新进展及相关中医药研究进行综述,以期对未来研究提供新思路.
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UroplakinⅢ与Twist在膀胱尿路上皮癌中的表达及临床意义
目的 探讨UroplakinⅢ(UPⅢ)、Twist在膀胱尿路上皮癌中的表达及临床意义.方法 采用免疫组化SP法检测UPⅢ和Twist的表达.结果 UPⅢ在140例膀胱尿路上皮癌组的表达阳性率为15.7％ (22/140)低于70例正常膀胱粘膜组71.4％ (50/70),差异有统计学意义(P＜0.05).Twist在膀胱尿路上皮癌组的表达阳性率为72.9％ (102/140)高于正常膀胱粘膜组6.0％ (4/70),差异有统计学意义(P＜0.01).UPⅢ表达缺失与膀胱尿路上皮癌高分化,肌层浸润,淋巴管浸润呈正相关(P＜0.05).Twist阳性率与肿瘤分化程度,临床分期,淋巴管浸润有相关性(P＜0.05).两者均与患者年龄、性别无相关性(P＞0.05).结论 UPⅢ表达缺失及Twist的阳性表达均与膀胱尿路上皮癌的病理分级,TNM分期及淋巴管浸润有相关性,联合检测两者对诊断及评估预后膀胱尿路上皮癌有实用价值.
关键词： 膀胱尿路上皮癌 免疫组化 UroplakinⅢ Twist -
构架蛋白1及Twist在宫颈癌组织中的表达与临床意义
目的 探讨构架蛋白1(RACK-1)和Twist在宫颈癌中的表达与临床意义.方法 选取2010年5月至2012年5月在深圳市第二人民医院住院并接受手术治疗的宫颈癌患者70例,选取同期本院因宫颈良性病变行肿物剥除或附件切除的20例患者作为对照,应用免疫组化(SP)方法检测70例宫颈癌组织(宫颈癌组)、70例宫颈癌癌旁组织(癌旁组)、正常宫颈组织20例(正常组)中的Twist及RACK-1蛋白表达,分析其与宫颈癌患者临床病理指标的关系.结果 ①Twist在正常宫颈组织、癌旁组织和宫颈癌中的阳性率分别为5.0%(1/20)、22.9%(16/70)和95.7%(67/70)(χ2=24.581,P=0.001);RACK-1在正常宫颈组织、癌旁组织和宫颈癌中的阳性率分别为10.0%(2/20)、61.4%(43/70)和90.0%(63/70)(χ2=11.538,P=0.001).②Twist表达与肿瘤分化程度、淋巴结转移及TNM分期有关(P<0.05).RACK-1表达与肿瘤分化程度、浸润深度、淋巴结转移及TNM分期有关(P<0.05).③Twist及RACK-1存在正相关性(r=0.3,P<0.05).④Twist(+)~(++)表达者和(+++)表达者5年总生存率分别为51.2%和29.2%(HR=11.637,95%CI:4.351~38.213;P=0.002);RACK-1(+)~(++)表达者和(+++)表达者5年总生存率分别为41.3%和35.3%(HR=10.143,95%CI:4.285~33.275;P=0.006).结论Twist及RACK-1的增强表达与宫颈癌侵袭性增强有密切关系,其表达可作为判断宫颈癌患者预后的指标.
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Twist促进人三阴性乳腺癌细胞迁移和侵袭
目的 研究Twist基因沉默对人三阴性乳腺癌细胞Hs578T迁移和侵袭的影响及其潜在机制.方法 构建靶向Twist基因的慢病毒载体(shTwist)及其阴性对照病毒(shNC),转染人三阴性乳腺癌细胞Hs578T,建立Twist基因沉默的稳定细胞系;实验设对照组(blank)、阴性对照组(shNC)以及Twist基因沉默组(shTwist);经嘌呤霉素筛选后,倒置荧光显微镜观察各组细胞的荧光表达和感染效率,用RT-qPCR和Western blot检测Twist mRNA和蛋白的表达水平;Transwell迁移和侵袭实验分别检测细胞的迁移和侵袭能力;Western blot进一步检测Twist下游p-AKT、AKT、p-ERK1/2和ERK1/2蛋白水平.结果 成功构建Twist基因稳定沉默人三阴性乳腺癌细胞系Hs578T;与blank组和shNC组细胞相比,shTwist组细胞迁移和侵袭能力明显减弱(P<0.05,P<0.05);Twist下游p-AKT和p-ERK1/2蛋白水平显著下调(P<0.05,P<0.05).结论 在人三阴性乳腺癌细胞Hs578T中,Twist可能通过AKT和ERK信号通路促进细胞迁移和侵袭.
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Twist基因蛋白表达在甲状腺乳头状癌诊断与鉴别诊断中的意义
目的 探讨Twist基因蛋白在甲状腺乳头状癌中的表达状况,寻找更特异的标记物,用于甲状腺乳头状癌(PTC)与滤泡状腺瘤(FA)和良性乳头病变(BPL)的鉴别诊断.方法 以50例PTC为研究组,以48例FA和47例BPL作对照组.在自制组织芯片上行免疫组织化学(SP法)标记,检测Twist基因蛋白和HBME-1,并以CK19进行对照.结果 3种指标(Twist、HBME-1、CK19)阳性表达率:在PTC组分别为100%(48/48)、94.0%(47/50)和78.0%(39/50);在FA组分别为0、6.7%(3/45)和0;在BPL组分别为7.0%(3/43)、2.1%(1/47)和0.PTC组分别与FA和BPL组比较差异均有统计学意义(P=0.000).3种指标在鉴别诊断甲状腺良、恶性病变的灵敏度分别为:100%、96.4%和97.7%,特异度分别为:94.0%、95.7%和95.1%,准确度分别为:78.0%、100%和91.9%.结论 Twist可应用于辅助诊断PTC,并可应用在对FA或BPL的鉴别诊断.
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宫颈癌患者Twist、RACK-1蛋白检测的临床意义
目的:探讨宫颈癌患者Twist、RACK-1蛋白检测的临床意义.方法:选取宫颈癌患者40例纳入观察组,选取妇科良性病患者50例纳入对照组.采用免疫组化法检测并比较两组Twist、RACK-1阳性率和不同病理特征宫颈癌患者的Twist、RACK-1阳性率,以及Twist、RACK-1阳性率与临床病理特征的相关性.结果:观察组Twist、RACK-1阳性率均明显高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);Ⅲ～Ⅳ期、有淋巴结转移、浸润程度为T3、T4的宫颈癌患者Twist、RACK-1阳性率分别明显高于Ⅰ～Ⅱ期、无淋巴结转移、浸润程度为T1、T2的患者,差异有统计学意义(P<0.05);Pearson相关性分析显示,Twist、RACK-1阳性率与宫颈癌患者的肿瘤分期、淋巴结转移情况及肿瘤浸润程度均呈正相关(P<0.05).结论:Twist、RACK-1蛋白阳性表达率与宫颈癌患者的病情严重程度呈正相关,Twist、RACK-1蛋白检测可作为宫颈癌患者的诊治指标.
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卵巢癌中Twist和E-cadherin的表达及预后意义
目的 探讨Twist及E-cadherin(E-cad)在卵巢癌中的表达及预后意义.方法 选择具有完整临床病理资料及随访资料结果的卵巢癌50例,同时选取20例良性卵巢囊腺瘤组织和20例卵巢交界性囊腺瘤组织作为对照,采用免疫组织化学SP法分别检测Twist和E-cad的表达情况,分析其表达与临床病理特征及患者预后的关系.结果 Twist在卵巢癌中的表达显著高于良性卵巢囊腺瘤组织和交界性囊腺瘤组织(P<0.001);E-cad在卵巢癌组织中表达显著低于良性及交界性卵巢囊腺瘤组织(P<0.05).Twist和E-cad在卵巢癌中表达呈显著负相关(r=-0.491,P<0.001);卵巢癌组织中Twist的表达与临床FIGO分期、组织学分级、腹水、淋巴结转移相关(P<0.05);Kaplan-Meier生存曲线分析显示患者术后生存率随Twist阳性表达呈现下降趋势,而随E-cad阳性表达显著上升;单因素预后分析提示Twist(P<0.001)、E-cad(P＝0.042)表达异常、FIGO分期(P＝0.001)、组织学分级(P＝0.004)、腹水(P＝0.003)、淋巴结转移(P<0.001)与预后相关.Cox多因素分析提示仅FIGO分期为独立危险因素(P＝0.005).结论 卵巢癌中Twist与E-cad的异常表达与其侵袭转移密切相关,可能在卵巢癌的发生发展中起着重要作用,Twist和E-cad蛋白检测可作为临床上卵巢癌预后判断的参考指标之一.
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干扰Twist基因对胰腺癌PANC1细胞糖酵解的影响及机制研究
目的 观察干扰Twist基因表达对胰腺癌PANC1细胞糖酵解的影响,探讨其可能机制.方法 设计并合成靶向Twist的siRNA (siRNA-Twist),采用脂质体法转染胰腺癌PANC1细胞,以非特异性siRNA (siRNA-NC)作为阴性对照,以未转染细胞作为空白对照.采用RT-PCR和蛋白质印迹法检测各组细胞TwistmRNA和蛋白表达以及蛋白激酶B(Akt)、磷酸化Akt (p-Akt)蛋白表达;MTT法检测细胞增殖能力;检测糖酵解限速酶(丙酮酸激酶、己糖激酶)活性及培养上清中乳酸含量.结果 对照组、siRNA-NC组和siRNA-Twist组Twist mRNA表达量分别为1.00±0.09、1.01±0.08、0.36±0.02,蛋白表达量分别为0.41 ±0.05、0.42 ±0.04、0.12 ±0.06,siRNA-Twist组mRNA和蛋白表达量均显著低于对照组和siRNA-NC组,差异有统计学意义(P值均＜0.05);细胞存活率分别为(100.02±9.36)％、(100.01±10.25)％、(59.32±7.26)％,siRNA-Twist组显著低于对照组和siRNA-NC组,差异有统计学意义(P值均＜0.05);丙酮酸激酶活性分别为(0.73±0.05)、(0.72 ±0.08)、(0.43±0.05) U/mg,己糖激酶活性为(4.98±0.48)、(4.96±0.52)、(2.54±0.21) U/mg,乳酸含量分别为(20.36±2.61)、(20.64 ±3.05)、(9.48±1.09) mmol/L;p-Akt/Akt比值分别为0.65±0.04、0.63±0.07、0.25±0.04,siRNA-Twist组均较对照组和siRNA-NC组显著降低,差异有统计学意义(P值均＜0.05).结论 干扰Twist基因表达能够抑制胰腺癌细胞增殖和糖酵解途径,其作用机制可能与Akt信号通路有关.
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结直肠癌组织中Twist和E-钙黏蛋白的表达及其相关性
目的观察Twist和E-钙黏蛋白(E-cadherin)在结直肠癌中的表达,分析两者与患者临床病理指标的关系,并探讨其在结直肠癌发生、发展中的作用以及与患者预后的关系.方法采用免疫组化EliVisionTM Plus法检测60例结直肠癌、20例结直肠腺瘤和20例癌旁正常肠黏膜中Twist蛋白的表达情况.结果 (1)Twist在结直肠癌组织中的阳性率(56.7%)显著高于腺瘤组织(10%)和癌旁正常黏膜组织(0%);E-cadherin在结直肠癌组织中的阳性率(35%)显著低于结直肠腺瘤(70%)和癌旁正常黏膜组织(100%);(2)Twist和E-cadherin在结直肠癌异常表达均与肿瘤分化程度、浸润深度、淋巴结转移、TNM分期有关,与年龄、性别及肿瘤大小无关.结论 Twist是结直肠癌浸润和早期转移的重要生物学指标,联合检测Twist和E-cadherin有助于判断结直肠癌的转移和预后;Twist将来可能成为结直肠癌靶向治疗的一个新靶点.
关键词： 结直肠癌 结直肠腺瘤 肿瘤转移 Twist E-cadherin -
喉鳞状细胞癌组织Twist表达与上皮-间质转化相关性分析
目的 研究喉鳞状细胞癌及癌旁黏膜上皮组织中Twist蛋白的表达,分析其与喉鳞癌上皮-间质转化及侵袭转移之间的相关性.方法 采用免疫组化EnVision法检测湖州市中心医院2005-01-01-2010-12-30资料完整的74例喉鳞癌组织和30例癌旁黏膜组织中Twist、E-cadherin及N-cadherin蛋白的表达情况,统计分析三者之间的相关性以及与各临床病理指标之间的关系.结果 喉鳞癌组织Twist的阳性表达率为62.2％(46/74),明显高于癌旁黏膜组织的13.3％(4/30),x2=20.388,P＜0.01;喉鳞癌组织N-cadherin的阳性表达率为58.1％(43/74),明显高于癌旁黏膜组织的20.0％(6/30),x2=12.441,P＜0.01.39例喉鳞癌组织E-cadherin蛋白的表达明显减弱,而癌旁黏膜上皮均正常表达,两组间差异有统计学意义,x2=21.802,P＜0.01.Twist与N-cadherint蛋白表达正相关,r=0.527,P＜0.01;与E-cadherin蛋白呈负相关,r=-0.433,P＜0.01.Twist、N-cadherin蛋白过表达和E-cadherin蛋白低表达与喉鳞癌组织分级、T分期、TNM分期、甲状软骨侵犯及淋巴结转移具有相关性.Log-rank分析显示,Twist蛋白表达阳性喉鳞癌患者的5年生存率为21.7％,明显低于Twist阴性组的39.3％,P＜0.01.结论 Twist在部分喉鳞癌中表达上调,并且与肿瘤的侵袭、转移以及不良的预后相关,其促上皮-间质转化作用可能是重要机制.Twist蛋白检测对喉鳞癌患者预后的评估具有重要的参考价值,其基因也有望成为喉鳞癌的潜在治疗靶点.
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子宫内膜样腺癌组织Twist和HIF-1α及E-cadherin表达的临床意义
目的 探讨子宫内膜样腺癌转录因子Twist、乏氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF 1α)和上皮-间质转化(epithelial mesenchymal transition,EMT)表型分子E-钙粘素(E-cadherin)表达的临床意义及其相关性.方法 选取山东省潍坊市人民医院2010-03-01 2013-10-31收治的58例子宫内膜样腺癌患者癌组织和23例正常子宫内膜组织作为研究对象,免疫组织化学方法检测Twist、HIF-1α和E-cadherin蛋白表达,分析其与患者临床病理因素的相关性.结果 子宫内膜样腺癌组织Twist阳性表达率为55.2％,正常子宫内膜组织阳性表达率为4.3％,HIF-1α分别为60.3％和17.4％,E-cadherin分别为39.7％和100.0％,三者在子宫内膜样腺癌组织与正常子宫内膜组织中表达差异均有统计学意义,P值均＜0.05.Twist和HIF-1α表达增加及E-cadherin降低与子宫内膜样腺癌组织学肌层浸润程度和淋巴结转移有关(P＜0.05),Twist和HIF-1α表达增加与组织学分级和FIGO分期有关,P＜0.05.相关分析显示,Twist和HIF-1α蛋白表达均与E cadherin表达存在负相关性(r=-0.687,P＜0.001;r=-0.496,P＜0.001),Twist和HIF 1α蛋白表达呈正相关,r=0.474,P＜0.001.结论 Twist和HIF-1α表达增加及E-cadherin表达降低均参与子宫内膜样腺癌发生发展和转移,Twist、HIF-1α和E-cadherin检测有助于评估子宫内膜癌恶性程度.
关键词： 子宫内膜样腺癌/病理学 Twist HIF-1α E-钙粘素 免疫组织化学 -
非小细胞肺癌Twist表达与EMT相关性分析
目的:探讨非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)组织转录因子Twist的表达及其与上皮-间质转化(epithelial mesenchymal transition,EMT)的相关性.方法:选取2010-02-2011-11山东省肿瘤医院62例NSCLC患者肺癌组织和20例癌旁组织标本,采用免疫组织化学PV两步法检测Twist、EMT表型分子E-cadherin和Vimentin蛋白表达,并分析其与患者临床病理因素的相关性.结果:NSCLC组织Twist阳性表达率为64.5％(40/62),癌旁组织为5.0％(1/20),x2=21.426,P＜0.001;癌组织E-cadherin阳性表达率为54.8％(34/62),癌旁组织为100.0％ (20/20),x2=13.716,P＜0.001;癌组织Vimentin阳性表达率为51.6％(32/62),癌旁组织为10.0％ (2/20),x2=8.697,P=0.003.Twist表达增加与NSCLC分化程度(x2=6.282,P=0.043)、淋巴结转移(x2=11.806,P=0.001)和临床分期(x2 =6.277,P=0.017)有关.Spearman相关分析显示,Twist与E-cadherin表达呈负相关,r=-0.470,P＜0.001;与Vimentin表达呈正相关,r=0.429,P=0.001.结论:Twist高表达与肺癌发生发展、转移和EMT有关,Twist检测有助于肺癌评估恶性程度及预后.
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Twist基因转染对人宫颈癌细胞生物学行为影响的观察
目的:构建人Twist基因真核表达载体,并建立稳定高表达Twist的人宫颈癌HCC94细胞系,研究转染前后HCC94细胞生物学行为.方法:用RT-PCR法扩增人低分化宫颈癌HCE1细胞中Twist开放阅读框架,将PCR产物克隆到pZsGreen-C1真核表达载体,构建重组质粒pZsGreen-C1/Twist并鉴定.采用脂质体法把重组载体转染入人高分化宫颈癌HCC94细胞,经G418筛选获得稳定高表达Twist的细胞克隆,并进行荧光,蛋白质印迹法和RealtimeRT-PCR检测；MTT法和侵袭小室实验研究转染前后HCC94细胞的增殖、黏附和迁移能力.结果:成功构建pZsGreen-C1/Twist真核表达载体,筛选出稳定高表达人Twist的p-tw-1克隆,经荧光显微镜观察其转染效率＞70％.Realtime RT-PCR扩增曲线和熔点曲线显示,Twist基因有效扩增,p-tw-1组、p-tw-v(转染空载体)组和HCC94(未转染)组mR-NA相对表达量分别为4.14±2.26、2.03±1.10和1.90±0.78,p-tw-1组相对于其他两组水平明显上调,差异有统计学意义,F=10.24,P=0.001;而对照组之间差异无统计学意义,P=0.146.蛋白质印迹法检测结果显示,Twist基因稳定表达,p-tw-1组、p-tw-v组和HCC94组IOD与GAPDH比值分别为0.65、0.33和0.30.p-tw-1组细胞从第4天起生长趋势快于p-tw-v组和HCC94组,差异有统计学意义,F=24.113,P=0.000;而两对照组之间差异无统计学意义,P=0.229.P-tw-1、P-tw-v和HCC94组平均穿膜细胞数分别为(263.67±18.04)、(126.00±17.69)和(116.33±9.87)个,p-tw-1组细胞数明显增多,差异有统计学意义,F=83.093,P=0.000;p-tw-v与HCC94组之间差异无统计学意义,P=0.478.P-tw-1、P-tw-v和HCC94组黏附细胞平均A值分别为0.38±0.01、0.53±0.01和0.57±0.01,p-tw-1组A值明显降低,差异有统计学意义,F=65.086,P=0.000; p-tw-v组与HCC94组之间差异无统计学意义,P=0.244.结论:Twist基因高表达可增强宫颈癌细胞增殖和迁移能力,降低其黏附能力；Twist真核表达载体和稳定高表达Twist的HCC94细胞系构建为进一步研究Twist功能奠定了基础.
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Twist基因检测对大肠癌临床病理诊断价值的探讨
目的:探讨转录调节因子Twist在大肠癌组织中的表达及其在临床病理诊断中的应用价值.方法:应用鼠抗人Twist单克隆抗体采用SP免疫组织化学方法检测112例大肠癌组织及40例正常肠黏膜组织中Twist的表达,并与临床病理指标进行比较.结果:在112例大肠癌组织中,Twist基因阳性表达78例(69.6%),正常组织中为15例(17.5%),两者比较差异有统计学意义,χ2=11.21,P=0.001;进一步结合临床病理资料分析,Twist在大肠癌组织中表达与肿瘤的分化程度(χ2=9.575,P=0.008)、肿瘤浸润(χ2=8.183,P=0.017)、淋巴结转移(χ2=4.05,P=0.044)和Duke分期(χ2=11.114,P=0.011)有关;而与患者年龄(P=0.286)、性别(P=0.887)无关.结论:Twist基因表达对大肠癌临床病理学诊断有明确的指导作用.
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原发性肝癌Twist基因表达的研究
目的:研究Twist基因在人原发性肝癌(primary liver cancer,PLC)组织中的表达及其临床意义.方法:应用免疫组织化学SABC染色方法检测45例PLC组织及癌旁组织中Twist蛋白并采用RT-PCR对Twist mRNA的表达进行分析研究.结果:PLC组织、癌旁组织及正常肝组织中Twist的阳性表达率分别为80.0%、57.8%和22.2%.PLC和癌旁组织与正常对照肝组织中Twist的表达相比较差异均有统计学意义,P＜0.05.肿瘤包膜也可见Twist表达.RT-PCR检测Twist结果显示,PLC组织中Twist mRNA表达显著上调.结论:PLC组织中高表达转录因子Twist对肿瘤的发生、发展起着重要作用.
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TWIST介导的上皮-间质转化与宫颈癌发生发展相关性的研究
目的:探究TWIST介导的上皮间质化(EMT)在宫颈癌发生发展中的作用.方法:选取正常宫颈上皮、宫颈上皮内瘤变以及宫颈鳞状细胞癌患者标本共128例,石蜡包埋连续切片并运用免疫组织化学的方法检测TWIST和E-cadherin在各组织中表达情况；构建TWIST真核表达载体pcDNA3.1(+)/TWIST并建立高表达TWIST的宫颈癌细胞系pcDNA3.1(+)/TWIST/SiHa,观察稳转前后细胞形态学改变并运用蛋白质印迹法检测EMT相关标志蛋白变化.结果:TWIST在正常宫颈上皮、CIN Ⅰ～Ⅱ、CINⅢ到早期宫颈鳞癌(ⅠA～ⅡA期)及晚期宫颈癌(ⅡB～ⅢB期)中胞质阳性表达率分别为14.2％、63.4％、64.3％、100.0％和100.0％；胞核阳性表达率分别为21.4％、56.6％、57.1％、88.0％和100.0％.与此同时,E-cadherin在各期组织中胞膜表达阳性率分别为71.4％、36.7％、35.7％、12.0％和11.1％,而胞质表达阳性率分别为18.6％、63.3％、64.3％、88.0％和88.9％.同时,TWIST在各期组织胞质、胞核表达强度改变与E-cadherin在胞膜、胞质表达分布及强度改变相反.在伴有淋巴结转移的宫颈癌病例中,TWIST在胞质胞核中的强阳性率高于不伴淋巴结转移病例(P=0.012,P=0.033),高表达TWIST的SiHa细胞系细胞形态及EMT相关标志蛋白E-cadherin和Vimentin均发生明显改变,差异有统计学意义,P＜0.05.结论:TWIST在宫颈癌变发生发展的过程中表达逐渐升高,其介导的上皮间质转化贯穿宫颈癌发生发展的整个过程.
