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乳腺癌组织中Twist、MMP-2和MMP-9的表达及意义
目的 探讨乳腺癌组织中Twist、MMP -2和MMP -9表达的相关性.方法 采用SP免疫组化法检测70例乳腺癌组织(35例癌旁组织作为对照)中Twist、MMP -2和MMP -9的表达情况.结果 乳腺癌组织中Twist、MMP -2和MMP-9的阳性表达率分别为72.9％、55.7％和67.1％,均显著高于癌旁正常组织中的16.7％、28.6％和37.10％(P＜0.05).Twist、MMP -2和MMP-9与肿瘤的分化程度、浸润深度和淋巴结转移有关(P＜0.05).Twist的表达与MMP -2和MMP -9的表达呈正相关.MMP -2的表达与MMP -9的表达呈正相关.结论 Twist、MMP -2和MMP -9在肿瘤细胞发生浸润转移中有协同作用,可作为评估乳腺癌转移及预后的参考指标.
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Twist和E-cadherin蛋白在大肠癌中的表达和临床意义
目的 探讨Twist和E-cadherin蛋白在大肠癌发生发展中的临床意义.方法 采用免疫组化PV9000法检测78例大肠癌和42例大肠腺瘤组织中Twist和E-cadherin蛋白的表达.采用Western blot法检测Twist蛋白在30例新鲜大肠腺癌组织和30例新鲜大肠腺瘤组织中的表达.结果 Twist蛋白在大肠癌组织中的阳性率(56.4％)明显高于腺瘤组织(26.2％)和癌旁正常黏膜组织(10％);E-cadhefin在大肠癌组织中的阳性率(48.7％)明显低于腺瘤组织(76.2％)和癌旁正常黏膜组织(100％).Twist和E-cadherin在大肠癌中的异常表达均与肿瘤分化程度和淋巴结转移有关(P均＜0.05),而与肿瘤大小无关(P＞0.05).E-cadherin的阳性表达与肿瘤的TNM分期有关(P＜0.05),但Twist的阳性表达与TNM分期无关(P＞0.05).结论 Twist和E-cadherin蛋白在大肠癌的发生及癌组织的侵袭和转移过程中可能起重要作用.
关键词： 大肠癌 大肠腺瘤 Twist E-cadherin -
肝细胞癌中Pyk2、Twist及E-cadherin的表达及临床意义
目的 探讨肝癌组织中富含脯氨酸的酪氨酸蛋白激酶2(proline-rich tyrosine kinase-2,Pyk2)、Twist和E-钙黏蛋白(E-cadherin)的表达及临床意义.方法 收集滨州市人民医院2006年2月～2012年2月手术切除的80例肝癌组织标本作为研究对象,其中配对癌旁组织(距离癌组织边缘＜3 cm)50例.采用免疫组化EnVision法检测Pyk2、Twist和E-cadherin蛋白的表达,并分析其与临床病理特征和侵袭转移的关系.结果 Pyk2在肝癌组织及癌旁肝组织中的阳性表达率分别为71.3％、12.0％,差异有统计学意义(P＜0.05);Twist在肝癌组织及癌旁肝组织中的阳性表达率分别为66.3％、6.0％,差异有统计学意义(P＜0.01);E-cadherin在肝癌组织及癌旁肝组织中的阳性表达率分别为27.5％、90.0％,差异有统计学意义(P＜0.01).Pyk2、Twist和E-cadherin蛋白阳性表达与肝癌病理分级、分化程度、血管侵犯及TNM分期均明显相关(P＜0.05),肝癌组织中,Pyk2与Twist表达成正相关(P＜0.05),Pyk2和E-cadherin表达成负相关(P＜0.05),Twist和E-cadherin表达也成负相关(P＜0.05).结论 Pyk2、Twist及E-cadherin共同参与了肝癌的发生、发展,Pyk2可能通过上调Twist的表达促进肝癌侵袭转移.
关键词： 肝细胞癌 富含脯氨酸的酪氨酸蛋白激酶2 Twist E-钙黏蛋白 免疫组织化学 -
Twist、p53和E-cadherin联合检测在乳腺癌中的意义
目的 观察乳腺癌中Twist、p53和E-cadherin mRNA的表达及其相互关系.方法 选取2010年3月-2012年8月在医院初次就诊的乳腺癌30例均行改良根治乳腺癌标本,癌旁组织和10例同期乳腺良性病变的正常乳腺组织,分别运用RT-PCR的方法检测Twist、p53和E-cadherin mRNA的表达,与临床病理因素关系及其相互关系.结果 乳腺癌的Twist mRNA表达与分化程度,淋巴管浸润和TNM分期呈明显的相关性(P＜0.05),而与年龄、肿瘤直径、外膜浸润、雌激素受体和孕激素受体无明显的相关性(P＞0.05).乳腺癌组织中的Twist和p53的mRNA的表达较癌旁组织和正常乳腺组织明显提高(P＜0.01),而E-cadherin mRNA的表达较癌旁组织和正常乳腺组织明显降低(P＜0.01),癌旁组织和正常乳腺组织比较差异无统计学意义(P＞0.05).乳腺癌中的Twist mRNA表达与p53 mRNA呈正相关(r=0.526,P=0.004),而与E-cadherin表达呈负相关(r=-0.500,P=0.000).结论 Twist和p53在乳腺癌组织中呈高表达,而E-cadherin呈低表达.Twist可能通过上调p53的表达,同时下调E-cadherin的表达,从而促进乳腺癌的浸润、转移,并在其中起重要作用.
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Twist、p53和E-钙黏附蛋白联合检测在乳腺癌中意义
目的 观察乳腺癌中Twist、p53和E-钙黏附蛋白mRNA的表达及其相互关系.方法 选取初次就诊的30例乳腺癌患者行改良根治术的乳腺癌组织和癌旁组织及10例乳腺良性病变患者的正常乳腺组织,分别应用RT-PCR的方法检测Twist、p53和E-钙黏附蛋白mRNA的表达,与临床病理因素关系及其相互关系.结果 乳腺癌组织Twist mRNA表达与分化程度[高中分化93.33％(14/15),低分化53.33％(8/15)]、淋巴管浸润[是93.75％(15/16),否50.00％(7/14)]和TNM分期[Ⅰ～Ⅱ期46.15％(6/13),III～Ⅳ期94.12％(16/17)]有明显相关性(P＜0.05),而与年龄、肿瘤直径、外膜浸润、雌激素受体和孕激素受体无明显相关性(P＞0.05).乳腺癌组织中Twist和p53 mRNA表达较癌旁组织和正常乳腺组织明显升高[(112.36±12.53)％比(101.37±9.12)％和(98.03±9.04)％、(101.73±13.32)％比(91.43±7.43)％和(90.83±6.58)％,P＜0.01],而E-钙黏附蛋白mRNA表达较癌旁组织和正常乳腺组织明显降低[(55.43±12.49)％比(69.39±5.63)％和(72.73±7.93)％,P＜0.01],癌旁组织和正常乳腺组织比较差异无统计学意义(P＞0.05).乳腺癌组织中Twist mRNA表达与p53 mRNA呈正相关(r=0.526,P=0.004),而与E-钙黏附蛋白mRNA表达呈负相关(r=-0.500,P=0.000).结论 Twist和p53在乳腺癌组织中呈高表达,而E-钙黏附蛋白呈低表达.Twist可能通过上调p53的表达,同时下调E-钙黏附蛋白的表达,从而促进乳腺癌的浸润、转移,并在其中起重要作用.
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Twist基因的研究进展
Twist是一种高度保守的碱性螺旋-环-螺旋转录因子家族重要成员,在动物与人类的胚胎发育中起关键调控作用.在动物胚胎发育过程中,Twist作为转录因子在诱导细胞移动及组织塑形中起主要作用.近研究表明,Twist在表皮-间叶细胞转换调控中起着关键作用,Twist过表达在肿瘤的发生、侵袭转移、血管生成与肿瘤细胞耐药中发挥重要作用.Twist能通过多种途径引起肿瘤的发生,目前已在多种人类上皮来源肿瘤中发现Twist表达增高,并与患者预后关系密切.
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胆管癌中TWIST蛋白、Kiss-1蛋白和上皮黏附素的表达及临床意义
目的 探讨胆管癌中TWIST、Kiss-I和上皮黏附素(E-cadherin)的表达,观察三者在胆管癌发生、发展及转移中的作用,以期为临床工作提供理论帮助.方法 收集109例胆管癌标本作为观察组,收集70例正常胆管上皮组织作为对照组,应用免疫组织化学技术检测胆管癌中TWIST、Kiss-1和E-cadherin蛋白的表达,分析三者在不同临床特征中的表达差别及相关性.结果 TWIST在胆管癌组织中高表达(54.13％比15.71％),Kiss-1(31.19％比95.71％)和E-cadherin(27.52％比91.43％)(P＜0.01)在胆管癌组织中低表达,TWIST、Kiss-1和E-cadherin在不同分化、不同浸润深度、不同淋巴结转移患者中的表达有明显的差异(P＜0.05),观察组中TWIST、Kiss-1和E-cadherin的表达具有相关性(P＜0.05).结论 TWIST、Kiss-1和E-cadherin异常表达在胆管癌发生发展中起重要作用,三者具有协同效应,共同促进肿瘤的进展.
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Pyk2、Twist及MMP-7在肝细胞癌中的表达及临床意义
目的:检测肝癌组织中富含脯氨酸的酪氨酸蛋白激酶2(proline-rich tyrosine kinase-2,Pyk2)、Twist和基质金属蛋白酶-7(MMP-7)的表达,并分析它们相互之间的关系及其临床意义.方法:应用免疫组织化学法检测80例肝癌组织及癌旁肝组织中Pyk2、Twist及MMP-7蛋白的表达情况,分析其与临床病理因素的关系.结果:Pyk2在肝癌组织及癌旁肝组织中的阳性表达率分别为71.3%、12.0%,差异有统计学意义(P<0.05);Twist在肝癌组织及癌旁肝组织中的阳性表达率分别为66.3%、6.0%,差异有统计学意义(P<0.05);MMP-7在肝癌组织及癌旁肝组织中的阳性表达率分别为68.8%、8.0%,差异有统计学意义(P<0.05).Pyk2阳性表达与肝癌病理分级、分化程度、血管侵犯及TNM分期明显相关(P<0.05),Twist阳性表达与肝癌病理分级、分化程度、血管侵犯及TNM分期明显相关(P<0.05),MMP-7阳性表达与肝癌病理分级、分化程度、血管侵犯及TNM分期明显相关(P<0.05).肝癌组织中,Pyk2与Twist表达呈正相关(P<0.05),Pyk2和MMP-7表达亦呈正相关(P<0.05),Twist和MMP-7表达亦呈正相关(P<0.05).结论:Pyk2、Twist和MMP-7蛋白的表达水平在肝癌组织中与肿瘤组织的分化程度、病理分级、血管侵犯及临床TNM分期等均有关.因此,临床联合检测Pyk2、Twist和MMP-7对肝癌患者的预后判断具有重要意义.
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靶向Twist基因逆转卵巢癌耐药细胞化疗敏感性的研究
目的 探讨载体表达的小干扰RNA(siRNA)影响卵巢癌耐药细胞株Twist基因的表达、促进凋亡并逆转其阿霉素耐药的可行性.方法 体外构建Twist小发卡状RNA(shRNA)的表达质粒,脂质体法介导将其转染入SKOV3/ADM细胞.采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测Twist mRNA的表达;使用免疫细胞化学法(ICC)检测Twist蛋白的表达;使用四甲基偶氮唑蓝法(MTT)测定各组细胞对阿霉素的半数抑制浓度(IC50);流式细胞术检测其对卵巢癌细胞凋亡的影响.结果 Twist shRNA转染组细胞Twist mRNA 的表达与其他两组相比明显减弱,Twist蛋白表达明显下调,差异均有统计学意义(P<0.01);阿霉素敏感性比正常对照组提高了约2.5倍;流式细胞仪显示阿霉素作用24 h后,特异性转染组细胞周期分布发生明显改变,G0/G1期细胞比例增多,而S期细胞比例减少,凋亡率显著升高,差异有统计学意义(P<0.05).结论 针对TWIST合成的siRNA能够有效地抑制TWIST mRNA和蛋白的表达,促进卵巢癌耐药细胞凋亡并能恢复其对阿霉素的敏感性.应用RNAi技术,能够逆转卵巢癌细胞对化疗药物的耐药性.
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大肠癌中STAT3、Twist的表达及与EMT关系的研究
目的：分析与探讨大肠癌中STAT3、Twist的表达及与EMT（上皮细胞间质化）的关系。方法：选取本院结直肠癌、癌旁组织标本各80例，采用免疫组化方法检测STAT3、Twist及EMT相关蛋白的表达。结果：大肠癌中Twist与STAT3蛋白阳性率明显高于癌旁组织（P<0.05）；大肠癌中EMT阳性率明显低于癌旁组织（P<0.05）；STAT3、Twist的表达和EMT呈现正相关性（P<0.05）。结论：大肠癌中SATA3与Twist表达和肿瘤生物学特征存在相关性，临床检测STAT3、Twist及EMT有助于预测肿瘤侵袭转移与判断预后。
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Twist与RECK在非小细胞肺癌中的表达及其对预后的影响
目的 通过免疫组化法实验观察Twist和RECK在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达,探讨其在NSCLC中的临床意义及对疾病预后的影响.方法 采用S-P免疫组化法检测60例有完整资料的NSCLC术后肿瘤标本和60例距离肿瘤5 cm以上的正常肺组织中Twist与RECK蛋白的表达情况.通过Kaplan-Meier生存曲线法比较阳性组和阴性组患者的预后情况.结果 在非小细胞肺癌中Twist阳性表达率为65%,显著高于癌旁组织中的8.3%;RECK阳性表达率为51.7%,低于癌旁组织中的85%.Twist在非小细胞肺癌组织中的阳性表达与肿瘤的TNM分期、原发肿瘤大小、淋巴结转移情况及2年无瘤生存率有显著的相关性(P＜0.05).RECK在非小细胞肺癌组织中的表达与肿瘤TNM分期、原发肿瘤大小、淋巴结转移情况及2年无瘤生存率存在相关性(P＜0.05),而两者与其他病理因素无关(P＞0.05).Twist与RECK在非小细胞肺癌组织中的表达具有相关性(P＜0.05).Kaplan-Meier生存曲线分析显示患者术后2年无瘤生存率随Twist阳性表达呈现下降趋势,而随RECK阳性表达显著上升.结论 Twist、RECK可能在NSCLC的浸润、转移中存在相互作用,可作为反映NSCLC进展的重要生物学指标.Twist高表达、RECK低表达的患者易发生淋巴结转移,预后较差,术后2年无瘤生存率较低.
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PAB-Gal4-DBD-HA-Twist重组质粒的制备
目的：构建人Twist基因的表达载体pAB-Gal4-DBD-HA-Twist，为研究其转录调控机制提供实验工具。方法：重组克隆质粒pcDNA-Flag-Twist用含有特异BamHⅠ和HindⅢ酶切位点的引物进行聚合酶链反应；对含有两种酶切位点的目的Twist基因片段和pAB-Gal4-DBD-HA载体进行酶切、分离、回收纯化、连接后转入感受态DH5α中，细菌培养，菌落聚合酶链反应、测序鉴定。结果：鉴定结果显示，Twist基因正确克隆到PAB-Gal4-DBD-HA表达载体，并且转入了大肠杆菌中。结论：成功构建了人twist基因PAB-Gal4-DBD-HA-Twist表达载体，为进一步研究其表达、调控、作用机制奠定基础。
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Twist基因与妇科肿瘤发生发展的关系
Twist属于碱性的螺旋-环-螺旋蛋白家族,是一种高度保守的转录因子,在胚胎的发生发展中发挥重要作用,作为上皮-间质转变(EMT)过程中的关键调控因子,对肿瘤的侵袭,转移及耐药有重要影响.随着妇科肿瘤的发生和发展,Twist的表达逐渐增强,诱导肿瘤细胞发生EMT,使肿瘤呈现恶性表型,导致预后不良.现就Twist分子生物学特点、在肿瘤细胞中的信号转导途径和功能,及其在妇科肿瘤中的研究现状做文献综述.
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Twist、E-cadherin和β-catenin在肝细胞肝癌中的表达及其与预后的关系
目的:探讨Twist、E-cadherin和β-catenin在肝细胞肝癌复发与转移中的作用及与预后的相关性.方法:以石蜡包埋组织切片,免疫组化SP法染色分别检测97例肝细胞肝癌,其中复发与转移组49例,非复发与转移组48例Twist、E-cadherin和β-catenin的表达情况.结果:复发、转移与性别、年龄无关(P=0.424,P=0.738),与临床分期密切相关(P=0.000).复发与转移组Twist、β-catenin表达高于无复发与转移组(P=0.000;P=0.000),复发与转移组E-cadherin表达低于无复发与转移组(P=0.027).Twist,β-catenin阳性组平均生存时间分别为(28.880±3.285)、(31.477±3.359)个月,中位生存时间分别为26、28个月,阴性组平均生存时间分别为(44.603±3.521)、(42.009±3.720)个月,中位生存时间分剐49、45个月,Twist、β-catenin阳性组生存期较阴性组缩短差别具有统计学意义(P=0.002,P=0.029).E-cadherin阳性组平均生存时间为(44.514±3.447)个月,中位生存时间为49个月,阴性组为(29.110±3.581)个月.中位生存时间为25个月,E-cadherin阳性组生存时间较阴性组延长有统计学意义(P=0.002).结论:Twist、β-catenin过度表达,E-cadherin表达缺失可能与HCC复发转移、不良生存预后存在相关性.
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Twist促进人肝癌细胞的迁移
目的:研究Twist对肝癌细胞迁移能力的影响.方法:RT-PCR方法检测Hep-11和Hep-12中Twist的表达情况.将Twist-cDNA转染Hep-11筛选得到稳定高表达Twist的细胞克隆Twist-Hep-11.构建pSuper-Twist-shRNA干扰载体,瞬时转染Hep-12细胞.用Boyden小室检测过表达和抑制Twist基因后对细胞迁移和侵袭能力的影响.RT-PCR和Western blot检测Hep-11上调Twist后的EMT标志分子的表达.结果:与Hep-11相比,Hep-12的Twist基因表达显著上调,Hep-12的迁移能力也强于Hep-11.Hep-11细胞过表达Twist后,其迁移能力明显增强;而干扰Hep-12细胞Twist表达后,其迁移能力亦明显下降.Hep-11过表达Twist后,N-cad、Vimentin表达明显上调,E-cad变化不明显.结论:Twist可以促进肝癌细胞的迁移,其机制可能与N-cad、Vimentin表达上调有关.
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Twist对EMT调控在循环肿瘤细胞监测与抗癌药物评价中的临床意义
肿瘤细胞的上皮间质可塑性变化包括上皮-间质化（epithelial-mesenchymal transition，EMT）和间质-上皮转化（mesenchy?mal-epithelial transition，MET）的可逆过程，在循环肿瘤细胞（circulating tumor cells，CTCs）形成、转归及肿瘤转移过程中起到重要作用。Twist在人横纹肌肉瘤、乳腺癌、胃癌等多种肿瘤中过表达，肿瘤细胞中Twist与多种信号通路连接，形成复杂的网状环路参与调控CTCs中EMT/MET的发生并促进肿瘤细胞向远处转移。因此，通过监测CTCs中Twist本身以及所调控的上皮-间质表型分子标志物的变化，不仅可以增加肿瘤标志物CTCs的检出率，提供肿瘤临床分期及预后评估的直接证据；而且，对于评估多种抗肿瘤药物的疗效及耐药机制均具有重要的临床意义。
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前列腺癌组织中Twist和缺氧诱导因子-1α的表达及意义
目的 探讨Twist和缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)在前列腺癌组织中的表达及意义.方法 应用免疫组化(EnVision)法分别检测30例前列腺增生组织、30例前列腺上皮内瘤变组织及70例前列腺癌组织Twist、HIF-1α蛋白表达情况.结果 ①Twist、HIF-1α在前列腺增生组织、前列腺上皮内瘤变组织及前列腺癌组织中的阳性表达率分别为13.3%、43.3%、61.4%和16.7%、40.0%、64.3%,Twist、HIF-1α在前列腺癌组织中的阳性表达率均高于前列腺增生组织和前列腺上皮内瘤变组织,差异有统计学意义(P<0.01);Twist、HIF-1α在相同前列腺病变组织间表达差异无统计学意义(P>0.05).②Twist及HIF-1α的表达均与前列腺癌的Gleason分级、临床分期及骨转移相关(P<0.01,P<0.05),而与年龄无关(P>0.05).③Twist、HIF-1α在前列腺癌组织中过度表达,且两者之间呈显著正相关(r=0.63,P<0.01).结论 Twist、HIF-1α在前列腺癌发生演变过程中起着重要作用,同时检测两者的表达将有助于判断前列腺癌的预后.
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宫颈癌组织TWIST与E-Cadherin的表达水平及相关性分析
目的 探究宫颈癌组织TWIST与E-Cadherin的表达水平及其相关性.方法 选取2014年7月—2017年6月行全子宫切除术联合盆腔淋巴结清扫术治疗患者的完整宫颈癌标本74例作为宫颈癌组,同期行Leep手术切除或阴道下活检的完整宫颈上皮内瘤变(CIN)标本35例作为CIN组,以及同期因子宫肌瘤行子宫全切术治疗的正常宫颈组织22例作为正常宫颈组.检测TWIST与E-Cadherin蛋白的表达水平,分析其与宫颈癌临床病理特征的关系,并分析TWIST与E-Cadherin表达水平的相关性.结果 宫颈癌组的TWIST阳性表达率高于正常宫颈组和CIN组,E-Cadherin阳性表达率低于正常宫颈组和CIN组(P<0.05).与间质浸润深度<1/2患者比较,间质浸润深度≥1/2患者宫颈癌组织中TWIST的阳性表达率升高,E-Cadherin阳性表达率降低(P<0.05).与无淋巴结转移患者比较,有淋巴结转移患者宫颈癌组织中TWIST的阳性表达率升高,E-Cadherin阳性表达率降低(P<0.05).TWIST与E-Cadherin在宫颈癌组织中表达水平呈负相关(r=-0.511,P<0.001).结论 TWIST表达升高与E-Cadherin表达降低可能与宫颈癌的发生发展及浸润转移密切相关,二者可能具有拮抗作用.
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BRCA-1和Twist在乳腺癌中的表达及其相关性分析
目的 研究BRCA-1,Twist在乳腺癌组织中的表达及与乳腺癌临床病理参数的关系,了解两者表达的相关性.方法 应用免疫组织化学法检测BRCA-1,Twist在66例乳腺癌组织的表达.结果 乳腺癌中Twist的阳性表达与肿瘤的大小、患者年龄、组织学分级无明显相关性(P＞0.05),与淋巴结转移率及Ki67的表达率呈正相关(P＜0.05).BRCA-1的阳性表达与组织学分级、肿瘤大小、患者年龄及Ki67的表达率呈负相关(P＜0.05),与淋巴结转移率无明显相关性(P＞0.05).BRCA-1,Twist在乳腺癌中的表达呈负相关(r=-0.5,P＜0.05).结论 在乳腺癌组织中联合检测Twist,BRCA-1有望成为预测肿瘤预后的生物学指标.
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Twist蛋白上皮性钙黏蛋白mRNA及蛋白在喉鳞癌中表达的研究
目的 观察Twist蛋白、上皮性钙黏蛋白mRNA及蛋白在喉鳞癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系,并探讨其在喉鳞癌发生、发展中的作用及临床应用价值.方法 应用原位分子杂交检测上皮性钙黏蛋白mRNA和免疫组织化学SP法检测Twist蛋白、上皮性钙黏蛋白分别在80例喉鳞癌、30例不典型增生和20例慢性炎症组织中的表达.结果 ①Twist蛋白和上皮性钙黏蛋白与喉鳞癌TNM分期、甲状软骨受累、病理分级、淋巴结转移和远处转移有关(P＜0.05),与性别、年龄、临床分型无关(P＞0.05),但上皮性钙黏蛋白mRNA的表达与病理分级无关(P＜O.05).②Twist蛋白和上皮性钙黏蛋白在喉鳞癌组织中的表达呈负相关(r=-0.317,P＜0.05);上皮性钙黏蛋白mRNA和上皮性钙黏蛋白在喉鳞癌组织中的表达呈正相关(r=0.607,P＜0.05).结论 ①联合检测上皮性钙黏蛋白mRNA和上皮性钙黏蛋白在喉鳞癌中的表达,可以为临床早期诊断和治疗提供可靠的生物学指标.②对Twist蛋白和上皮性钙黏蛋白的深入研究有助于揭示肿瘤转移的发生机制,进而促进肿瘤的防治.
